经口急性毒性试验.
大小鼠标记方法(单色法n>10)
双 色 法
大小鼠标记方法(双色法n<10)
红色表示十位数: 头部染红色为10
左前肢为20
左腰部为30 黄色表示个位数。 大小鼠标记方法(双色法n>10)
其它标记方法
烙印编号法:
体内埋号编号法:
耳孔编号法:
挂牌编号法:
实验动物的随机分组
表1 动物随机分组表 动物号 随机数字 除6余数 分组 动物号 随机数字 除6余数 分组 1 97 1 A 16 27 3 C 2 74 2 B 17 7 1 A 3 24 0 F 18 36 0 F 4 67 1 A 19 7 1 A 5 62 2 B 20 51 3 C 6 42 0 F 21 24 0 F 7 81 3 C 22 51 3 C 8 14 2 B 23 79 1 A 9 57 3 C 24 89 5 E 10 26 2 B 25 73 1 A 11 42 0 F 26 16 4 D 12 53 5 E 27 76 4 D 13 32 2 B 28 62 2 B 14 37 1 A 29 27 3 C 15 32 2 B 30 66 0 F
组 别 A B C D 1 2 7 26 4 5 9 27 14 8 16 鼠 号 17 10 20 19 13 22 23 15 29 25 28
E
F
12
3
24
6 11 18 21 30
具体方法如下:继续抄下随机数字分别除以A、B、C、F组的现有动物数,即: 56/7(7为A组现动物数)整除,余数为0,将A组第7只动物(25号)调配给D组;下一 个:50/6(6为A组现有动物数)余2,将A组第2只动物(4号)调配给D组;接下来 26/6(6为C组现有动物数)余2,将C组第2只动物(9号)给D组。余类推,最后调整
分组成表3所示。雌性动物也按上法分组,然后将雌、雄动物合组进行试验。
表3 调配后30只动物随机分组
组别 A 1 14 鼠号 17 19 23 组别 D 4 9 鼠号 25 26 27
B
C
5
7
8
16
10
20
13
22
15
29
E
F
2
3
6
11
12
18
24
21
28
30
实验动物染毒途径和方法(示教)
常用的染毒途径: 经口染毒 经呼吸道染毒
面向自己,沿着门牙左 边滑入
气管
By LASCO
食道
经皮染毒
注射途径染毒
吸收速率:
静脉注射>吸入染毒>肌肉注射>腹腔注射>皮下注射> 经口染毒>皮内注射>其他染毒途径如经皮等
受试物的配制
1、受试化学物的量取
(1)、称量法--固体化学物
(2)、吸量法--液体化学物
2、受试化学物的稀释
(1)、等浓度Rat)
实验动物的称重
大、小鼠秤的感应量需在0.1g以下。 同一组内、同性别动物体重差异应
小于平均体重的10%。
不同组间同性别动物体重均值差异
应小于5%。
急性毒性实验一般使用体重为18-
22g的小鼠或/和180-220g大鼠。
实验动物编号的标记方法
颜料涂擦被毛编号法(常用于大小鼠): 红色:0.5%中性红或品红溶液 黄色:3-5%苦味酸溶液(水) 80-90%苦味酸酒精饱和溶液 咖啡色:2%硝酸银
10m1)、容量瓶(10,25,50ml、烧杯(10,25,50ml)、滴管、
灌胃针(大鼠、小鼠适用)、电子天平(感应量1/10000g)、动物 体重秤、外科剪刀、镊子。
(三) 试剂
受试化学物为氟化钠(NaF,分析纯),苦味酸酒精饱和液 或其它染色剂。
实验动物的选择(提问)
实验动物的性别鉴定
♀
♂
规定:
余数:1、2、3、4、5、6分别对应A、B、C、D、E、F 组
实验动物调配
按上法分组后,A组有动物7只,B组7只,C组6只,D组与E组各2只,F 组6只。为了使每组动物数均为5只,需要根据随机分配的原则再选出2
只A组和1只C组动物给D组。B组选出2只,F组选出1只给E组。
表2 初步分组结果
n—为设计的剂量组数;
求得值后以最低剂量组的剂量值加上一个即是第二个剂 量组的对数剂量,依次推至最高剂量组,查各自反对数 及得出各组剂量的真实值。
小鼠氟化钠经口急性毒性测量
啮齿类动物急性毒性中毒主要观察内容 (1)
系统器官 中枢神经系统及神经肌肉系统 观察及检查项目 行为 动作 对各种刺激的反应 大脑及脊髓反射 肌肉紧张力 瞳孔大小 分泌 呼吸系统 鼻孔 呼吸性质和速率 流鼻涕 弛缓、困难、潮式呼吸 中毒后一般表现 改变姿态、叫声异常、不安、安静 震颤、运动失调、麻痹、惊撅、强制性动作 易兴奋、被动、缺乏知觉、知觉过敏 减弱、缺乏 强直、弛缓 扩大或缩小 流泪、出汗
黑色:煤焦油的酒精溶液
单 色 法
大小鼠标记方法(单色法n<10)
单色法标记原则:单色 法编大于10的号码时,
我们规定顺时针旋转,
后一位必需大于前一位 数,例如:可以编,12,
13,14……19,但不能
编10,11,20,21,22, 30,31,32,33,等, 以此类推。100以内最 大能编89号。
实习内容
试验动物的选择和性别鉴定。
试验动物的称重、编号以及随机分组方法。 急性毒性试验常用染毒途径和方法。
急性毒性反应的观察和LD50计算。
实验材料
(一) 实验动物:健康成年小鼠或大鼠若干只。
(二) 器材 注射器(O.25,1,2,5ml)、吸管(0.1,0.2,0.5,1,2,
一般是采用少量动物(2~3只为一组),拉大组距,逐渐
缩小,找出受试物0%和100%死亡剂量。
正式试验
经预试验求出受试化学物的致死剂量范围(即死亡率10%90%的剂量范围),再以下式求出正式试验的剂量组距(i) 值。
logLD90 - logLD10 i n -1
i—表示相邻的两个剂量组,剂量对数之差或相邻两组剂 量比值的对数值;
实验二 经口急性毒性试验 Acute Oral Toxicity Test
Dept. of Toxicology School of Public Health Xinjiang Medical University
目的要求
掌握实验动物的常用染毒途径和方法。 掌握半数致死浓度的测定方法和结果评定。
(2)、等容量稀释法
寇氏法
Karber法或平均致死量法,是依据剂量对数与死亡率呈S型
曲线所包括的面积推导出死亡率为50%的剂量;
此法简单,准确率高,但实验设计要求每个染毒组实验动
物数相同,各计量组距呈等比级数,死亡率呈常态分布,最 低剂量组死亡率<20%,最高剂量组>80%。
预实验
目的是为了确定正式实验的剂量范围。