ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ ｏｆ ｈｕ－ Ａｇｅｎｔｓ，２０１ｌ；２５
４
ＤＰＳＣ的重编程与再分化 ２００６年，Ｔａｋａｈａｓｈｉ等“”将４个转录因子（０ｃ１４，Ｓｏｘ２，ｃＭｙｃ
ｍ且『ｌ
ｄｅｎｔａｌ ｐｕｌｐ ｓｔｅｍ
ｃｅｌｌｓ［Ｊ］．Ｊ
Ｒｅｇｕｌ
Ｈｏｍｅｏｓｔ
（１）：５７－６９． ６
Ｋｉｒｄｌｙ
干细胞是一类具有自我复制能力和一定分化潜能的细胞， 在一定条件下，它可以分化成多种具有不同功能的细胞。根据 干细胞所处的发育阶段及其功能学特性，可将其进一步分为胚 胎十细胞和成体干细胞。因此，干细胞在组织工程、再生医学 中有着系要的应用价值。目前，牙齿缺损等牙源性疾病在中老 年人中发病率较高。牙髓干细胞（ｄｅｎｔａｌ
Ｂｉｎｌ．２０１ ｌ；
ｓｔｅｒｅ
ｃｅｌｌｓ［Ｊ】．Ｈｉｓｔａｃｈｅｒｅ Ｃｅｌｌ
Ｔ．Ｏｈｕｒａ ｋ Ｇｅｎｅ
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ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ
ｐｒｏｆｉｌｅ ｏｆ ｄｅｎｔａｌ ｐｕｌｐ
ｃｅｌｌｓ
ｄｕｒｉｎｇ
ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ （３）：３５４－６３． ９
ａｎ ａｄｉｐｅｅ”ｅ
ｌｉｎｅａｇｅ［Ｊ）．Ｊ
６
能不仅仅局限在骨性分化方面。研究人员在成脂分化、神经分 化等方面均取得ｒ一定的研究成果．在再生医学研究领域有着 重要的指导意义。
乞ｌ
ＤＰＳＣ的骨性分化ＤＰＳＣ的骨性分化是关于ＤＰＳＣ定向
分化研究较早的一项内容，近些年来，又有了进一步的发展。 Ｍｏｒｉ等¨３采用成骨分化培养基进行对ＤＰＳＣ的骨性诱导分化，
２．２
ｃｅｌｌ，ＤＰＳＣ）
是牙髓组织中的一类成体干细胞，具有一定的分化潜能和增殖 能力，在牙齿再生、牙髓修复方面有着重要的应用价值，特别是 随着相关组织工程技术的发展，ＤＰＳＣ具备了成为一种新型种 子细胞的潜能…。
ＤＰＳＣ的神经分化ＤＩＳＣ来源于胚胎时期的神经脊，在神
经分化方面具备一定的潜能。Ｋｉ硎ｙ等№３采用低温损伤的方法 制备３日龄Ｗｉｓｔａｒ大鼠脑缺损模型，于颅内注入ＤＰＳＣ进行修
１
ＤＰＳＣ的定义和基本生物学性质 成牙本质细胞是一种终末细胞，不具备进一步分化的能
复，研究发现：ＤＰＳＣ趋向分布于室下区、胼胝体下区等神经系统 祖细胞区，并表达微管蛋白（Ｎ—ｔｕｂｕｌｉｎ）、胶质原纤维酸性蛋白 （ＧＦＡＰ）等神经细胞标志，对损伤部位有一定的修复作用，并且 具有神经系统相关细胞的电压依从性。因此．该结果进一步显 示，ＤＰＳＣ在脑损伤体内修复方面，可以作为一种有效的修复细 胞。Ｋａｒａ６ｚ等”ｏ研究表明：ＤＰＳＣ不仅可以分化为神经于细胞， 而且在分化能力方面，高于传统的骨髓间充质干细胞。
