分子生物学总结第一章绪论一. DNA重组技术和基因工程技术.DNA重组技术又称基因工程,目的是将不同的DNA片段按照人们的设计定向连接起来,在特定的受体细胞中与载体同时复制并得到表达.产生影响受体细胞的新的遗传性状.基因工程技术还包括其他可能使生物细胞基因组结构得到改造的体系.第二章染色体与DNA一. DNA的一、二、三级结构特征.DNA一级结构特征1. 双链反向平行配对而成2. 脱氧核糖和磷酸交替连接，构成DNA骨架，碱基排在内侧3. 内侧碱基通过氢键互补形成碱基对DNA二级结构特征绕DNA双螺旋表面上出现的螺旋沟，宽的沟称为大沟，窄沟称为小沟。
大沟，小沟都、是由于碱基对堆积和糖-磷酸骨架扭转造成的。
DNA三级结构特征拓扑异构酶拓扑异构酶负超螺旋松弛DNA 正超螺旋溴已啶溴已啶二. 原核生物DNA具有哪些不同于真核生物DNA的特征.1. 结构简练2. 存在转录单元3. 有重叠基因三. DNA复制通常采取哪些方式.1. 线性DNA双链的复制.2. 环状DNA双链的复制分为θ型、滚环型和D-环型等.四. 原核生物DNA的复制特点.1. DNA双螺旋的解旋2. DNA复制的引发3. 冈崎片段与半不连续复制4. 复制的终止5. DNA聚合酶五. 细胞通过哪几种修复系统对DNA损伤进行修复?1. 错配修复2. 碱基切除修复3. 核苷酸切除修复4. DNA直接修复六. 什么是转座子?可分为哪些种类?转座子是存在与染色体DNA上可自主复制和位移的基本单位原核生物转座子的类型: 1. 插入序列 2. 复合转座子 3. TnA家族第三章生物信息的传递(上)一. 什么是编码链?什么是模板链?与mRNA序列相同的那条DNA链称为编码链；将另一条根据碱基互补原则指导mRNA合成的DNA链称为模板链。
?三. 简述σ因子的作用.σ因子的作用是负责模板链的选择和转录的起始,它是酶的别构效应物,使酶专一性识别模板上的启动子.四. 什么是Pribnow box?它的保守序列是什么?RNA聚合酶全酶与模板DNA结合后,用DNase I水解DNA,然后用酚抽提,沉淀纯化DNA后得到一个被RNA聚合酶保护的DNA片段,约有41-44个核苷酸对.在被保护区内有一个由5个核苷酸组成的共同序列,是RNA聚合酶的紧密结合点,称为Pribnow box.Pribnow区的保守序列是: TTGACA五. 简述原核生物和真核生物mRNA的区别.(一)原核生物mRNA的特征1、半衰期短2、多以多顺反子的形式存在3、5’ 端无“帽子”结构, 3’ 端没有或只有较短的polyA 结构。
(二) 真核生物mRNA的特征1、5’ 端存在“帽子”结构2、多数mRNA 3’ 端具有polyA尾巴3、以单顺反子的形式存在六. 大肠杆菌的终止子有哪两大类?它们的结构特点.不依赖于ρ因子的结构特点:a 终止位点上游一般存在一个富含GC碱基的二重对称区b 在终止位点前面有一段由4-8个A组成的序列依赖于ρ因子的结构特点:有些终止位点的DNA序列缺乏共性,而且不能形成强的发卡结构,因而不能诱导转录的自发终止.七. 真核生物的原始转录产物必须经过哪些加工才能成为成熟mRNA, 以用作蛋白质合成的模板?(一)5’端加帽子(二)3’端加尾(三)RNA的剪接(四)RNA的编辑八. 什么是RNA编辑?其生物学意义是什么.RNA的编辑是某些RNA,特别是mRNA前体的一种加工方式,如插入,删除或取代一些核苷酸残基,导致DNA所编码的遗传信息的改变,因为经过编辑的mRNA序列发生了不同于模板DNA的变化.RNA编辑的生物学意义1. 