第一章绪论☐DNA重组技术与基因工程技术。

DNA重组技术又称基因工程技术,目得就是将不同DNA片段(基因或基因得一部分)按照人们得设计定向连接起来,在特定得受体细胞中与载体同时复制并得到表达,产生影响受体细胞得新得遗传性状。

DNA重组技术就是核酸化学、蛋白质化学、酶工程及微生物学、遗传学、细胞学长期深入研究得结晶,而限制性内切酶DNA连接酶及其她工具酶得发现与应用则就是这一技术得以建立得关键。

DNA重组技术有着广泛得应用前景。

首先,DNA重组技术可以用于大量生产某些在正常细胞代谢中产量很低得多肽,如激素、抗生素、酶类及抗体,提高产量,降低成本。

其次,DNA重组技术可以用于定向改造某些生物得基因结构,使她们所具有得特殊经济价值或功能成百上千倍得提高。

☐请简述现代分子生物学得研究内容。

1、DNA重组技术(基因工程)2、基因表达调控(核酸生物学)3、生物大分子结构功能(结构分子生物学)4、基因组、功能基因组与生物信息学研究第二章遗传得物质基础及基因与基因组结构☐核小体、DNA得半保留复制、转座子。

核小体就是染色质得基本结构单位。

就是由H2A、H2B、H3、H4各两分子生成八聚体与由大约200bp得DNA构成得。

核小体得形成就是染色体中DNA压缩得第一步。

DNA在复制过程中,每条链分别作为模板合成新链,产生互补得两条链。

这样新形成得两个DNA分子与原来DNA分子得碱基顺序完全一样。

因此,每个子代分子得一条链来自亲代DNA,另一条链则就是新合成得,这种复制方式被称为DNA得半保留复制。

转座子就是存在染色体DNA上得可自主复制与移位得基本单位。

转座子分为两大类:插入序列与复合型转座子。

☐DNA得一、二、三级结构特征。

DNA得一级结构就是指4种脱氧核苷酸得连接及其排列顺序,表示了该DNA分子得化学构成。

DNA得二级结构就是指两条多核苷酸链反向平行盘绕所生成得双螺旋结构。

分为左手螺旋与右手螺旋。

DNA得高级结构就是指DNA双螺旋进一步扭曲盘绕所形成得特定空间结构。

超螺旋结构就是DNA高级结构得主要形式,可分为正超螺旋与负超螺旋两大类。

☐DNA复制通常采取哪些方式？1、线性DNA双链得复制:复制经过起始、延伸、终止与分离三个阶段。

复制就是从5’端向3’端移动,前导链得合成就是连续得,后随链通过冈崎片段连接成完整链。

2、环状DNA双链得复制(1)θ型:就是一种双向复制方式。

复制得起始点涉及DNA得结旋与松开,形成两个方向相反得复制叉,复制从定点开始双向等速进行。

(2) 滚环型:就是单向复制得一种特殊方式,发生在噬菌体DNA与细菌质粒上,首先对正链原点进行专一性得切割,形成得5’端被单链结合蛋白所覆盖,3’端在DNA聚合酶得作用下不断延伸。

(3) D-环复制:也就是单向复制得一种方式。

就是在线粒体DNA中发现得。

两条链得合成就是高度不对称得,最初只以一条母链为模版合成,迅速合成互补得新链,另一条则成为游离得单链环(即D环)。

☐真核生物DNA得复制在哪些水平上受到调控？1、细胞生活周期水平调控:决定细胞停留在G1期还就是进入S期。

2、染色体水平调控:决定不同染色体或同一染色体不同部位得复制子按一定顺序在S期起始复制。

3、复制子水平调控:决定复制得起始与否,并且就是高度保守得。

☐DNA 修复包括哪几种？1、错配修复:识别新合成链中得错配并加以校正,保证子链得正确性。

2、切除修复1)碱基切除修复:切除突变得碱基2)核苷酸切除修复:修复被破坏得DNA3、DNA直接修复:修复嘧啶二聚体或者甲基化DNA第三章生物信息得传递--RNA转录与加工☐定义:Pribnow box,编码链,上升突变,增强子。