ＤＰＳＣ的成脂分化除成骨分化、神经分化方面，成脂分
化也是ＤＰＳＣ的一项重要潜能。Ｎｏｚａｋｉ等¨３于成脂培养基中加 人胰岛素、地塞米松等诱导成脂，经过一段时间的作用，可见细 胞中有脂滴的形成，并且在分化过程中多能性标记转录因子 （０ｃｔ３／４、ｓｏｘ２）均呈现下调趋势，Ｎａｎｏｇ基因无显著变化；通过 基因微阵列分析，研究人员进一步发现：过氧化物酶体增生物 激活受体信号通路的多种组分，均发生变化。所以，对这些基 因的调控，在细胞成脂分化过程中有着重要意义。
ｃｅｌｌｓ［Ｊ］，ＺｈｅｎｓｈＵＵ Ｋｅｎ Ｑｉａｎｇ
ｘｕｓ １２ Ｕｕ
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Ｚｈｉ。２０ｌＩ；４６（７）：４０６—１１． ＬＬ，Ｗａｎｇ
ＤＳ，ｄ ａ１．Ｒｅｃｏｎｓｔｒｕｃｔｉｏｎ ｏｆ ａｌｖｅｏｌａｒ ｐｒｏｔｅｉｎ ２
ＨＣ，Ｅ
ｂｏｎｅ ｄｅｆｅｃｔｓ
ｓｔｅｍ
ｕｓｉｎｇ
ｂｏｎｅ ｍｏｒｐｈｎｇｅｎａｔｉｃ ｓｅｅｄｅｄ Ｅｎｇ
ａｎｄ
ｉｎ
ｖｉｖｏ［Ｊ］．Ｐｒｅｅ Ｎａｉｌ Ａｅａｄ Ｓｃｉ ＵＳＡ，
２０００；９７（２５）：１３６２５－３０． ４
Ｍｏｉｌ
Ｇ，Ｂｍｎｅｌｔｉ Ｇ，Ｏｒａｎｇｅｒ Ａ，ｄ ａＬ
ａｎｄ ｇｅｌｌｅ
Ｄｅｎｔａｌ Ｎ
ｐｕｌｐ
ｓｔｅｍ
ｃｅｌｌｓ：ｏｓｔｅｏｇｅｎｉｅ
ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ ４７－５２．
Ｄ
ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ［Ｊ］．Ａｎｎ
Ｙ Ａｃａｄ￥ｃｉ，２０１ｌ；１２３７：
Ａｌｉｍｏｎｔｅ Ｉ，Ｎａｒｇｉ Ｅ，Ｍａｓｔｒａｎｇｅｌｏ ｅｎｈａｎｃｅｓ
ｉｎ ｖｉｔｒｏ
Ｆ，ｅｔ
ａＬ Ｖａｓｃｕｌａｒ ｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌ Ｓ口ｔｏｗｔｈ
ｏｓｔｅｏｇｅｎｉｅ
ｆａｃｔｏｒ
Ｄｒｏ醯ｍｄ∞ａｎｄ
Ｂｉｏｌ
Ｐｈａｒｍａｃｏｌ Ｓｍ．ｉ，２０１ｌ；１１５
ｈｏ Ｋ，Ｙａｍａｄａ Ｙ．Ｎａｋａｍｕｒａ Ｓ．ｄ
ｂｏｎｅ ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ ｕｓｉｎｇ
ａ／．Ｏｓｔｅｎｇｅｎｉｃ ｐｏｔｅｎｔｉａｌ
ｓｔｅｍ
ｏｆ ｅｆｆｅｃｔｉｖｅ ｓｔｅｍ ｃｅｌｌｓ．
ｄｅｎｔａｌ ｐｕｌｐ
ｃｅｉｌｓ．ｂｏｎｅⅡｌａⅡｏｗ ｄｅｎｔａｌ
ｃｅｌｌｆａｔｅｉｎ
ｒｅｇｅｎｅｒａｔｉｖｅ
