②确定组数、计算各组剂量： 组数（G）：5-8 组 各组剂量：各组剂量要按等比级数排列，按 下列公式求出公比r:
按公比求各组剂量：D1，D2，D3，D4，D5，
……，Dm
其中D1=Dn=最小剂量，D2=D1·r，D3 =D2·r ，……Dm =D n-1· r ③配制等比稀释溶液：要求各小鼠给药容积 一样，0.1ml/10g∽0.2ml/10g，按下列公式计 算浓度：
⑶ 豚鼠：因其对组胺敏感，并易于致敏，故常被 选用于抗过敏药、平喘药和抗组胺药的实验。也常用 于离体心脏、心房、肠管实验。又因它对结核敏感， 常用于抗结核病药的实验。 ⑷ 家兔：常用于观察研究脑电生理作用，药物对 小肠的作用。由于家兔体温变化敏感，也常用于体温 实验，用于热原检查。 ⑸ 狗：狗是记录血压，呼吸最常用的大动物。还 可利用狗做成胃瘘、肠瘘，以观察药物对胃肠蠕动和 分泌的影响。在进行慢性毒性实验时，也常采用狗。
实验三 药物的协同作用和拮抗作用
［目的］ 观察激动剂与拮抗剂之间的相互作用 ［材料］ 兔子１只，0.05%硫酸阿托品注射液,0.1%盐 酸肾上腺素注液,0.2%硝酸毛果芸香碱注射液
［方法］ １、取兔放于兔固定箱内固定，避免阳光直射 眼睛，用毛剪剪去兔两眼睫毛，然后用瞳孔量 尺测量瞳孔大小，连续三次，取平均值。 ２、在兔左眼滴入０.2%毛果芸香碱3滴，滴药 时用姆指和食指将下眼睑提起,使成囊状,再用 中指压住鼻泪管开口处,防止药液流入鼻泪管而 不起作用，再用右手滴入药液。15分钟后再测 量瞳孔大小，连续三次，取平均值，并进行比 较。
6.动物的处死：大、小鼠通常用颈椎脱臼法 处死。
实验二 不同给药途径对药物作用的影响
一、实验目的 1.观察不同给药途径对同一药物的作用速度、 强度的影响； 2.观察同一药物从不同途径进入机体可产生 不同的作用。 二、实验材料 注射器、针头、小鼠灌胃针头、 烧杯、普通天平、硫酸镁溶液
三、实验内容 1.观察不同途径给小白鼠使用戊巴比妥钠
3、滴入毛果芸香碱20分钟后，分别在两眼滴 入0.1%肾上腺素3滴，15分钟后测量两瞳孔大 小，连续3次，取平均值并进行比较。 4、滴入肾上腺素15分钟后，分别于两眼滴入 0.05%硫酸阿托品注射液3滴，15分钟后观察两 眼瞳孔变化，并测量其大小，连续3次，并取 平均值。
［记录］
项
瞳 孔 大 小
③ 皮下注射(s.c.)：用左手固定小鼠后，右手持注 射器于拇指和食指捏起的皮肤处进针即可。
④ 静脉注射(i.v.)：将小鼠置于特制的固定筒内或 倒置的大漏斗下，让其尾部露出。用酒精或二甲苯 涂擦尾部，或将鼠尾在50'C热水中浸泡半分钟使血 管扩张。左手拉尾端，右手持注射器将针头刺入尾 静脉，推入药液。
药理学实验
药理学实验
实验一 药理实验基础知识 实验二 不同给药途径对药物效应的影响 实验三 药物的协同作用和拮抗作用 实验四戊巴比妥钠LD50的测定 实验五 利尿药对家兔尿量的影响
实验一 药理实验基础知识
一、目的
1.掌握基本操作，锻炼动手、动脑能力； 2.更好地掌握药理学基本理论知识； 3.培养科学思维
2、正式实验
①分组编号：随机将小鼠分为五组，每
组10 只，♀♂各半。 ②给药：分别将配制好的等比稀释液按 0.2ml/10g 由ip 给药。 ③观察记录：给药后观察并记录中毒症 状，30分钟后记录各组的死亡小鼠数。
