氨在肝性脑病发病中的作用
The Role of Ammonia in the Mechanism of Hepatic Encephalopathy
【实验目的】
1.急性阻断肝脏血流造成急性肝功能损伤模型， 观察相关指标的变化。
2.对经不同处理的实验家兔灌入氯化铵或生理 盐水，观察出现相应症状的时间及所需的氯化铵 用量，测定各组动物实验后的血氨和尿素氮水平， 探讨氨在肝性脑病发病机制中的作用。
甲、乙兔灌复方氯化铵（ 3ml／kg／ 5min） 丙兔灌入生理盐水（3ml／kg ／ 5min ） 每次灌药前观察记录上述指标的变化。
四、血氨和血尿素氮（BUN）的测定 在甲兔第一次痉挛抽搐发作时，固定甲兔，心脏采血5ml，
测定血氨（ 1ml ）和血尿素氮。 其它组按甲兔出现痉挛抽搐的时间进行心脏取血，测定血氨
535.91
整理实验数据，填写上表，分析和讨论氨在肝性脑病发病 机制中的作用。
【思考题】 1、结扎肝门血管以及灌入氯化铵是否复制肝性脑
病的动物模型？为什么？ 2、为什么要设立甲、乙、丙组家兔，作用何在？ 3、灌入复方氯化铵溶液后，甲组家兔的呼吸如何
变化？为什么？ 4、血氨和血尿素氮的变化有何关系？道理何在？ 5、氯化铵在哪些方面对CNS起作用？
组别
症状
剂量 时间 血氨（mg/L） 血BUN（mg/L）
呼吸 肌无力 抽搐 ml/ Kg min 变化
实验前 实验后
实验前 实验后
甲 86 不明显 √ 16.8 23′30″
1948
236.8
乙 88 减弱
√ 25.2 39 ′ 1.23±0.47100
28.0±98 48.21
丙 78 不明显
31.52
甲组：结扎肝蒂 乙组：不结扎肝蒂 丙组；结扎肝蒂
（2）十二指肠插管（三组均做）： 沿胃幽门向下找出十二指肠，肠壁作一小切口，插入胃
管（顺十二指肠远端方向插入肠腔5cm），结扎并固定，作 荷包缝合。
将腹壁做连锁缝合，关闭腹壁，用胶布把胃管固定于一 侧耳背上，把家兔松开。 三、实验观察
观察家兔的一般状况、呼吸、肌张力、角膜反射和痛觉 反射等指标。
（3ml/kg/5min） (2)乙组：假手术（不结扎肝蒂）+复方NH4Cl溶液
（3ml/kg/5min） (3)丙组：肝大部分结扎（结扎肝蒂）+NS溶液
（3ml/kg/5min）
2、急性肝功能不全动物模型的制备： （1）结扎肝门区血管（肝蒂）
①用手轻压肝表面，在肝与膈肌之间小心用眼科剪将镰状 韧带剪断（切莫损伤膈肌）；②翻出除右外叶和尾叶外的 全部肝叶；③结扎肝蒂。
0.4ml／10g
4 2.5%NH4Cl, 1.5％NaHCO3溶液 0.4ml／10g
5 50％谷氨酸钠, 2.5%NH4Cl溶液 0.4ml／10g
3.通过各组动物的不同处理，进一步加深对医 学研究设计的理解。
【实验原理】
肝性脑病是继发于严重肝功能损害的精神神 经综合症。关于其发病机制尚未完全阐明。其中， 氨中毒学说备受重视，氨中毒学说的中心内容是 肝性脑病的发生与血氨升高密切相关。正常情况 下，血氨的来源和清除保持动态平衡。肝细胞通 过乌氨酸循环把2个氨分子合成为1个尿素分子， 再由肾脏排出体外。本实验人为地阻断肝脏的血 流，造成肝功能急性损伤的同时，再经消化道灌 入复方氯化铵溶液，使血氨水平明显升高，产生 类似肝性脑病的临床表现。
6、根据氨中毒学说和上面的实验结果推理，表 中5只小鼠腹腔注入不同试剂后会出现什么表现？ 小鼠可能发生死亡的次序是什么？本实验说明什么 问题？
小鼠氨中毒的实验设计
鼠号 给药试剂
剂量
死亡次序
1 0.85%NaCl溶液
0.4ml／10g
2 2.5%NH4Cl溶液
0.4ml／10g
3 0.5％醋酸, 2.5%NH4Cl溶液
【实验器材、动物和药品】 见实验指导
【实验步骤和观察项目】
一、家兔称重，固定，上腹部剪毛。在上腹部正中切口部 位用1％普鲁卡因5ml做皮下浸润麻醉。切开皮肤，沿腹白线 剖开腹壁，长约5—6公分，可见肝脏。
二、急性肝功能不全动物模型的制备及分组 1、实验分组 (1)甲ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ：肝大部分结扎（结扎肝蒂）+复方NH4Cl溶液
各组家兔症状及血氨、尿素氮的变化
组别
症状
剂量 时间 血氨（mg/L） 血BUN（mg/L）
呼吸 肌无力 抽搐 ml/ Kg min 变化
实验前 实验后
实验前 实验后
甲
乙
1.23±0.47
28.0±98
丙
整理实验数据，填写上表，分析和讨论氨在肝性脑病发病 机制中的作用。
各组家兔症状及血氨、尿素氮的变化
（ 1ml ）和血尿素氮。 【注意事项】
1、动作要准确、轻柔，以免肝叶破裂出血和损伤隔肌造成 气胸；
2、结扎肝脏时，粗棉线要置于肝叶根部避免勒破肝脏，要 用力结扎，阻断肝脏的血液供应。
3、心脏取血时，注射器要肝素化并干燥，以免溶血；入针 部位要准确，垂直进针，深度适当；
4、每组一位同学负责血氨和血尿素氮（BUN）的测定