紫外可见分光光度法测定苯甲酸
实验目的：
1、掌握用PH计测定溶液PH的操作。

2、掌握755型紫外分光光度计的使用方法。

3、通过实验，加深对溶液PH和溶液含量测定原理和方法的理解。

实验原理：
1、直接电位法测定溶液PH长选用玻璃电极作为指示电极，饱和甘汞年级作为参比电极，浸如待测溶液中组成原电池，原电池的电动势与溶液的PH呈线性，由于K中包括难于计算的不对称电位和液接电位，实际工作中采用仪器直读法，即首先用已知PH的缓冲液校准酸度计，然后直接测量待测溶液的PH。

2、在碱性条件下，苯甲酸形成苯甲酸盐，对紫外光有选择性吸收，其吸收光谱的最大吸收波长在225nm。

可采用紫外分光光度计测定物质在紫外光区的吸收光谱并进行定量分析。

实验器材：
试药：邻苯二甲酸氢钾缓冲液、混合磷酸盐缓冲液、0.01mol/L、0.1mol/L氢氧化钠、苯甲酸
仪器：量瓶、烧杯、752型紫外分光光度计、石英比色杯、PHS-25型酸度计
实验内容与方法：
一、用酸度计测定溶液的PH值
1、安装电极
先把电极夹子夹在电极杆上。

夹上甘汞电极，把引线叉连接在电极接线柱上。

再将玻璃电极夹在夹子上，使玻璃球泡略高于甘汞电极，把电极插头插入电极孔内，旋紧螺丝。

2、连接电源
检查电源电压与仪器电压相符合后，将PH-mV开关置“0”，接通电源。

对PHS-25型酸度计，若用交流电源，接通电源后指示灯亮，若用直流电源，指示灯不亮。

3、定位
（1）将标准缓冲液倾入测试杯中，侵入电极，将PH-MV开关旋至与缓冲液相应量程范围。

（2）查表5-1，调节定位调节器，使指针指向本缓冲液该温度下的PH。

并摇动测试杯，使指针稳定为止，重复调节定位调节器，定位后，定位调节器不可再旋动。

4、测量
（1）移开缓冲液测试杯。

用纯水淋洗电极，并用滤纸轻轻吸干。

（2）将被测溶液倾入测试杯中（温度应和缓冲液一样，否则应按其温度重性调节温度补偿
器）浸入电极对，读数即可。

二、紫外可见分光光度法测定苯甲酸的含量
1、苯甲酸标准储备液的制备
精确称取苯甲酸100mg，用0.1mol/L氢氧化钠溶液100ml溶解后，再用蒸馏水稀释1000ml。

此溶液1ml含0.1mg苯甲酸。

2、苯甲酸吸收曲线的测量
吸取苯甲酸贮备液4.00ml，放入50ml容量瓶中，用0.1mol/L氢氧化钠溶液定容，摇匀。

此溶液1ml含8μg苯甲酸。

测量条件光源：氢灯；参比液：0.01mol/L氢氧化钠；测量波长：210、215、218、220、222、224、225、226、228、230、235、240nm。

3、标准对比法测定样品液苯甲酸的含量
取10.00ml样品液，放入50ml容量瓶中，用0.01mol/L氢氧化钠定容，摇匀。

在上述曲线中找出最大吸收波长，以此作定量分析的入射光。

以0.01mol/L氢氧化钠溶液为参比。

在完全相同的条件下测出标准苯甲酸溶液和稀释好的样品液的吸光度值。

4、按下式计算样品液中苯甲酸的浓度：
C样/C标 = A样/A标
实验注意事项：
1．正确选择紫外分光光度计的光源灯。

石英比色杯价格昂贵，操作时不要离开桌面，谨防打碎。

2．由于玻璃电极膜极易碰坏，使用时应特别小心。

用后要清洗干净再保存好。

实验报告：
实验结束后，书写实验报告。