第 1 页共6页细胞工程一、基础小题针对练1．下列过程中，需要采用植物组织培养技术的是()①利用花药离体培养得到单倍体植株②利用秋水仙素处理单倍体试管苗，获得正常纯合植株③利用基因工程培育抗棉铃虫的植株④利用细胞工程培育“白菜—甘蓝”杂种植株⑤马铃薯的脱毒A ．①②③B．③④⑤C．①②④⑤D．①③④⑤选D2．下列有关动物细胞培养的叙述，正确的是()A．动物细胞培养过程中，可用胃蛋白酶处理使细胞分散开B．通过动物细胞培养获得大量细胞，可证明动物细胞具有全能性C．动物细胞培养技术是其他动物细胞工程技术的基础D．动物细胞培养选用的培养材料大多是动物的受精卵选C3．下图表示利用棉花叶肉细胞原生质体培养进行遗传改良的过程，据图分析错误的是 ()A．①过程需在适宜条件下用纤维素酶和果胶酶的混合物处理B．②过程能定向诱导原生质体产生优良性状的突变C．③过程中叶肉细胞失去了其特有的结构和功能D．④过程需用适宜配比的生长素和细胞分裂素处理选B4． (2016 ·营质检东 )对于下面制备单克隆抗体过程示意图，不．正确的叙述是()A ．①表示已免疫的B 淋巴细胞和骨髓瘤细胞均是从小鼠的脾脏中提取的B．②促进细胞融合的方法可以利用聚乙二醇作介导C．④中的筛选是通过抗原—抗体反应进行的D．⑤可以无限增殖选A二、高考题型仿真练5．为培育出含β胡-萝卜素的“黄金大米”，科研人员提出以下两套培育方案。

请分析回答下列问题：甲方案：①②③――→ β胡-萝卜素基因――→水稻体细胞――→“黄金大米”玉米体细胞乙方案：(1)甲方案中，β-胡萝卜素基因能在玉米和水稻体内出现相同表达结果的原因是_______________________________ 。

若研究人员已知β-胡萝卜素基因序列，可采用__________方法获得β胡-萝卜素基因。

②过程中可用______________技术检测水稻体细胞DNA上是否插入了β胡-萝卜素基因。

(2) 乙方案中，在体细胞杂交前需要用酶除去细胞壁获得原生质体，诱导体细胞融合的化学试剂常用______________。

通过⑤获得“黄金大米”幼苗需要经过__________________两个过程，依据的原理是__________。

在培养过程中，除了在培养基中添加营养物质外，还需要添加______________________________________。

(3) 与传统育种方法相比，甲、乙两套方案共同的优点是________________________ 。

答案：(1)所有生物共用一套遗传密码(密码子)人工合成DNA分子杂交(2)纤维素酶和果胶聚乙二醇脱分化和再分化(植物 ) 细胞的全能性(植物 ) 激素 ( 生长素和细胞分裂素)(3) 克服远缘杂交不亲和的障碍(打破生殖隔离)6.如图所示为动物细胞培养过程中，动物细胞增殖情况的变化曲线 (图中B 、D两点表示经筛选后继续培养)，请据图回答下面的问题：(1)OA段的培养称为______培养， AB段可能发生了______ 现象，需要用______酶处理，以使组织细胞分散开来。

(2) 动物细胞培养和植物组织培养过程中，就细胞增殖、分化来说，动植物细胞都要进行____________，不同的是植物细胞还要进行________________ 。

(3)为制备单克隆抗体，需将 ______注射到小鼠体内，以此获取 ______细胞，同时可选取图中______点的细胞与该细胞融合形成杂交细胞，所选取细胞的细胞膜上的______比正常细胞显著减少。

为筛选出能够产生单克隆抗体的杂交细胞，可用______培养基达到目的。

答案：(1) 原代接触抑制胰蛋白(2)增殖或分裂脱分化和再分化(3)抗原浆D糖蛋白选择7．人的血清白蛋白(HAS) 在临床上需求量很大，通常从血液中提取。

但由于艾滋病病毒等的威胁与日俱增，使人们对血液制品的使用顾虑重重。

如果应用现代生物科学技术，将人的血清白蛋白基因导入奶牛细胞中，那么利用牛的乳汁生产血清白蛋白就会安全、高效地满足人类需求。

下图是利用奶牛乳汁生产人类血清白蛋白的图解，根据图示回答：(1)以上过程涉及的现代生物技术中，属于细胞工程的有________________________________________________________________________ 。

(2)在基因工程中，我们称① 为目的基因，请举出获取目的基因的主要方法：________________________________________________________________________ (至少答两种 )。

在①进入③之前要构建基因表达载体，这是基因工程的核心，除目的基因外，基因表达载体还必须含有_________________________________________________ ，将①导入③的常用方法是__________________________________________________ 。

(3)图中②一般经过 __________处理可以得到③，从③到④的过程中一般利用未受精的卵母细胞去核后作为受体细胞，对卵母细胞的去核处理一般选择在__________期进行。

(4)培养④细胞与植物细胞培养所用的培养基有何不同？________________________________________________________________________ 。

