❖ 由于细菌的等电点较低，在2－5之间，原生质体 带负电，易与阳离子染料相结合，因此细菌染色 常用碱性染料。
❖ 染色步骤： 先用碱性染料结晶紫染色，再加碘液媒染，然
后酒精脱色，最后用复染液（沙黄或番红）复染。 能够固定结晶紫与碘的复合物而不被酒精脱色，仍
呈现紫色，称为革兰氏阳性菌 能被酒精脱色，经复染着色，菌体呈现红色，称为
丝状杆菌可引起活性污泥 膨胀
脱硫杆 菌属
梭杆 菌属
拟杆 菌属
气单胞 菌属
纤毛杆 菌属
气杆 菌属
脱硫杆 菌属
梭状芽孢 杆菌属
微杆菌属
发酵单胞杆菌属
脱硫杆菌属
脱硫杆菌属与脱硫丝菌属
芽孢杆菌
芽孢杆菌
假单胞菌
动物宿主细胞感染杆菌濒临死亡 杆菌 电子显微镜下的结核菌
（绿色的就是结核杆菌） 电镜照片
螺旋菌
它是这类细菌的总称，细胞
球菌
呈球形或椭圆形，直径一般0.
5-1um。如果球菌分裂后子
细胞不立刻分开，由于分裂
面的不同，分裂后各子细胞
排列也不同，呈现不同空间
排列方式。
❖ l ．单球菌2 ．双球菌
❖ 3．链球菌4 ．四联球菌
❖ 5．八叠球菌6 ．葡萄球菌
球菌
葡萄球菌
球菌及葡萄球菌
甲烷八叠球菌
杆菌
根据细胞壁成分和结构的不同，将细菌分 为革兰氏阳性(简称G+)细菌和革兰氏阴性(简称 G-)
革兰氏阳性细菌和革兰氏阴性细菌的细胞壁剖面
1.革兰氏阳性 2.革兰氏阴性
G+细菌的细胞壁是厚约20～80 nm的肽聚 糖，并含少量蛋白质和脂类。
G-细菌的细胞壁较薄，约10 nm，分外壁 层和肽聚糖层，外壁层主要含有脂蛋白和脂多 糖等脂类物质，而肽聚糖层很薄，肽聚糖仅占 细胞壁化学组成的5%～10%。
➢细菌的染色
形态特征是鉴别菌种的主要依据之一。
• 形态的观察：因细菌的细胞极其微小、又十分透明， 所以进行形态观察时，一般要进行染色。
▪ 染色的分类：单染色和复染色 简单染色法（单染色法为一种染料使细菌染色 ，仅供观察形态用） 复染色是两种染料染色，目的鉴别细菌（如革兰 氏染色法）或细菌染成不同颜色便于观察。
紫
紫
无色
红
革兰氏染色有着重要的理论和实践意义
❖通过染色可把几乎所有的细菌分成G＋、G －两个 大类，是分类鉴定菌种时的重要指标。
❖两类细菌在细胞结构、成分、形态、生理、生化、 生态降解有机物、药物敏感性上等 都存在有差异。
➢革兰氏染色的机理
细胞壁的结构和组成与革兰氏染色反应有关。在染色 过程中，细胞内形成了深紫色的结晶紫-碘的复合物。由 于G+细菌细胞壁较厚，特别是肽聚糖含量较高，网格结 构紧密，脂类含量又低，当被酒精脱色时，引起了细胞 壁肽聚糖层网状结构孔径缩小以至关闭，从而阻止了不 溶性结晶紫-碘的复合物的浸出，故菌体仍呈深紫色；相 反，G-细菌的细胞壁肽聚糖层较薄，含量较少，而脂类 含量又高，当酒精脱色时，脂类物质溶解，细胞壁通透 性增大，结晶紫-碘复合物也随之被抽提出来，故菌体呈 复染液的红色。
丹麦医生 C. Gram于1884年创立。
革兰氏染色法是细胞形态观察
最常用的复染色方法
❖ 细菌染色用燃料主要采用人工染料，一般分为碱 性、中性和酸性。酸性染料离子带负电，如伊红、 刚果红等，碱性染料离子带正电荷，如美兰、结 晶紫、碱性品红、番红等；中性染料是前二者结 合物，又称复合染料，如伊红化美兰等。
