本科生毕业论文（设计）题 姓 学 专 班 学目: 名: 院: 业: 级: 号:谷胱甘肽过氧化物酶（GPX）对灵芝生长发育中 的活性氧物质（ROS）的改变及理化性的质影响 于南 生命科学学院 生物科学 生物科学 101 班 13210101 师亮 职称: 讲师指导教师:2013 年 5 月 20 日 南京农业大学教务处制1目录摘要 .......................................................................................................... 错误！未定义书签。
关键词 ...................................................................................................... 错误！未定义书签。
Abstract ................................................................................................... 错误！未定义书签。
Key words ................................................................................................ 错误！未定义书签。
引言 .......................................................................................................... 错误！未定义书签。
1 材料与方法 ........................................................................................ 错误！未定义书签。
1．1 材料 ....................................................................................... 错误！未定义书签。
1．1．1 菌种 .......................................................................... 错误！未定义书签。
1．1．2 CYM 培养基 ............................................................ 错误！未定义书签。
1．1．3 PDA 固体培养基 ..................................................... 错误！未定义书签。
1．1．4 试剂 .......................................................................... 错误！未定义书签。
1．1．5 主要仪器设备 .......................................................... 错误！未定义书签。
1．2 实验方法 ............................................................................... 错误！未定义书签。
1．2．1 ROS 的测定 ............................................................. 错误！未定义书签。
1．2．2 NBT 测定 ................................................................. 错误！未定义书签。
1．2．3 DAB 染色 ................................................................. 错误！未定义书签。
1．2．4 菌株对氧化物耐受性的检测 .................................. 错误！未定义书签。
1．2．5 胞内 Ca2+的荧光检测 .............................................. 错误！未定义书签。
1．2．6 三萜的测定 .............................................................. 错误！未定义书签。
1．2．7 菌丝分叉检测 .......................................................... 错误！未定义书签。
2 结果与分析 ........................................................................................ 错误！未定义书签。
2．1 GPX 沉默转化子胞内 ROS 含量上升 ......................... 错误！未定义书签。
2．2 NBT 染色显示 GPX 沉默转化子胞内超氧根离子含量上升错误！未定义书签。
2．3 DAB 染色显示 GPX 沉默转化子胞内 H2O2 含量下降...... 错误！未定义书签。
2．4 GPX 沉默转化子的菌株对氧化性物质的耐受力下降 ...... 错误！未定义书签。
2．5 GPX 沉默转化子胞内 Ca2+的含量下降 .............................. 错误！未定义书签。
2．6 GPX 沉默转化子菌株的三萜含量下降： .......................... 错误！未定义书签。
2．7 GPX 沉默转化子菌丝的分叉数减少 .................................. 错误！未定义书签。
3 讨论 .................................................................................................... 错误！未定义书签。
致谢 .......................................................................................................... 错误！未定义书签。
参考文献 .................................................................................................. 错误！未定义书签。
2谷胱甘肽过氧化物酶（GPX）对灵芝生长发育中的活性氧物质 （ROS）的改变及理化性的质影响生物科学 101 指导教师 于南 师亮摘要：谷胱甘肽过氧化物酶（GPX）是机体内广泛存在的一种重要的过氧化物分解酶。
ROS 是需氧细胞在代谢过程中产生一系列活性氧簇,包括：O2-、H2O2 及 HO2、OH- 等。
生物体为了减少过氧化物质对机体的伤害，会通过 GPX 基因来调控体内过氧化物质的 含量。
本次试验就是通过 GPXi（沉默）后测定真菌 ROS 信号通路中相关理化性质的改 变例如：ROS 的含量；ROS 调控的钙离子浓度等变化；菌株耐氧能力的改变。
关键词：GPXi；ROS；Ca2+；三萜；分叉The influence of Glutathione peroxidase (GPX) on reactive oxygen species (ROS) and the physical and chemical properties change during the growth and development of ganoderma lucidumStudent Majoring in Biology Tutor Shi Liang Yu NanAbstract：Glutathione peroxidase (GPX) an important peroxide decomposition enzyme that is widely exist in organic cells. ROS is a series reactive oxygen species in the process of metabolism, which produced by Aerobic cells, including: O2 -, H2O2 , HO2 and OH-. In order to reduce the body damage caused by peroxide material the organism adjusts the content of ROS by controlling Glutathione peroxidase (GPX). Our experiments test the change of the fungal ROS signal pathway and the change of physical and chemical properties by making the GPX gene silent, such as the content of ROS, Calcium ions concentration and the tolerant ability to oxidizing substances. Key words: GPXi; ROS; Ca2+ concentration; Ganoderic acids; bifurcation引言灵芝是非常珍贵的药用真菌，性微温，气特殊，味微苦涩。
始载于汉代《神农 本草经》 ，被认为能“益心气，安精魂，补肝益气，坚筋骨”，列为上品。
《本草纲目》认 [i] 为灵芝有“滋补强壮，延年益寿”“利关节，治耳聋”等功效 。
2000 年出版的《中华人民 共和国药典》收载灵芝（赤芝、紫芝）子实体为法定中药材，药典中规定的中药材是赤 芝或紫芝的干燥子实体[2]。
同年，灵芝作为 10 种中草药之一也被收载于美国出版的《美 国草药药典和治疗概要》中，灵芝在国内和国际医药学界的地位可见一斑。