初级检验技师考试
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2.细胞因子测定方法及应用
测定方法:(1)生物学检测法:又称生物活性检测,是根据细胞因子特定的生物活性而设计
的检测法。
生物活性检测法又可分为:
①细胞增殖法;
②靶细胞杀伤法;
③细胞因子诱导的产物分析法;
④细胞病变抑制法。
(2)免疫学检测法:细胞因子均为蛋白或多肽,具有较强的抗原性。
可利用抗原
抗体特异性反应的特性,用免疫学技术定量检测细胞因子。
常见的方法包括ELISA、RIA及免疫印迹法。
(3)分子生物学方法:当前公认的细胞因子的基因均已克隆化,较容易地得到某一细胞因子cDNA探针或根据已知的核苷酸序列人工合成寡聚核苷酸探针。
常使用斑点杂交、Northernblot、逆转录PCR,细胞或组织原位杂交等。
具有灵敏、快速等优点,甚至从l~10个细胞中就可检出其中的特异mRNA。
临床应用:细胞因子测定可作为特定疾病诊断的辅助指标,用来评估机体的免疫状态、判断治疗及预后,用于临床治疗应用时的监测等。
(十六)细胞黏附分子的测定技术
同学们应重点掌握:1.细胞表面黏附分子的测定:2.可溶性黏附因子的测定:3.了解临床应用白细胞和血管内皮细胞、巨噬细胞和上皮细胞等以及血液中均存在细胞粘附分子。
按其结构特点,分有钙离子依赖性家族、整合素家族、免疫球蛋白超家族和选择素家族四大类。
1.细胞表面粘附分子的检测
(1)放射免疫测定法:一般见抗细胞粘附分子抗体包被载体,加受检样品后,继加相应单
克隆抗体和同位素标记的二抗作非竞争性固相放射免疫测定法。
(2)荧光免疫测定法:用不同激发波长的荧光素着染色受检细胞,在FACS仪上可同时检测
有两种不同的细胞粘附分子。
(3)酶免疫测定法:主要为双抗体夹心ELISA,本法应用最广,但仅能检出一群细胞的
表面粘附分子数量,而不能反映单个细胞粘附分子数量的变化。
(4)其它方法:如酶免疫组织化学测定、流式细胞仪分析、时间分辨荧光免疫测定
等。
例题:下列哪一种测定方法不属于细胞表面黏附分子的检测方法:。