[实验结果] 全班结果汇总，计算硝酸士的宁的LD50 、 LD50 的 可信限和可信限率。 ①结果处理 实验资料按下表列出：
⑵ 家兔
① 灌胃：需两人合作进行。一人取坐位用两腿夹 持兔身，左手握家兔双耳，右手抓住两前肢。另一人 将木制开口器横插家兔口内，压住舌头并固定之。取 8号导尿管从开口器中部小孔插入食道。插管时如误 入气管会出现动物的挣扎和呼吸困难。也可将导尿管 的外端浸入水中，如有气泡吹出，表示插在气管内， 此时应拔管重插。当判明导尿管在食道以内后，用注 射器接通导尿管将药液推入。
5. 动物的给药方法
⑴ 小白鼠 ① 灌胃法(i.g.)：以左手固定小鼠后，使其腹部 朝上，颈部伸直。右手持配有灌胃针头的注射器，自 口角插入口腔，再从舌面沿上腭进入食道。小鼠灌胃 容量一般为0.1-0.3m1／10g。 ② 腹腔注射(i.p.)：以左手固定小鼠，方法同灌 胃，右手持注射器，取30度角将针头从下腹部向头端 刺入腹腔。进针部位不宜过高，刺入不宜太深，以免 伤及内脏。小鼠腹腔注射量一般为0.1-0.3ml／l0g。
② 皮下、腹腔注射：给药方法基本上同小鼠，唯针 头可稍大，给药量可稍多。皮下与肌内为0.5-1.0/mg， 腹腔为1.0-5.0ml/mg。 ③ 静脉注射：将家兔置固定箱内，拨去耳壳外缘的 毛，选择一条比较明显的耳缘静脉，用酒精棉球涂擦 皮肤，使血管显露。用左手拇指和中指捏住兔的耳尖 部，食指垫在兔耳注射处的下面，右手持注射器，将 针头从近耳尖处刺入，当确认针头在血管中后，将药 液推入。
二、 基本要求
1. 实验前：预习实验内容并复习相关理论知识； 2. 实验时
⑴ 实验器材要妥善保管； ⑵ 实验操作按步骤进行，仔细观察实验中出现的现象，实 事求是地做好记录； ⑶ 注意节约实验药品； ⑷ 维持良好的课堂纪律。
3. 实验后
⑴ 各组同学将实验动物处死，实验台擦干净，将实验方盘 送回准备室； ⑵ 值日生搞好实验室卫生，将死亡动物送至指定场所； ⑶ 书写实验报告。
后，麻醉开始时间、维持时间和麻醉深度 的不同]取体重相近的小白鼠3只随机分为 三组，称其体重分别放入钟罩内，观察它们的 正常活动及翻正反射情况，然后按下表给药； 观察小白鼠用药后的反应及活动情况，以翻正 反射消失时作为麻醉开始指标。记录麻醉开始 时间，麻醉维持时间，麻醉深度有何不同（用 镊子夹其后肢看其反应）。
2.实验动物的编号 狗、兔等较大的动物可用特制的铝质号码牌 固定在颈部或耳上。大鼠、小鼠如为白色可 用黄色苦味酸在不同的体表标志上标记。
3.麻醉药的选择 ⑴局部麻醉：常采用2％普鲁卡因做皮下浸润注射， 可用于局部手术。 ⑵全身麻醉： ①吸入麻醉：可将乙醚蘸在棉球上放入玻璃罩内， 利用乙醚挥发的性质，经肺泡吸收，作用较快，适用 于小鼠、大鼠短时间麻醉。 ②注射麻醉：常用戌巴比妥钠和乌拉坦。
给药后注意观察动物的活动情况，是否有肌肉 松弛的表现。15min后每只小鼠均灌胃给予5% 炭末阿拉伯胶混悬液0.2ml。炭末灌胃后15min， 将小鼠脱臼处死，剖开腹腔，取出胃肠道。剪 去附着在肠管上的肠系膜,将肠管不加牵引地 轻轻地平铺在玻璃板上(玻璃板上滴少许盐水)。 以幽门为起点,测量炭末在肠管内的移动距离 和小肠(自幽门至回盲部)的全长,计算每只小 鼠炭末的移动距离占小肠全长百分率，比较3 组动物的活动状况和胃肠炭末推进率有何不同。
