核酸适配体简介
核酸适配体简介
nucleic acid oligonucleotides aptamers
适配体的类型：
★反义核苷酸链
★随机核苷酸链
反义核苷酸链
通常包含15-20个核苷酸,其碱基组成与它们的 靶序列是互补的。但是在实际应用中, 存在反 义寡核苷酸容易被核酸酶降解、对特定靶位点 的识别不够好、有一定毒性等问题,所以要对 适配体中的核苷酸进行了各种各样的化学修饰。 修饰位点一般在碱基、磷酸骨架等。★
寡核苷酸序列形 成可与配体特异 性共价结合的二 级结构，配体如 氨基酸、多肽、 甚至金属离子都 可以同随机 相互作用Selex技术简介
Selex技术简介
核酸适配体的应用
随着筛选技术研究的发展,越来越多靶分子获 得高亲和力的、高特异性的适配体,并广泛应 用于多个研究领域,特别是分子识别检测领域。 与成熟的抗体实验相比,目前适配体可以补充 抗体性能的不足, 但是不能完全取代抗体。
前景展望
核酸适配体（Aptamer）是一类新型的识别分子。 与单克隆抗体相比，其分子量较低（15-50碱基）， 没有免疫源性和毒性，可通过化学合成制备、结构 改造以及标记，化学稳定性好，能可逆的变性与复 性，可在常温下保存和运输。这些优点使适体有望 取代和超过抗体，在生命分析中起重要的作用 。
基于目前的现状和机遇，我们可以从以下四个方面 开展核酸适体的研究工作： 1.首先根据研究和实际应用的需要，筛选重要的生物 活性分子的适体，从而发展系列的针对特定分子的 分析方法。而不囿于现有适体的缺乏。 2.研究所筛选适体的结构特性，优化、改造适体的结 构，从而进一步缩小适体的分子大小、提高生物稳 定性、增加在复杂生物体系中特异性。 3.针对应用的需要，发展更巧妙、更简便的适体分子 探针；构建方便、实用的检测方法（如目视比色分 析、传感分析、原位成像分析等）。 4.模拟适体分子的结构，设计和筛选小分子量的识别 分子，构建可自由透过细胞膜的小分子探针，用于 生命活体分析。
核酸适体的应用
▲在蛋白质组学的研究中，用aptamer制备成的核酸
配基阵列更是具有抗体芯片和2-D胶不可比拟的优 势，成为备受青睐的一项工具.
核酸适体的应用
▲作为示踪剂，aptamer在疾病诊断与成像方面也有
巨大应用潜力．已有荧光标记的抗人凝血素核酸配 基用于体内诊断的报道Байду номын сангаас新药研发方面，aptamer 可以鉴定药物靶标，尤其是多道自动工作站的应用 更是加速药物靶标高通量筛选和功能鉴定的进程.
• 其筛选流程包含和达尔文进化理论一样的三个过程 分别是自发突变 ﹑自然选择和大量增殖.
SELEX技术筛选流程
自发突变 自然选择 大量增殖
通过PCR或 RT-PCR等技 术进行扩增， 生成次一级文 库，次一级文 库在与配体结 合反复多次循 环。
利用分子生物学 技术人工合成一 个含101
随机核苷酸链
是在反义核苷酸链的作用基础上发展来 的。随机核苷酸链作用的靶序列除了核 酸外还可以是蛋白质、有机小分子等。 随机核苷酸链一般比反义核苷酸链要长, 而且它们折叠形成的空间结构也往往发 挥作用。
核酸适体简介
适配体的特点
• 适配体具有与抗体相似的性质,并且有优于
抗体的特点:
(1)特异性更强，对目标靶分子具有与抗体相当甚 至更高的亲和性 (2)适配体较抗体更容易获得,可以大量快速的在体 外合成,制备方法更为简单; (3)可以针对不同种类的目标靶进行筛选,拓宽了其 应用范围; (4)稳定性优于抗体,利于储存。
核酸适体与配体结合特点
SELEX技术
• SELEX是指数富集配体系统进化的简称.它的基本原 理就是就是利用分子生物基(aptamer) ，经 反复扩增、筛选数个循环，即可使与该靶分子特异 结合的寡核苷酸序列得到富集。
核酸适配体技术研究
Contents
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核酸适配体的简单介绍 SELEX技术的简单介绍
核酸适配体的应用 核酸适配体前景展望
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核酸适配体简介
核酸适配体（Apatmer）
适配体是指利用指数富集的配体进化技术 (SELEX)从特定的寡核苷酸库中筛选出能与靶 分子特异性结合寡核苷酸(DNA或RNA)。 适配体在分析化学,在蛋白质组研究、临床 医学、药物研发及基因调控等领域已经成为重 要的研究工具。
核酸适体的应用 ▲基因调控方面：aptamer与配基结合后的变构效应 拓展了催化性核酶的研究，使得可调控的核酶成为 可能原核生物中发现的riboswitch（核糖体开关） 更是aptamer参与基因表达调控的一大里程碑，该 发现提示不需要蛋白质因子的参与，RNA与代谢产 物结合即可调控自身的转录和翻译．根据这一原理， 人工构建的riboswitch能够实现目的基因的可调控 表达．利用riboswitch特性有可能发展出新型抗生 素．
通过这些研究，希望开发出一系列拥有 自主知识产权的分离基质、诊断试剂和 工具，以成功的应用来促进适体在生命 分析应用中的发展。
