参比型SPR生物芯片的检测
1 引言
SPR 生物传感器是上个世纪末期发展起来的新型光学生物传感器,它可以无标记地检测待测物与芯片上固定分子间的结合反应。
SPR 生物传感器可以实时监测芯片表面发生的各种结合、解析反应,已经成为一种成熟的检测生物
分子间相互作用的方法。
灵敏度高是SPR 生物传感器的特点之一,它甚至能测量到由于温度变化而引起的信号变化。
同样温度、溶液浓度等非反应因素的变化也会引起SPR 信号的变化。
这样的过度灵敏性,或者可称为过敏性,有时候甚至会影响我们对
于反应信号的判断。
为了消除这种过敏性就需要进行信号补偿,而信号补偿试
验的进行又很难保证完全重复发生反应时的各种条件,参比型SPR 生物芯片的出现解决了这一问题。
通过参比信号与检测信号的比较,可以很容易地知道SPR 反应曲线的变化是由于生物反应的进行还是由于外界因素的变化而引起的。
2 仪器与芯片
实验中采用的是崔大付课题小组自行研制的单通道双参数参比型SPR 生物传感器(
参比型SPR 生物芯片(
3 实验方法
首先在芯片背面滴一滴香柏油,然后将芯片小心地贴在传感器的棱镜表面,注意在芯片与棱镜间不要有气泡,然后将流通池对准光斑安装好并拧紧。
芯片安装好后,首先向流通池内通入HBS 缓冲液。
角度扫描后在吸收
峰的左侧直线部分选择一点进行定点监测。
定点监测开始后先进行HBS 清洗,。