外周血PBMC的分离
外周血各种血细胞的密度不尽相同，利用淋巴细胞分层液(Ficoll)作密度梯度离心, 使一定比重的细胞群按相应密度梯度分布，从而将各种血细胞加以分离。

外周血
红细胞
粒细胞
单个核细胞
(PBMC)
"血小板
淋巴细胞
单核细胞
1.093
1.092
1・075~1・
090
1・030~1・
035 Ficoll： 1.077士
0.001
稀释外周稀释的血浆、血小板
Ficoll 1500rpm, -----------
20C , 30min
Ficoll
PBMC
红细胞
粒细胞
实验步骤
1. 采血，稀释
（外周血：稀释液=1：2）
2. 在离心管中加入Ficoll,沿倾斜的管壁缓缓加入稀释的外
周血（Ficoll:稀释血=1: 2）
3.18C, 1500r/min，离心30min
4. 轻轻吸取PBMC 层移入另一试管中
5. 加足量稀释液充分洗涤，1800 r/min离心5min，弃上清。

注意事项
每毫升外周血液大约可获1 x 106单个核细胞
Ficoll 应适量,外周血应充分稀释
温度直接影响到Ficoll 的比重和分离效果
在Ficoll 上加入稀释外周血时,应缓慢加,以免冲散界面吸取单个核细胞层时, 应避免吸出过多的上清液或分层液而导致
血小板污染。