药品微生物检验的现状与发展
• 历史沿革 • 新中国第一部药典（1953年版）收载了无菌检查法 • 我国开展药品微生物限度检查始于1972年。 • 1978年颁发了第一个“药品卫生标准”。 • 1995年版中国药典首次收载了微生物限度检查法，2000年
版收载了微生物限度标准。 • 从第八届药典委员会（2005版中国药典）开始设立微生物
控制菌检查法修订解析
本检查法可采用替代的微生物检查法，包括自动检测方法， 但必须证明替代方法等效于药典规定的检查方法---新增内 容
在各控制菌项下：生化试验和“应进行分离、纯化及适宜的 鉴定试验”改为较少的生化试验或“采用其他适宜方法进 一步鉴定”---较大改变
检查项目
菌种的传代、保藏与管理
控制程序
原辅料、中药提取物和中 药饮片，
参考制剂的要求及生产工艺特点设置 控制军检查要求
《中国药典》2015年版-非无菌产品微生物检查法
• 格式变化 • 通用要求
检测环境 供试品前处理---抑菌性去除 微生物计数法使用范围---可采用替代检查方法 微生物计数定义变化--需氧菌总数（胰酪大豆胨琼脂）， 霉菌和酵母菌总数（沙氏葡萄糖琼脂）
人员
• 相关的教育背景 • 应经过生物安全方面培训，保证安全 • 不断地继续培训，保证知识与技能不断地更新 • 熟悉、规范理解和执行 • 能力评估-通过质量控制、能力验证等 • 培训、考核等档案
专业委员会。
药品微生物检验的现状与发展
中国药典的标准修订：
• 2005版
• 将按剂型制定 限度修订为按 给药途径制定 限度
• 强调微生物检 验的“方法验 证”
• 无菌检查培养 时间与国外接 轨
• 2010版
• 质量标准体系 基本与国外接 轨
• 强调对微生物 检验过程的验 证及过程控制
• 部分品种特别 是抗生素品种 的无菌检查法 由附录走入各 论。
《中国药典》2015年版-微生物限 度检查解析
质量部 2014.06.21
目录
• 药品微生物检验的现状与发展 • 《中国药典》2015年版-微生物限度标准修订解析 • 《中国药典》2015年版-非无菌产品微生物检查 • 菌种的传代、保藏与管理 • 药品微生物污染源的调查与分析 • 微生物实验室相关要求与质量管理
修订后限度标准更清楚明了（共8项、4个表）
• 1.制剂通则、品种项下要求无菌的制剂及标示无菌的制剂和原辅料 应符合无菌检查法 规定。
• 2.用于手术、烧伤或严重创伤的局部给药制剂 应符合无菌检查法规定。 • 3. 非无菌化学药品制剂、生物制品制剂、不含药材原粉的中药制剂的微生物限度标准
（见表 1） • 4. 非无菌含药材原粉的中药制剂微生物限度标准（见表 2） • 5. 非无菌的药用原料及辅料微生物限度标准（见表 3） • 6. 中药提取物及中药饮片的微生物限度标准（见表 4） • 7.有兼用途径的制剂 应符合各给药途径的标准。 • 8.霉变、长螨者 以不合格论。
微生物检验的现状与发展
质量管理：
1.方法验证与方法适用性 建立实验室自身的方法依据体系 2.维护、计量、校准、性能确认和使用监控（温度测量装置、
培养箱、水浴箱、烘箱、压力灭菌器、天平、量器等等） 3.供应商评估与现场审计 使用正确的、有严格质量保障的产品
《中国药典》2015年版-微生物限度 标准修订解析
表1
非无菌化学药品制剂、生物制品制剂、不含药材原粉的中药制剂的微生物限度标准
表 2 非无菌含药材原粉的中药制剂微生物限度标准
表 3 非无菌的药用原料及辅料微生物限度标准 表 4 中药提取物及中药饮片的微生物限度标准
注*：限度未做统一规定。
执行及制定标准的注意事项
执行范围： 生产、贮存、销售过
菌种来源

菌种的保 管
菌种的复 活
菌种确认
菌种的储 存和领用
菌种的销 毁及领用
记录
菌种传代、保存、使用及销售记录
菌种名称：
菌种编号：
保管人：
日期：
药品微生物污染源的调查与分析
微生物实验室相关要求与质量管理
2015年版药典框架 人员、培养基、试剂、菌种、环境、环境、样品、检验方 法、污染废弃物处理、检测结果质量保证和检测过程质量 控制、实验记录、结果判断检测报告、文件
菌种 传代 保藏 菌液制备---室温2小时，2~8°C，24小时内使用 培养基 培养条件---需氧菌总数 30~35°C 3~5天；霉菌和酵母 菌数 20~25°C 5~7天。
增加新概念
• 1.MPN法使用范围：含菌量较低的供试品细菌总数测定 • 2.“分散均匀”：并非一定要溶解 • 3.偏差调查概念引入 • 当检验结果出现超常或超标时需要进行偏差调查 • 调查范围：人、机、料、法、环
2015版 修订后的中国药典微生物检验 系统成为一个较完备的标准体系， 将收载15个左右的微生物检查法 或知道原则
修订后的中国药典微生物检测 系统与国外完全一致 对实验环境进行了重大修改
药品微生物检验的现状与发展
面临的挑战：
1.医药产品的发展 2.基本“矛盾” “有菌的环境”生产“无菌的产品” 3.特殊的医药环境 输液品滥用！中西药并存！ 4.不断有人死亡 “欣弗事件” 5.药品微生物污染的反思
程中的药品 药用原料、辅料 中药提取物、中药饮
片 新药标准 进口药品标准复核 药品质量考察及仲裁
标准执行的注意事项： 药典标准出处：中国药典
通则项下【微生物限度】 要求。 沙门菌检查： 检查对象：口服制剂
含药材原粉（不再界定是否为动物药材）
含脏器提取物（不区分是否为中药制剂）
标准修订内容 修订思路1 《中国药典》2010年版一、二、三部限度标准的相关内容合
并。 修订思路2 参考EP7.0，USP35，JP X V标准，修订中国药典的微生物
限度标准。
标准修订内容
参考欧美日药典标准 <1>修订菌数标准表达方式： 指数形式10ncfu，最大可接受限度值遵守2倍规则： 101cfu： 可接受的最大菌数为 20； 102cfu： 可接受的最大菌数为 200； 103cfu： 可接受的最大菌数为 2000：依此类推。 <2>检查指标： 需氧菌总数：TAMC（替代细菌数）----胰酪大豆胨琼脂培养基 耐胆盐的格兰阴性菌（替代大肠菌群） <3>检查制剂分类： 齿龈、皮肤制剂 原辅料、中药提取物、中药饮片的控制 呼吸道制剂耐胆盐格兰阴性菌的控制