基础化学综合实验论文食品、蔬菜中铁含量的测定院系名称：专业班级：姓名：学号：同组人：同组人学号：组号：指导老师：蔬菜、食品中铁含量的测定作者：单位名称：材料学院摘要采用邻二氮菲分光光度法直接对青椒、菠菜、油菜、芹菜等几种蔬菜中铁的含量进行测定。

而本实验采用菠菜和蛋黄两种样品，测量菠菜和蛋黄中铁的含量，实验表明菠菜的根部含铁量高，蛋黄含铁量高，铁元素含量较为丰富。

这为指导人们合理食用蔬菜进行补铁及开发蔬菜产品提供理论依据。

关键词分光光度法；邻二氮杂菲；盐酸羟胺；铁；蔬菜；蛋黄。

前言芹菜中含铁量丰富，而蛋制品含铁来量也较为丰富。

在日常生活中，要注意多食用含铁量丰富的食品。

牛奶中含铁量比较少，被称为贫铁食品。

本实验通过测定芹菜和蛋黄中铁的含量，从而指导人们合理的利用使用含铁丰富的食物。

实验部分一、主要仪器与试剂1.主要仪器与设备：722型分光光度计，马福炉，电热炉，容量瓶，移液管，普通天平，电子天平，比色管，电子天平，烧杯，移液管，比色皿，漏斗及漏斗架等。

2.试剂：（1）400ug/ml铁标准溶液：准确称取0.864g 分析纯NH4Fe(SO4)2•12H2O，置于烧杯中用30ml 2mol/L盐酸溶解后移入500ml容量瓶中，定容，摇匀。

（2）20ug/ml 铁标准溶液：由400ug/ml的铁标准溶液溶液准确稀释20倍而成。

（3） 0.2%邻二氮杂菲溶液：准确称取邻二氮杂菲1g，置于试剂瓶中，加500 ml水溶解。

（4）10%盐酸羟胺溶液：称取盐酸羟胺固体50g，置于试剂瓶中，加500 ml水溶解。

（5）1mol/L NaAC 溶液：称取NaAC固体68g，置于试剂瓶中，加500 ml水溶解。

(6) 0.4 mol/L NaOH溶液：称取8.0g NaOH固体于试剂瓶中，加500 ml水溶解。

(7) 2mol/l HCl溶液：用移液管准确移取浓盐酸10ml于50ml容量瓶中，定容，摇匀。

(8) 1：1 HCl溶液：用移液管准确移取浓盐酸25ml于50ml容量瓶中，定容，摇匀。

（9）8mol/LNaOH溶液：称取160.0gNaOH固体溶于烧杯中，冷却后移入500mL容量瓶，定容，摇匀。

3.实验用品：新鲜芹菜，鸡蛋黄。

二、实验步骤及结果1、样品处理：1）.取新鲜芹菜，捣碎称取100g，置于蒸发皿中，在通风处中小火加热，直至不再冒烟为止，然后将其放入马福炉内灰化（约一天一夜），去处冷却后，加入1：1的盐酸，并用小火加热使其全部溶解，然后过滤，移入50ml的容量瓶中，定容，摇匀，备用。

2）.取鸡蛋黄称重16.5g置于蒸发皿中，捣碎，在通风处中小火加热，直至不再冒烟为止，然后将其放入马福炉内灰化（约一天一夜），去处冷却后，加入1：1的盐酸，并用小火加热使其全部溶解，然后过滤，移入50ml的容量瓶中，定容，摇匀，备用。

2、条件试验：1）.最佳波长的测定准确移取20μg/ml的铁标准溶液5ml于50ml容量瓶中，加入10%盐酸羟胺溶液2.0ml,摇匀,冷却，加入1mol/ml的NaAC溶液5ml和0.2%的邻二氮杂菲溶液3ml，以水稀释至刻度，在722型分光光度计上，用1cm比色皿，以水为参比液，用不同的波长从450nm开始到570nm 为止，每隔10nm或20nm测定一次吸光度，然后以波长为横坐标，吸光度为纵坐标绘制出吸收曲线，从吸收曲线上确定该测定的适宜波长。