校正作用. 有些基因在突变过程中丢失的遗传信息可能通过RNA的编辑得以恢复.2. 调控翻译. 通过编辑可以构建或去除起始密码子和终止密码子,是基因表达调控的一种方式.3. 扩充遗传信息. 能使基因产物获得新的结构和功能,有利于生物的进化.第四章生物信息的传递(下)一. 遗传密码有哪些特征?1、简并性2、普遍性和特殊性3、连续性4、摆动性二. 有几种终止密码子?它们的序列和别名是什么?有三种,分别是UAA、 UGA、 UAGUAA又叫做赭石密码, UAG又叫做琥珀密码, UGA又叫做蛋白石密码.三. tRNA在组成和结构上有哪些特点?1. tRNA的二级结构:三叶草形构成:①受体臂 ②TψC臂 ③反密码子臂 ④D臂2. tRNA的三级结构呈L形折叠,靠氢键来维持.四. 什么是SD序列?它的功能是什么?所有原核生物mRNA上都有一个5’-AGGAGGU-3’序列,这个富嘌呤区被命名为SD序列.五. 什么是信号肽?它的序列组成上有哪些特点?有什么功能?信号肽是指新合成多肽链中用于指导蛋白质跨膜转移的N-末端氨基酸序列.特点（1）一般带有10-15个疏水氨基酸；（2）在靠近该序列N-端常常有1个或数个带正电荷的氨基酸；（3）在其C-末端靠近蛋白酶切割位点处常常带有数个极性氨基酸，离切割位点最近的那个氨基酸往往带有很短的侧链。
六. 蛋白质有哪些翻译后的加工修饰?磷酸化、糖基化、甲基化、乙基化、羟基化和羧基化第五章分子生物学研究法(上)一. 如何理解PCR扩增的原理和过程?原理：类似于天然的DNA复制过程。
将待扩增的DNA片段和两侧互补的两段寡核苷酸引物，经过变性，退火和延伸若干个循环后，DNA扩增倍数可达2n 倍PCR的基本反应步骤：1. 变性：95℃，模板DNA变性为单链；2. 退火：50℃左右，使引物与模板DNA退火结合；3. 延伸：72℃，DNA聚合酶以dNTP为底物催化DNA的合成反应。
上述三个步骤为一个循环，经25-30次循环后，可将模板DNA扩增达百万倍。
二. SNP作为第三代遗传标记的优点是什么?SNP是基因组中最简单,最常见,的多态性形式,具有很高的遗传稳定性第六章分子生物学研究方法(下)一. 简述RNAi技术在分子生物学领域的应用前景和存在的问题.现在RNAi技术已经被广泛应用于真核生物中去沉默一个给定的基因,这是一个非常有效的研究基因功能的手段和工具.第七章基因的表达与调控(上)一. 简述乳糖操控子的调控模型.1. Z. Y, A 基因的产物由同一条多顺反子的mRNA分子所编码.2. 该m RNA分子的启动区位于阻遏基因与操纵区之间,不能单独起始半乳糖苷酶和透过酶基因的高效表达.3. 操纵区是DNA上的一小段序列,是阻遏物的结合位点.4. 当阻遏物与操纵区相结合时,lac m RNA的转录起始受到抑制.5. 诱导物通过与阻遏物结合,改变它的三维构象,使之不能与操纵区相结合,从而激发lac m RNA的合成.二. 什么是弱化作用.细菌通过弱化作用弥补阻遏作用的不足，因为阻遏作用只能使转录不起始，对于已经起始的转录，只能通过弱化作用使之中途停下来。
三. 简述反义RNA的调控机制.细菌响应环境压力的改变,会产生一些非编码的小的RNA分子,能与m RNA中的特定序列配对并改变所配对的m RNA分子的构象,导致翻译过程被开启或者关闭,也可能导致目标m RAN分子的快速降解.第八章基因的表达与调控(下)一. 何为外显子,内含子及其结构特点的可变调控?外显子是指真核细胞基因DNA中的编码序列，这些序列被转录成RNA 并进而翻译为蛋白质。