ｅｎｄｏｄｏｎｔｉｅｓ［Ｊ］．Ｊ ｇｎｄｏｄ，２０１ｌ；３７（１１）：
１５３６－４１＿
１１
Ｙａｎｇ ＸＣ．Ｚｈａｎｇ ＳＹ，Ｆａｎ
ＭＷ，ｄ以Ｅｆｆｅｅｔｓ
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ａｌｉｚａｔｉｏｎ ｐｏｔｅｎｔｉａｌ ｏｆ ｄｅｎｔａｌ ｐｕｌｐ ｓｔｅｍ
ｐｕｌｐ ｓｔｅｍ
结果发现，某些典犁成骨细胞基因，如：碱性磷酸酶、Ｉ型胶原、 骨桥蛋自等均大晕表达；应用微阵列及ＲＴ—ＰＣＲ技术进一步研 究发现．在成骨分化过程中，胰岛素样生长因子结合蛋白５基 因（ＩＧＦＢＰ－５）、ＪｕｎＢ原癌基因（ＪＵＮＢ）和核受体相关基因 （ＮＵＲＲｌ）均发生表达上调现象，这一机制在成骨分化过程中 有着重要的意义。Ｄ ７Ａｌｉｍｏｎｔｅ等”’在人源ＤＰＳＣ正常成骨诱导 过程中，加入血管内皮生长因子，结果显示：这种方法可以刺激 ＤＰＳＣ的增殖分裂的速度加快，而且促进了成骨分化的进程。
和ＫＩｆ４）导人已处于终末分化状态的小鼠成纤维细胞中，从而 获得了一种类似于胚胎干细胞的多能性细胞，称为“诱导性多
能干细胞”（ｉｎｄｕｃｅｄ ｐｌｕｒｉｐｏｔｅｎｔ ｓｔｅｍ ｃｅｌｓ，ｉＰＳ ｃｅＨｓ）。这种方法
Ｍ，Ｋ血ｌａｒ Ｋ，Ｈｏｒｖｄｔｈｙ ＤＢ，ｅｌ
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２．３
力，因此，一般认为成牙本质细胞在遭受损伤后，牙髓内的某些 具有分化功能的前体细胞可进一步分化为成牙本质细胞，并分 泌相关细胞基质，修复受损组织，这种前体细胞即为ＤＰｓｃ。 ＤＰＳＣ具有较强的增殖能力和较高的分化潜能，正是这两种生 物学性质，决定了ＤＰＳＣ在牙源组织修复和骨性修复方面具有 重要的作用“’。 Ｇｒｏｎｔｈｏｓ等¨’在２０００年首次正式提出了ＤＰＳＣ的概念，把 牙髓内可以快速增殖并且具有一定克隆形成能力的牙髓细胞命 名为ＤＰＳＣ，研究人员应用酶消化法对成人第三磨牙的牙髓细胞 进行培养，并与骨髓间充质干细胞进行比较，结果显示：这两种 细胞具有极为相似的免疫学特性，并且，该研究进一步证实ＤＰ－ ｓｃ经体外诱导后，可形成高密度的钙化小结，将ＤＰＳＣ与羟基磷 灰石＿／磷酸三钙（Ｉ－ＩＡ／ＴＣＰ）支架复合后移植到小鼠背侧皮下，经 过一段时间后，能观察到类似于牙本质一牙髓复合体样的结构。
Ｗ后，发现经ＮａＣＩＯ处理的牙本质与复合物结合较好，接触面
ｌ
吉林大学药学院生物工程实验中心
形成大量细胞陷窝；经乙二胺四乙酸（ＥＤＴＡ）处理的牙本质可 以诱导进一步ＤＰＳＣ向成牙质细胞分化，进一步表达牙本质涎 蛋白，提高牙本质的修复速度。Ｙａｎ￥等¨“以大鼠ＤＰＳＣ为研
通讯作者：周余来（１９６５一）．男。教授，主要从事组织工程研究。 第一作者：郑伟（１９５９－）．女，主治医师。主要从事临床Ｌ１腔医学研究。