波长A1 A2 A平均450 0.322 0.327 0.3245470 0.377 0.38 0.3785490 0.399 0.397 0.398500 0.415 0.407 0.411510 0.423 0.42 0.4215520 0.423 0.403 0.413530 0.352 0.354 0.353550 0.181 0.183 0.182570 0.085 0.084 0.0845由图知最佳波长为510nm.2）.最佳时间的选择：配制上述溶液，在510nm波长处测吸光度，分别测定其在加入显色剂的第1min、5min、10min、15min、20min、30min、60min、90min的吸光度。

然后以时间（t）为横坐标，吸光度为纵坐标绘制A-t曲线。

此曲线表示了该配合物的稳定性。

时间1 5 10 15 20 30 60 90/min吸光度0.421 0.425 0.424 0.425 0.427 0.429 0.425 0.424由图知，反应30min吸光度最大。

3）. 显色剂最佳用量的测定取50容量瓶7个，编号。

准确移取5 ml 20μg/ml的铁标准溶液5ml于容量瓶中，加入2.0ml 10%的盐酸羟胺溶液，经2min后，再加入5ml1mol/l的NaAC溶液，然后分别加入0.2%的邻二氮杂菲溶液0.3ml、0.5ml、1.0ml、1.5ml、2.0ml、2.5ml和3.0ml，以水稀释至刻度，摇匀。

在分光光度计上。

在510nm波长下用1cm比色皿，水为参比液，测定上述各溶液的吸光度。

然后以加入的邻二氮杂菲试剂的体积为横坐标，吸光度为纵坐标绘制曲线，从中找出显色剂最适宜加入的量。

邻二氮杂0.3 0.5 1 1.5 2 2.5 3菲/mlA10.255 0.377 0.372 0.384 0.377 0.381 0.38A20.224 0.307 0.378 0.381 0.38 0.382 0.379A0.2395 0.342 0.375 0.3825 0.3785 0.3815 0.3795由图知，显色剂的最佳用量为1.5ml4）.最佳还原剂的选定取50容量瓶7个，编号。

准确移取5 ml 20μg/ml的铁标准溶液5ml于容量瓶中，分别加入10%的盐酸羟胺溶液0.2 ml、0.5 ml、0.8 ml、1.0 ml、1.2 ml、1.5 ml、2.0 ml，2 min 后，再加入5ml1mol/l的NaAC溶液，然后分别加入0.2%的邻二氮杂菲1.5 ml。

以水稀释至刻度，摇匀。

在分光光度计上， 510nm波长下用1cm比色皿，水为参比液，测定上述各溶液的吸光度。

然后以加入得盐酸羟胺的体积为横坐标，吸光度为纵坐标绘制曲线，从中找出还盐酸羟0.3 0.6 1 1.5 2 3 4胺/mlA10.359 0.363 0.379 0.382 0.381 0.367 0.359A20.364 0.355 0.386 0.38 0.379 0.363 0.352A 0.3615 0.359 0.3825 0.381 0.38 0.365 0.3555由图知，还原剂最佳用量为1.0ml。

5）.PH值对吸光度的影响用移液管准确移取2.5ml 400ug/ml 铁标准溶液于100 ml 容量瓶中，再加入5ml 2mol/L HCl 和1.0 ml 10%盐酸羟胺溶液，摇匀，2min 后加入2.0 ml 0.2%邻二氮杂菲溶液，定容，摇匀，备用。

取8只容量瓶50ml编号，用吸量管分别取上述溶液10 ml 于其中，用吸量管取0.4mol/L NaOH 溶液0.0、2.0、3.0、4.0、6.0、8.0、10.0ml，定容，摇匀，用1cm比色皿，以水为参比溶液，测吸光度，并绘制吸光度—NaOH用量曲线，找出最佳NaOH用量，测出PH值为最佳。