2 原核微生物
原核微生物主要指细菌、放线菌和蓝细菌 ，这些微生物也与污染控制工程关系密切。
2.1 细菌
细菌是大家比较
熟悉的名字，因为 有很多疾病是它们 引起的，如鼠疫杆 菌、霍乱弧菌、破 伤风杆菌、肺炎双 球菌等致病菌对人 类有害；那些腐败 菌常引起食物和工 农业产品腐烂变质 ，并散发出特殊的 臭味或酸败味。
各种细菌在一定的环境条件下，有相对恒定 的形态和结构。
2.1.1 细菌形态和大小
细菌基本形态有三种：
球状、杆状和螺旋状，分别称为球菌、杆 菌和 螺旋菌。
细菌在适宜的环境中，形态和排列呈现一定的规 则，有助于细菌的鉴定。
细菌的外形
在自然界中杆菌最常见， 球菌次之，螺旋状最少
❖球 菌 就 是 球 形 的 细 菌 ，
螺旋菌（spirillum)长：5~15 μm，宽：0.5~5 μm
细菌的重量
(1014~1010个细菌才达到1mg)
2.1.2 细菌细胞的结构
细胞壁、细胞膜、
一般结构 （间体）、细胞质、 （基本结构）
细菌
核质体、内含物
细胞
荚膜（粘液层）、 特殊结构
芽孢、鞭毛、菌毛
原生质体
(protoplast)
细胞呈弯曲的杆状。根据弯曲的程度不同 又可分为弧菌和螺旋菌。螺旋菌的大小也是 以长度和宽度来表示，但是螺旋菌的长度是 菌体空间长度而不是它的真正长度，螺旋菌 宽度常在0.5～5.0 μm，长度差异很大，约在 5～15 μm。
弧菌
螺旋菌
细菌的大小
球菌（coccus）0.5~1μm 形态 杆菌（bacillus）长1~5 μm，宽0.5~2 μm
细胞呈杆状或圆柱形，其大小以 宽度和长度表示。杆菌的宽度一 般为0.5～2.0 μm，长度为宽度的 一倍或几倍。杆菌按着大小可细 分为小型杆菌(0.2～0.4 μm×0. 7～1.5 μm)、中型杆菌(0.5～1.0 μ m×2～3 μm)和大型杆菌(1～1.25 μm×3～8 μm)；按着细胞排列方 式有单杆菌、双杆菌和链杆菌。
原生质体包括细胞膜、细胞质和核质。
1）细胞壁
细胞壁(cell wall)是包在原生质体外面， 厚约10～80 nm的略有弹性和韧性的网状结构， 其质量约占总细胞干重的10%～25%左右。
➢细胞壁化学组成和结构
细胞壁构成的主要成分是肽聚糖、脂类和 蛋白质。肽聚糖是一个大分子复合体，呈多层 网状结构。
革兰氏阴性菌。
细菌的染色反应和细胞壁结构和组成有关。
革兰氏染色（Gram Stain）的步骤：
结晶紫初染 （染紫色1min）
95％乙醇脱色 （不脱色）
碘染媒染
碘-碘化钾溶液 30S；碘分子与结 晶紫形成染色较 牢固的复合物
脱色 处理
复染 沙黄复染
观察
紫
红
阳性 阴性
紫
紫
紫
紫
A
初染
媒染
-
鼠疫杆菌
大多数细菌是和人类和平共处的，对人类 不仅无害而且有益，能给人类带来很大好处。 例如：人们利用谷氨酸棒杆菌制造食用味精， 用乳酸菌生产酸奶，用苏云金杆菌生产杀虫剂 ，利用产甲烷菌生产沼气，以及借助细菌来冶 炼金属、净化污水、制作使庄稼增产的细菌肥 料等。
细菌（bacterium）是一种具有细胞壁的单 细胞原核生物，裂殖繁殖，个体微小，多数在 1μm左右，通常用1000倍以上的光学显微镜或 电子显微镜才能观察到。