2009年11月第6卷第2期Nov. 2009 No.2 vol.6- 16 -工程技术与应用分光光度法快速测定蔬菜水果中维生素C的含量于晓萍扬州工业职业技术学院 江苏 扬州 225127摘要：维生素C在食品中能起抗氧化剂作用，即它在一定时间内能防止油脂变酪。
维生素C是水溶性的，为此，笔者首先通过吸收光谱曲线法确定维生素C的水溶液的最大吸收波长为267nm，进而通过工作曲线法快速测定蔬菜水果中维生素C的含量，本方法与常规方法比较，具有快速、准确、简便、试剂易得等优点。
方法的RSD为0.75%~0.84%，回收率为99.7%~100.1%。
关键词：蔬菜；水果；维生素C；快速测定中图分类号：D65 文献标识码：A 文章编号：（2009）-02-016-03Quick Determination of Vitamin C Content inVegetables and Fruits by SpectrophotometryYu XiaopingYangzhou Polytechnic Institute, Yangzhou 225127, JiangsuAbstract: Vitamin C plays an antioxidant role in food, namely in a certain period of time it can prevent fats and oils from changing into cheese. Given the reason that vitamin C is water-soluble, the author first determine that Vitamin C water-soluble fluid biggest absorption wave length is 267nm through the absorption spectrum curve method, then with the working curve method, the vitamin C content in vegetables and fruits can be tested quickly. The results of testing indicate that the method has the merits of being quick, simple, accurate and facile reagent etc in comparison to conventional ones. RSD of the method is 0.75%~0.84% and the recovery is 99.7%~100.1%.Key word: vegetable; fruit; Vitamin C; quick determination引言维生素C(Vc)广泛存在于新鲜水果中，它具有保持肌肤润滑、防止衰老、抗坏血酸等作用，是人体必需的主要维生素之一[1][2]。
Vc在水果中主要以还原型(ASA)存在。
维生素C又名抗坏血酸，能溶于水、乙醇和甲醇，而不溶于其他有机溶剂，具有酸味和还原性，有4 种异构体，即L-抗坏血酸，D-抗坏血酸，L-异抗坏血酸，D-异抗坏血酸。
天然抗坏血酸主要以L-抗坏血酸为主，其效力最高，也是通常所指的抗坏血酸。
抗坏血酸在合适的条件下，可氧化成脱氢抗坏血酸，脱氢后的L-脱氢抗坏血酸在生物体内可还原为L-抗坏血酸，且这种变化是可逆的，故仍有生物活性。
脱氢抗坏血酸可进一步被氧化，生成二酮古洛糖酸，而这一过程是不可逆的。
在许多水果和蔬菜中，维生素C主要以还原型抗坏血酸存在。
维生素C的固体较稳定，水溶液最容易受氧化，所以测定维生素C的准确性很大程度上取决于分析技术。
蔬菜中维生素C含量的测定一般采用2，6-二氯靛酚滴定法、碘量法、2，4-二硝基苯肼法和萤光分光光度法等[3]，这些方法都有所用试剂不稳、操作程序复杂、费时等缺点，为此，笔者首先通过吸收光谱曲线法确定维生素C的水溶液的最大吸收波长为267nm，进而通过工作曲线法快速测定蔬菜水果中维生素C的含量，本方法与常规方法比较，具有准确、快速、稳定、试剂易得等优点。
收稿日期：2009-9-25作者简介：于晓萍（1970-），女，江苏扬州人，扬州工业职业技术学院，副教授，研究方向：仪器分析。
2009年11月第6卷第2期Nov. 2009No.2 vol.6- 17 -一、试验部分1.仪器试剂（1）主要仪器。
756型紫外-可见分光光度计；石英吸收池一对；榨汁机；50mL 容量瓶；1000mL 容量瓶；10mL 吸量管。
（2）试剂。
维生素C 标准溶液：25.00μg/mL。
称取0.2500g 维生素C，溶于蒸馏水中，定量转移至100mL 容量瓶中，稀释至标线，摇匀。