NaOH的0 2 3 4 6 8 10用量/mlA1 0.191 0.352 0.361 0.36 0.36 0.36 0.359A2 0.184 0.36 0.369 0.367 0.364 0.363 0.361A 0.1875 0.356 0.365 0.3635 0.362 0.3615 0.36由图知最佳NaOH用量为3ml，测得其最佳PH值为5.5。

6）.缓冲剂最佳用量的测定：取50容量瓶7个，编号。

准确移取5 ml 20μg/ml的铁标准溶液5ml于容量瓶中，加入1.0ml 10%的盐酸羟胺溶液，经2 min后，分别加入5ml 1mol/l的NaAC溶液2ml、3ml、4ml、5ml、6ml、7ml、9ml，然后分别加入0.2%的邻二氮杂菲1.5ml，以水稀释至刻度，摇匀。

在分光光度计上， 510nm波长下用1cm比色皿，水为参比液，测定上述各溶液的吸光度。

然后以加入的NaAC的体积为横坐标，吸光度为纵坐标绘制曲线，从中找出缓冲液的适宜用量。

2 3 4 5 6 7 9NaAc的用量/mlA10.368 0.383 0.396 0.39 0.395 0.385 0.398A20.382 0.39 0.393 0.394 0.389 0.387 0.394⎺A 0.375 0.3865 0.3945 0.392 0.392 0.386 0.396由图知缓冲液最佳用量为5ml。

3、标准曲线的绘制（1）标准系列（1#—6#）溶液按下表要求加入试剂，用1cm比色皿，以试剂空白为参比溶液，在510nm处，测1#—6#溶液的吸光度，以溶液中铁含量为横坐标，相应吸光度为纵坐标，利用1#—6#系列标准溶液可绘制标准曲线。

1 2 3 4 5 6容量瓶编号0 2 4 6 8 1020ug/ml的铁标准溶液/ml1 1 1 1 1 110%的盐酸羟胺/ml5 5 5 5 5 5摇匀，5min后，加1mol/L的NaA C溶液/ml1.5 1.5 1.5 1.5 1.5 1.50.2%的邻二氮杂菲溶液/ml（2）吸光度的测定用1cm比色皿，在510nm波长处，测定1-8号溶液的吸光度，以50ml溶液中的铁含量为横坐标，相应的吸光度为纵坐标，利用1-6号系列标准溶液，绘制标准曲线，由7、8号溶液的吸光度在标准曲线上查出10.0ml菠菜和8.0ml蛋黄溶液中铁的含量。

平行测两次吸光度，容量瓶编1 2 3 4 5 6号铁含量/ug 0 40 80 120 160 200A10.002 0.15 0.314 0.465 0.621 0.769A20.008 0 .154 0.311 0.463 0.622 0.765⎺A 0.005 0.15 0.3125 0.464 0.6215 0.7674、样品中铁含量的测定用吸量管取蛋黄溶液5ml置于50ml容量瓶中，加入1.0m 10%盐酸羟胺溶液，摇匀，2min 后加入1.0mol/L NaAc溶液5.0ml再分别加入1.5ml 0.2%邻二氮杂菲溶液，定容至离刻度线1cm处测量PH，若PH较小,则加入8mol/ml的NaOH调节PH至5-6位为止，记录滴数为10滴，并测量其吸光度。

用吸量管取芹菜溶液5ml置于50ml容量瓶中，加入1.0m 10%盐酸羟胺溶液，摇匀，2min 后加入1.0mol/L NaAc溶液5.0ml再分别加入1.5ml 0.2%邻二氮杂菲溶液，定容至离刻度线1cm处测量PH，若PH较小，则加入8mol/ml的NaOH调节PH至5-6位为止，记录滴数为7滴，并测量其吸光度。