组织基因组DNA提取试剂盒（磁珠法）
使用说明书（Cat#Yu-TD02-1）
【产品介绍】
组织基因组DNA提取试剂采用国内领先的专利技术合成的纳米磁珠颗粒和多次实验优化的缓冲液体系，能从样品中分离纯化高质量DNA。

在一定条件下，磁珠表面修饰的基团高效吸附目的DNA，而当条件改变时，磁珠释放吸附的DNA，达到快速分离纯化DNA的目的。

整个过程安全、无毒、便利，提取的DNA质量稳定、纯度高。

纯化后的DNA适用于多种后续实验。

本试剂盒可以从少量动物组织中分离纯化出高质量、高浓度的DNA。

【产品特点】
1. 效率高：DNA提取得率高，操作简便。

2. 安全、无毒害：整个操作过程无需使用苯酚、氯仿等有毒物质，提取环境更加安全。

3. 高纯度：OD260/230在1.5左右，OD260/280在2.0左右。

可直接用于各种分子生物学实验。

【试剂盒组成】
【规格】50T/盒
【自备试剂】无水乙醇，异丙醇
【贮藏与有效期】
裂解吸附液和Buffer AW1必须室温（15-25℃）避光保存；磁珠室温保存；其他所有试剂室温保存，有效期为1年。

【注意事项】
1、Buffer AW1使用前，加入18mL无水乙醇，混匀，使乙醇含量为60%。

★
2、Buffer AW2使用前，加入21mL无水乙醇，混匀，使乙醇含量为70%。

★
3、磁珠使用前必须充分混匀。

★
4、组织最好置于组织核酸（DNA/RNA）保存液（Cat#Yu-TP01）或液氮中保存。

【操作步骤】
1、样本的处理
1.1、液氮中保存的组织将组织在液氮中磨成粉末后，使液氮充分挥发。

再以50-100mg组织中加入1mL裂解吸附液，充分研磨。

以下进入步骤2。

1.2、组织保存液中保存的样本取出在组织保存液中保存的组织，加入1mL无水乙醇洗涤组织两次。

再以50-100mg组织中加入1mL裂解吸附液，充分研磨。

以下进入步骤2。

2、吸取400µL研磨后的裂解吸附液转入1.5mL的EP管中，加入5µL蛋白酶K，60℃1500rpm10分钟。

3、取出EP管，加入250µL异丙醇和10µL混匀的磁珠，闭盖，充分混匀。

室温1500rpm振荡10min。

4、取出EP管，瞬时离心，将EP管放于磁力架上，吸附磁珠4分钟。

5、在磁力架上，打开EP管盖，吸弃液体，保留磁珠。

6、加入600µL Buffer AW1，闭盖。

从磁力架上取下EP管，充分混匀使磁珠完全分散至洗液中。

注：可以在漩涡振荡仪上3000rpm振荡20秒，使EP管壁上的磁珠完全分散至洗液中。

7、将EP管放回磁力架，吸附磁珠3分钟至液体清澈（吸附磁珠2分钟后，颠倒磁力架3次，使EP管盖上残留的磁珠被充分回收）。

打开EP管盖子，吸弃液体，保留磁珠（需吸干EP管底和管盖中的残留液体）。

注：由于各个实验室磁力架磁力不尽相同，吸附时间可以延长，直至液体清澈。

8、加入600µL Buffer AW2，闭盖。

从磁力架上取下EP管，充分混匀使磁珠完全分散至洗液中。

注：可以在漩涡振荡仪上3000rpm振荡20秒，使EP管壁上的磁珠完全分散至洗液中。

9、将EP管放回磁力架，吸附磁珠2分钟至液体清澈（吸附磁珠1分钟后，颠倒磁力架3次，使EP管盖上残留的磁珠被充分回收）。

打开EP管盖子，吸弃液体，保留磁珠（需吸干EP管底和管盖中的残留液体）。

注：由于各个实验室磁力架磁力不尽相同，吸附时间可以延长，直至液体清澈。

10、加入600µL无水乙醇，闭盖。

从磁力架上取下EP管，充分混匀使磁珠完全分散至无水乙醇中。

注：可以在漩涡振荡仪上3000rpm振荡20秒，使EP管壁上的磁珠完全分散至无水乙醇中。

11、将EP管放回磁力架，吸附磁珠1分钟至液体清澈（吸附磁珠30秒后，颠倒磁力架3次，使EP管盖上残留的磁珠被充分回收）。

打开EP管盖子，吸弃液体，保留磁珠（需吸干EP管底和管盖中的残留液体）。

注：由于各个实验室磁力架磁力不尽相同，吸附时间可以延长，直至液体清澈。

12、开盖，37℃金属浴晾干3分钟。

13、在EP管中加入50-100µL洗脱液，充分吹打混匀磁珠。

闭盖，50℃金属浴1500rpm振荡孵育5min。

注：①洗脱液的量可以根据需要调整。

②50℃振荡洗脱后不能离心收集磁珠，离心会导致EP管中的残留物进入洗脱液，从而抑制后续实验。

14、将EP管放入磁力架上，吸附磁珠2分钟至液体清澈。

打开盖子，吸取洗脱液转移至新的EP管（RNase-free）中。

洗脱液即可直接用于下游实验，也可-80℃保存备用。

注：①提取过程中必须全程使用RNase-free EP管和Tip头。

②为了避免磁珠分离后的洗脱液中微量磁珠的残留，洗脱液转移至新的EP管后，可以10,000×g 离心1分钟，以彻底去除磁珠。