[实验结果] 实验结果填入下表中
不同途径对药物效应的影响
鼠号 体重(g) 药物及剂量 给药途径 动物反应 炭末推进率（%）
A B C
炭末推进率计算公式：
小肠推进率 =
炭末的移动距离（cm） ×100% 小肠全长（cm）
六、思考讨论题
1、灌胃和腹腔注射给硫酸镁的效应有哪些不 同？为什么？ 2、给药前动物禁食12小时的原因。 3、为何比较炭末推进率，而非小肠全长或炭 末在小肠内的推进距离？ 4、本次实验结果对临床用药有何提示？
LD50的测定方法很多，较为常用的有 改良寇氏法、简化概率单位法、序贯法 、孙瑞元点斜法和Bliss-Finney法。本 实验介绍结果较准确、计算简便、可计 算出全部有关参数的改良寇氏法及及计 算机应用程序中的Bliss-Finney法。
三、具体实验(以戊巴比妥钠为例)
［材料］
1.动物：小白鼠(体重18-22g，雌雄各半，实验前禁食12h) 2.器材：注射器、鼠笼、天平 、计算器等。 3.药品：戊巴比妥钠
受试物剂量 对数剂量 动物数 死亡率 概率单位 （mg/kg） (X) (只) (%) (Y) 1 2 3 4 5 LD50 及置信限(95%)
②计算方法 计算LD50及95%可信限： LD50=lg–1[Xm－i(∑P－0.5)] Xm=最大剂量的对数值 i=相邻两组比值的对数（lgr） P=各组死亡率 ∑P =各组死亡率总和 LD50的95%平均可信限= LD50±4.5LD50· SX50 其中SX50为LD50的标准误
三、实验报告的书写 1.题目 2.目的 3.原理 4.材料：实验动物，器材，药品 5.方法：用自己的语言简单扼要描述出来； 6.结果：要求真实、清楚； 7.讨论：将实验结果进行比较、分析；实验 中有哪些不足之处；结果异常或失败的原因； 8.结论：将实验结果进行归纳总结，应带有 提示性质。
四、实验设计基本原则
4.动物捉拿及固定方法
⑴ 小白鼠 右手抓住其尾部放在鼠笼盖铁纱网上，用左手拇指 及食指沿其背部向前抓起颈背部皮肤，并以左手的小 指、无名指固定其尾部，便可将小鼠固定在手上。 ⑵ 大白鼠 用右手提起尾部，放在粗糙面上，左手的拇指和食 指捉其头部，其余三指夹住背腹部即可固定。
⑶ 豚鼠 豚鼠性情温和不咬人，用手握住躯干即可。 ⑷ 家兔 可用一手抓住家兔颈背部皮肤，将兔提起，另一手 托其臀部，使兔呈坐位姿势。在进行仰位手术操作 时，可用绳带将其四肢仰位捆绑在兔手术台上。头 部用兔头固定夹固定。
目
左 眼 右 眼
正 常
毛果芸 香碱
肾上腺 素
阿托品
［讨论题］ 从实验结果中如何说明药物的协同作用和拮 抗作用？
实验四 戊巴比妥钠LD50的测定
一、毒理学实验方法
1.急性毒性实验：一次性大剂量给予药物 后观察药物的作用； 2.慢性毒性实验：长期连续多次给予中、 小剂量的药物，观察动物一些器官的慢性受 损程度； 3.特殊毒性实验：致癌，致畸，致突变， 过敏反应等。
[实验方法]
1、预实验：
①探索剂量范围：根据经验或文献找出动物 100%及0%死亡的剂量，即上下限剂量（Dm,Dn ）。对于无毒性参考资料的药物，一般先配制 最大浓度药剂，然后按等比关系（如2：1）稀 释成多个剂量，方法是每组取2 ∽ 10 只小鼠 ，按估计剂量给药，如果全死则降低剂量，如 果全活则增加剂量，进而确定出Dm,Dn。