３ ２
ＤＰＳＣ的分化诱导因素 在细胞分化的过程中，分化方向、分化程度、分化速度均会
ＤＰＳＣ的多向分化潜能 作为一种成体干细胞，ＤＰＳＣ具备多向分化的潜能，这种潜
受到一系列物化因素、生物因素的影响，协调各方面因素对控 制细胞定向分化有着重要意义。Ｉｔｏ等坤’将犬类的ＤＰＳＣ与不 同的支架材料相结合，并用这种结合物治疗骨缺损，结果发现 不同的支架材料，修复效果会有较大差异，其中ＤＰｓｃ／富血小 板血浆（ＰＲＰ）复合物具备较好的修复效果。Ｇａｌｌｅｒ等“叫将ＤＰ－ ｓＣ接种于水凝胶支架上，并将复合物移植到经过次氯酸钠 （Ｎａｃｌ０）、乙二胺四乙酸（ＥＤＴＡ）处理过的牙本质内部，培养
堑侄笠茎整王垫胞垄基生医堂史的班塞选屋墓！期
１９９７・
牙髓干细胞在再生医学中的研究进展
郑伟
刘朋飞１ 冯业童１
董超１
周余来１
（通化市口腔医院，吉林通化１３４０００）
【关键词）
牙髓千细胞；再牛医学；分化
［中圄分类号】Ｒ俺１．４；Ｑ６１３．１［文献标识码］Ａ［文章编号】ｌ∞５蚴２１２０１２）帕・１９９７．０２；ｄｏｉ：１０．四田４ｉｓｍｌ００５－９２０２．２０ｎ０９．１１２
ｒｅｌｌ
ｏｆ ｎｅｕｒｏｎａｌｌｙ ｉｎ
ｐｒｅｄｉｆ－
ｆｅｎｍｔｉａｔｅｄ ｈｕｍａｎ ｄｅｎｔａｌ ｐｕｌｐ
ｃｅｌｌｓ
ｂｒａｉｎ
ｖｉｖｏ［Ｊ］．Ｎｏｎ－
ｒｅｅｈｅｍ Ｉｎｔ，２０１１；５９（３）：３７１－８１．
７
可以非常稳定的制造多能干细胞，引起了极大的关注。继此之 后，人类体细胞被成功诱导为ｉＰＳ的报道”４１和老年人皮肤成纤 维细胞被诱导为ｉＰＳ细胞亚群的报道””相继出现，这种细胞被 认为是一种极具前景的干细胞。体细胞通过一定诱导方式，转 变为ｉＰＳ细胞亚群的过程称为“重编程”；ｉＰＳ经过定向诱导，再 次分化为其他种类细胞的过程，称为“再分化”。 ＤＰＳＣ作为一种可以快速自我更新的成体干细胞，同样具 备重编程和再分化的潜能。Ｙａｎ等”刚采用逆转录病毒介导法， 将４个因子（Ｌｉｎ２８／Ｎａｎｏｇ／Ｏｃｔ４／Ｓｏｘ２或ｃ－Ｍｙｃ／Ｋｌｆ４／Ｏｃｔ４／ 鼬）【２）导人ＤＰＳＣ中，将ＤＰＳＣ重编程为ｉＰＳ细胞亚群。ＤＰＳＣ来 源的ｉＰＳ细胞亚群表达阶段特异性胚胎抗原－４（ＳＳＥＡ－４）、肿瘤 坏死因子受体相关蛋白（＂ｉＲＡ）一１－６０、ＴＲＡ一１—８０、ＴＲＡ－２－４９、 Ｎａｎｏｇ、Ｏｃｔ４、Ｓｏｘ２等表面标记，具备多向分化的潜能。可分化成 ３个胚层的组织，而且可被定向诱导分化为神经千细胞和神经 元。Ｔａｍａｏｋｉ等¨”对多株ＤＰＳＣ进行重编程诱导，结果显示不 同株的ＤＰＳＣ在莺编程效率方面会有很大差别，不同株ＤＰＳＣ 来源的ｉＰＳ细胞亚群的再分化能力也有较大不同。因此，建立 一种高效安全的重编程模式和再分化方法，仍是干细胞领域的 研究热点。