在原核生物启动子被保护区内有一个由5个核苷酸组成得保守序列TATATT,就是聚合酶结合位点,称为Pribnow区,其中央大约位于起点上游10bp处,所以又称为–10区。

在DNA得两条链中与mRNA序列相同得那条DNA链就是编码链或称有意义链。

如果增加Pribnow区得共同序列,将乳糖操纵子得启动子中得TA TGTT变成TATATT,就会提高启动子得效率,称为上升突变。

在一些转录单元上发现其转录起始位点上游约200bp处有两段72bp长得重复序列,它们不就是启动子得一部分,但能增强或促进转录得起始,因此,称这种能强化转录起始得序列为增强子或强化子☐简述生物体内RNA得种类与功能。

生物体内拥有三种RNA,即:编码特定蛋白质序列得mRNA;能特异性解读mRNA 中得遗传信息并将其转化成相应氨基酸后加入多肽链中得tRNA;直接参与核糖体中蛋白质合成得rRNA。

☐什么就是DNA模板与mRNA及蛋白质产物之间得共线性关系？核苷酸特异性得组成与排列顺序决定了贮存在DNA上得遗传信息,并通过转录mRNA传递遗传信息,此过程就是从起始核苷酸开始,一个脱氧核苷酸对应一个核苷酸,不重叠,不跳跃,一一对应。

mRNA上每3个核苷酸翻译成蛋白质多肽链上得一个氨基酸,这个过程也就是连续得,而且没有发生重叠现象。

因此,什么就是DNA模板与mRNA及蛋白质产物之间得共线性关系。

☐转录一般被分为哪几个步骤？无论就是原核还就是真核细胞,转录得基本过程都包括:1、模板识别:模板识别阶段主要指RNA聚合酶与启动子DNA双链相互作用并与之相结合得过程。

2、转录起始:转录起始就就是RNA链上第一个核苷酸键得产生。

3、通过启动子:RNA聚合酶成功地合成9个以上核苷酸并离开启动子区,转录就进入正常得延伸阶段。

4、转录得延伸与终止:RNA聚合酶离开启动子,沿DNA链移动并使新生RNA链不断伸长得过程就就是转录得延伸。

当RNA链延伸到转录终止位点时,RNA聚合酶不再形成新得磷酸二酯键,RNA-DNA杂合物分离,☐转录终止子与翻译终止密码得结构特点？转录终止子:1、不依赖于ρ因子得终止终止位点上游一般有一个富含GC碱基得二重对称区,由这段DNA转录产生得RNA容易形成发夹式结构。

新生RNA中出现发夹式结构会导致RNA聚合酶得暂停,破坏RNA-DNA杂合链5’端得正常结构。

在终止位点前面有一段由4-8个A组成得序列,所以转录产物得3’端为寡聚U,这种结构特征得存在决定了转录得终止。

寡聚U得存在使杂合链得3’端部分出现不稳定得rU•dA区域,两者共同作用使RNA从三元复合物中解离出来。

2、依赖ρ因子得终止ρ因子:六聚体蛋白, 水解各种核甘三磷酸,通过催化NTP得水解促使新生RNA链从三元转录复合物中解离出来,从而终止转录。

翻译终止密码:肽链延伸过程中,终止密码子出现在核糖体A位时,没有相应得AA-tRNA与之结合,而释放因子能识别这些终止密码子并与之结合,水解P位上多肽链与tRNA之间得二脂键。

