1.加2g土壤到15mL Bead Tube中
2.加入0.25mLSR1和0.8mLSR2之后，加入2.5mL Bead Solution到Bead Tube
3.加入3.5mL酚：氯仿：异戊醇25:24:1到试管中，加盖后涡旋混合直到分层消失。

4.最大转速涡旋震荡15min
5.室温，2500g离心10min
6.取出后，小心地转移上层水相到干净的15mL收集管中，弃掉下层酚
7.加1.5mL SR3到水相中，然后涡旋混匀，4℃孵育10min
8.室温，2500g离心10min。

转移上清到一个新的15mL收集管中
9.加入5mL SR4溶液到装有上清的收集管中，混匀，室温孵育30min
10.室温，2500g离心30min
11.倒掉上清，将收集管倒置在纸上5min
12.震荡SR5混合。

加1mL SR5到15mL收集管中，并反复吹打使完全重悬。

13.为每一个RNA样品准备一个RNA Capture Column
A．拿去15mL收集管的盖子，将RNA Capture Column放入15mL收集管中。

B．加2mL SR5到RNA Capture Column中，让其完全流尽。

14.从第12步加入RNA样品至RNA Capture Column中，然后让其在重力作用下流尽。

收集
液体。

15.用1mLSR5清洗柱子。

重力流尽，收集洗脱液。

16.转移柱子到新的收集管，加入SR6震荡混合，然后加入1mL SR6到RNA Capture Column
洗脱RNA到15mL收集管中，重力流尽。

17.转移洗脱的RNA到2.2mL收集管中，并且加入1mL SR4.颠倒至少一次混合，然后-20℃
孵育最少10min
18.室温13000g离心15min浓缩RNA
19.倒掉上清并倒转收集管在纸上10min晾干
20.用100μL SR7溶液重悬RNA沉淀，去除其中的基因组。