答案： (1)核移植技术、动物细胞培养(2) 基因文库中提取、PCR 技术扩增、人工化学合成 (两种即可 )启动子、终止子、标记基因显微注射法(3) 胰蛋白酶或胶原蛋白酶M Ⅱ (或减数第二次分裂中) (4)此培养基中加入了动物血清、血浆等8．科学家利用植物体细胞杂交技术成功获得了番茄—马铃薯杂种植株，为了便于杂种细胞的筛选和鉴定，科学家利用红色荧光和绿色荧光分别标记番茄和马铃薯的原生质体膜上的蛋白质，其培育过程如下图所示：(1) 植物体细胞杂交依据的生物学原理有___________________________________________________ 。

(2)过程①常用的酶是 _________________ ，细胞融合完成的标志是__________________ 。

(3) 植物原生质体融合过程常利用化学试剂______诱导融合，在鉴定杂种原生质体时可用显微镜观察，根据细胞膜表面荧光的不同可观察到______种不同的原生质体，当观察到______________________________ 时可判断该原生质体是由番茄细胞和马铃薯细胞融合而成的。

(4)过程③和过程④依次为______________ ，过程④中的培养基常添加的植物激素是________________ 。

(5) 若番茄细胞内有m 条染色体，马铃薯细胞中含n 条染色体，则“番茄—马铃薯”细胞在有丝分裂后期含______条染色体。

若杂种细胞培育成的“番茄—马铃薯”植株为四倍体，则此杂种植株的花粉经离体培育得到的植株属于______植株。

胞壁答案： (1)细胞膜的流动性、植物细胞的全能性(2)纤维素酶和果胶酶(3)聚乙二醇 (或 PEG) 3融合的细胞表面既有红色荧光又有绿色荧光形成了新的细(4)脱分化和再分化生长素和细胞分裂素(5)2(m＋ n)单倍体9．人乳头状瘤病毒(HPV)与宫颈癌的发生密切相关，抗HPV的单克隆抗体可以准确检测出 HPV ，从而及时监控宫颈癌的发生，以下是以HPV衣壳蛋白为抗原制备出单克隆抗体的过程，请据图回答：(1)单克隆抗体制备过程中涉及的细胞工程技术有______________________ 。

(2)若要分析杂交瘤细胞中染色体，可通过__________________ 等过程制成装片，然后在显微镜下观察。

杂交瘤细胞中染色体数目与普通淋巴细胞相比具有的特点是______________，在 HAT 培养基上存活的细胞可能包括______(填下列序号 )。

①无抗体分泌的细胞②抗 HPV 抗体的分泌细胞③其他无关抗体的分泌细胞(3)对于抗体检测呈 ______ 性的杂交克隆应尽早进行克隆化，克隆化的方法最常用的是有限稀释法，即稀释细胞到3～ 10 个 /mL ，每孔加入细胞稀释液______mL( 填“0.1 ”“或1”“ 10”)，使每个孔内不多于一个细胞，达到单克隆培养的目的。

(4) 由上述过程生产出的单克隆抗体不能直接用于人体，理由是_________________ 。

(5) 科学家从某些无限增殖细胞的细胞质中分离出了无限增殖调控基因( prG )，该基因能激发动物细胞分裂，这为单克隆抗体的制备提供了更多的思路。

除本题描述的一种制备单克隆抗体技术外，请再简要写出一种制备单克隆抗体的思路_________________________ 。

答案：(1)动物细胞培养、动物细胞融合(2)解离、漂洗、染色和制片染色体数目加倍①②③(3) 阳0.1(4) 小鼠形成的抗体对人体来说是抗原，存在着排异反应(5)通过基因工程向浆细胞中导入prG ；利用核移植技术将浆细胞的细胞核移植到去核的无限增殖细胞中 (答对其一即可)10．利用 B 淋巴细胞杂交瘤技术制备出单克隆抗体的流程如下图所示。

请根据下图回答问题：(1)通过过程①得到的 B 淋巴细胞在从小鼠体内分离出之前，需对小鼠 ______________。

(2)过程②诱导融合运用的原理是 ____________ ，该过程中区别于原生质体融合的方法是用 ____________ 处理。

(3) 过程③至少需要通过2次筛选和克隆培养，其中第一次筛选的目的是获得__________ 。

图中X细胞具有____________________的特点。

单克隆抗体的特点是___________________ 。

(4)经过筛选和克隆化培养得到杂交瘤细胞后，一般采用体内培养和体外培养两种方式进行培养，动物细胞的体外培养对环境条件的要求比较高，如培养液需适宜的温度、____________________________ 等。

(答出两项即可)(5) 从图中可以看出，单克隆抗体的制备过程运用了__________ 和 __________ 等动物细胞工程技术。

答案： (1)注射特异性抗原(2) 细胞膜具有流动性灭活病毒(3) 杂交瘤细胞既能产生特异性抗体，又能无限增殖特异性强、灵敏度高、并可大量制备(4)pH 、动物血浆、气体环境、无菌、无毒的环境(答出两项即可)(5) 动物细胞融合动物细胞培养40.生物——选修 3：现代生物科技专题（ 15 分）某研究者用抗原（ A）分别免疫 3 只同种小鼠（ X、Y 和 Z），每只小鼠免疫 5 次，每次免疫一周后测定各小鼠血清抗体的效价（能检测出抗原抗体反应的血清最大稀释倍数），结果如下图所示。