内含子是指真核细胞基因DNA中的间插序列，这些序列被转录成RNA，但随即被剪除而不翻译。
可变调控组成型剪接：一个基因的转录产物通过剪接只能产生一种成熟的mRNA。
选择性剪接：同一基因的转录产物由于不同的剪接方式形成不同mRNA。
二. DNA甲基化对基因表达的调控机制.DNA甲基化导致某些区域DNA构象变化，从而影响了蛋白质与DNA的相互作用，抑制了转录因子与启动区DNA的结合效率。
三. 增强子的作用机制.1. 影响模板附近的DNA双螺旋结构,导致DNA双螺旋弯折或在反式因子的参与下,以蛋白质之间的相互作用为媒介形成增强子与启动子之间的”成环”连接,活化基因转录.2. 将模板固定在细胞核内特定位置,有利于DNA拓扑异构酶改变DNA双螺旋结构的张力,促进RNA聚合酶II在DNA链上的结合和滑动3. 增强子区可以作为反式作用因子或RNA聚合酶II进入染色质结构的”入口”四. 反式作用因子的结构特点及其对基因表达的调控?1. 螺旋-转折-螺旋这一类蛋白质分子中有至少两个α螺旋,中间有短链连氨基酸残基形成”转折”,近羧基端的α螺旋中氨基酸残基的替换会影响该蛋白质在DNA双螺旋大沟中的结合.2. 锌指结构其特有的半胱氨酸和组氨酸残基之间氨基酸残基数基本恒定,有锌参与时才具备转录调控活性.3. 碱性-亮氨酸拉链它们能够与CCAAT盒和病毒的增强子结合.4. 碱性-螺旋-环-螺旋其DNA结合特性与亮氨酸拉链类蛋白相似.五. 举例说明蛋白质磷酸化如何影响基因表达.酪氨酸受体蛋白激酶与表皮生长因子相结合后,刺激了该受体蛋白的激酶活性,引发一系列生理反应.原癌蛋白ErbB虽然没有正常酪氨酸受体蛋白激酶的胞外结构域,其胞内结构域却具有蛋白激酶活性,刺激细胞持久分裂,诱发癌变.六. 组蛋白乙酰化和去乙酰化影响基因转录的机制.组蛋白N端”尾巴”上赖氨酸残基的乙酰化中和了组蛋白尾巴的正电荷,降低了它与DNA的亲和性,导致核小体构象发生有利于转录调节蛋白于染色质相结合的变化,从而提高了基因转录的活性.核心组蛋白H2A,H2B,H3,H4通过组蛋白”尾部”选择性乙酰基化影响核小体的浓缩水平和可接近性.七. 激素影响基因表的基本模式.许多激素的调控作用是通过起始基因转录而实现的.靶细胞具有专一的细胞质受体,可与激素形成复合物,导致三维结构甚至化学性质的变化.经修饰的受体与激素复合物通过核膜进入细胞核内,并于染色质的特定区域结合,导致基因转录的起始或关闭.第九章疾病与人类健康一. 癌症已经成为威胁人类健康的主要杀手,根据你所了解的知识,简述癌症为何具有如此大的危害?对于癌症的防止为何如此困难?(看书)①癌基因产物本身模拟了生长因子，因而与相应的受体作用，以自分泌的方式刺激细胞生长；②癌基因产物模拟了已结合配体的生长因子受体，从而在无外源生长因子时提供了促进细胞分裂的信号；③癌基因产物作用于细胞内生长控制途径，解除此途径对外源刺激信号的需求。
第十一章基因组与比较基因组学一. 试述大肠杆菌基因组和真核生物基因组的主要区别.(一).大肠杆菌基因组1基因组很小，大多只有一条染色体2结构简炼3存在转录单元4多顺反子5有重叠基因(二)真核生物基因组1真核基因组结构庞大2单顺反子3基因不连续性4非编码区较多5含有大量重复序列。