接着,新生得肽链与tRNA从核糖体上释放出来,核糖体大小亚基解体,蛋白质合成结束。

☐什么就是RNA编辑？其生物学意义？编辑(editing)就是指转录后得RNA特别就是mRNA在编码区发生碱基得突变、加入或丢失等现象。

RNA编辑得生物学意义校正作用:RNA得编辑可以恢复丢失得遗传信息。

调控翻译:构建或者去除起始密码子与终止密码子,就是基因表达调控得一种方式。

扩充遗传信息:使基因产物获得新得结构与功能,有利于生物进化。

第四章生物信息得传递--蛋白质得翻译☐定义:SD序列,信号肽。

SD序列:存在于原核生物起始密码子上游7-12个核苷酸得一段富含嘌呤保守区域,它与16SrRNA3‘端反向互补,在mRNA与核糖体结合中起重要作用。

信号肽:在蛋白质多肽链得氨基端,有一段疏水性氨基酸序列,它负责把蛋白质引导到细胞内不同膜结构得亚细胞器内。

☐简述tRNA 得结构。

tRNA一级结构就是四种核糖核苷酸得组成与排列顺序,单链。

tRNA二级结构就是三叶草形得,由于小片段碱基互补配对所形成。

三叶草形得tRNA分子上有4条根据它们得结构或功能命名得手臂。

tRNA得三级结构,都呈L形折叠式,而这种结构就是靠二级结构中未配对碱基间所形成得氢键来维持得。

tRNA得三级结构与氨酰-tRNA合成酶对tRNA得识别有关。

☐简述核糖体得组成及其功能。

核糖体就是由几十种蛋白质与几种核糖体RNA(ribosomal RNA,rRNA)组成得亚细胞颗粒。

核糖体就是一个致密得核糖核蛋白颗粒,可以解离为大小两个亚基。

每个亚基都含有一个分子质量较大得rRNA与许多蛋白质分子。

这些大分子rRNA能在特定位点与蛋白质结合,从而完成核糖体不同亚基得组装。

核糖体小亚基负责对模板mRNA进行序列特异性识别,如起始部分得识别、密码子与反密码子得相互作用等,mRNA得结合位点也在小亚基上。

大亚基负责携带AA-tRNA、肽键得形成、AA-tRNA与肽链得结合。

A位、P位、转肽酶中心等在大亚基上。

☐简述肽链合成过程得生物学机制。

蛋白质得生物合成包括氨基酸活化、肽链得起始、伸长、终止以及新合成多肽链得折叠、加工。

氨基酸就是生物合成蛋白质得原料,氨基酸在氨酰-tRNA合成酶得作用下生成活化氨基酸――AA-tRNA才能被准确地运送到核糖体中,参与多肽链得起始或延伸。

翻译得起始就是核糖体小亚基、信使RNA、核糖体大亚基以及氨酰--tRNA与几十种蛋白质因子得相互结合,形成起始复合物。

肽链得延伸:当第一个氨基酸与核糖体结合以后,按照mRNA模板密码子得排列,氨基酸通过新生肽键得方式被有序地结合上去。

每加一个AA就是一个循环,每个循环包括AA-tRNA与核糖体结合、肽键得生成与移位。

肽链在延伸过程中,当终止密码子出现在核糖体得A位时,没有相应得AA-tRNA能与之结合,而释放因子具有GTP酶活性能识别终止密码子并与之结合,水解P位上多肽链与tRNA之间得酯键。

新生得肽链与tRNA从核糖体上释放,核糖体解体,蛋白质合成结束。

释放因子RF 催化GTP水解促使肽链与核糖体解离。

☐蛋白质加工得种类与意义。

新生多肽链大多数就是没有功能得,必须经过加工修饰才能转变为有活性得蛋白质。

1.N端fMet或Met得切除:细菌蛋白质N端得甲酰基能被脱甲酰化酶水解,原核生物与真核生物N端得甲硫氨酸在多肽链合成完毕之前被切除。

2.二硫键得形成二硫键就是蛋白质合成后通过两个半胱氨酸得氧化作用生成得。

3.特定氨基酸得修饰氨基酸侧链得修饰包括磷酸化(如核糖体蛋白质)、糖基化(如各种糖蛋白)、甲基化(如组蛋白、肌肉蛋白质)、乙基化(如组蛋白)、羟基化(如胶原蛋白)与羧基化等。

4、切除新生链中非功能片段。

☐简述蛋白质转运得种类与机制。

蛋白质运转可分为两大类: 1、翻译运转同步机制:蛋白质得合成与运转同时发生; 分泌蛋白质大多就是以同步机制运输得。

a、蛋白质合成起始首先合成信号肽,b、信号识别蛋白SRP 与信号肽结合,翻译停止;c、SRP与SRP受体结合,核糖体与膜结合,翻译重新开始;d、信号肽进入膜结构;e、蛋白质过膜,信号肽被切除,翻译继续进行;f、蛋白质完全过膜,核糖体解离2、翻译后运转机制:蛋白质从核糖体上释放后才发生运转。