用吸量管吸取10.00mL 定量转移入1000mL 容量瓶中，用蒸馏水稀释至刻线，摇匀，因为维生素C 水溶液最容易受氧化，要求现配现用。
2.实验方法（1）标准系列溶液的配制。
分别吸取上述溶液0.00、2.00、4.00、6.00、8.00、10.00mL 于6个洁净且干燥的50mL 容量瓶中，用蒸馏水稀释至标线，摇匀。
（2）吸光度的测定。
1）绘制吸收光谱曲线。
以蒸馏水为参比，取上述配制的含维生素C 标准溶液6.00mL 的溶液，在220-320nm 范围绘制维生素C 的吸收光谱曲线，并确定入射光波长λmax。
2）绘制工作曲线。
以蒸馏水为参比，取上述配制的系列标准溶液，于λmax 波长处测吸光度，作标准曲线。
（3）样品分析。
样品用榨汁机获得蔬菜汁或加适量水匀浆，于1000r/min 下，离心10min，取上层清液，视Vc 含量及样液颜色确定稀释倍数（西红柿汁需要稀释100倍，黄瓜汁需要稀释100倍，苹果汁需要稀释100倍，西瓜汁需要稀释50倍），以使吸光度在合适的范围。
二、结果与讨论1.吸收曲线按上述实验方法所得数据绘制吸收光谱曲线(图1)，由图1可见，最大吸收波长在267nm 处，可作定量依据。
图1 吸收光谱曲线2.酸度对吸收波长的影响实验结果表明，不同pH 值下，维生素C 的最大吸收波长会有所变化。
当pH<4时，最大吸收波长紫移，这可能是由于维生素C 此时以离子化形式存在而造成的。
当pH>12时，最大吸收波长红移，很明显这是由于维生素C 在碱性环境中不稳定分解而引起的。
pH 值在5~10时的最大吸收波长不变，为267nm，但pH=6时的吸收值最大，故选择最佳pH 值为6。
3.标准曲线按上述实验方法绘制A-m(50mL 容量瓶中所含维生素C 的质量)标准曲线(图2)，由图2上查得稀释一定倍数后的蔬菜水果中的维生素C 的含量，（式中ρ为某蔬菜或水果中维生素C的含量，m x 为从标准曲线图上查得的稀释一定倍数后的蔬菜水果中的维生素C 的含量相当于50mL 容量瓶中所含维生素C 的质量），将实验所测定的西红柿、黄瓜、苹果、西瓜的测定计算结果列于表1中。
图2 标准曲线于晓萍：分光光度法快速测定蔬菜水果中维生素C 的含量表1 Vc 含量的计算结果蔬菜或水果名称西红柿黄瓜苹果西瓜榨汁中Vc 含量（μg/mL）38118028298.22009年11月第6卷第2期Nov. 2009 No.2 vol.6- 18 -工程技术与应用由以上数据可见，市售4 种蔬菜水果中Vc 的含量顺序是：西红柿＞苹果＞黄瓜＞西瓜4.回收实验准确吸取上述实验方法中稀释100倍后西红柿汁和稀释100倍后的黄瓜汁25.00ml于50mL容量瓶中，加2.00ml 25.00μg/mL维生素C标准溶液，用蒸馏水稀释至标线，摇匀。
测定该溶液的吸光度并从标准曲线上查找出所测定的50mL容量瓶中所含有维生素C(Vc)的含量。
结果见表2。
表2 回收试验结果(μg)样品名称及批号本底值(μg)加入量(μg)测定值平均值回收率西红柿稀释液（20070506号）95.350.0144.0;145.0;146.5;147.0;145.0145.5100.1黄瓜稀释液（20070508号）45.050.094.5;94.0;95.5;95.3;94.094.799.7注：实验数据为维生素C(Vc)的含量。
三、结论本次试验测量快速、稳定、使用试剂简单易得，有些水果略高(或略低) 于标准含量，这与被测产品的产地、品种、生长环境等因素有关。
经实验分析，本方法快速、准确、简便，有利于提高工作效率。
参考文献：[1] 张丙春,聂燕,孟立红等.水果、蔬菜有色提取液中Vc的测定——反滴定法[J].食品研究与开发,2001,23(3)：54-55.[2] 阎树刚,韩涛.果蔬及其制品中维生素C测定方法的评价[J].中国农学通报,2002,18(4)：110-112.[3] 黄伟坤.食品检验与分析[M].北京：中国轻工业出版社,1989：96-104.［责任编校：刘凤云］高等职业教育的管理人员与教师，我们应该对高等职业教育的发展多做研究与分析，以期高等职业教育获得更大、更好、更科学的发展，更好地适应行业的需求，服务于地方经济的发展。
参考文献：[1] 周三多,陈传明,鲁明泓.管理学原理与方法[M].上海：复旦大学出版社,2002.[2] (美)斯蒂芬·P·罗宾斯,玛丽·库尔特.Management[M].9thEdition.Prentice Hal.,2005.[3] 苏东水，彭贺.中国管理学[M].上海：复旦大学出版社，2009.[4] (美)詹姆斯·斯通纳（James A.F.Stoner）.Management[M].北京：华夏出版社,2001.[5] 胡象明.行政管理学[M].北京：高等教育出版社,2005.［责任编校：徐国方］（上接第15页）。