实验器材
• 鸡胚、孵化设备、检卵器、钻孔器、蛋托、 超净台、冰箱、酒精灯、碘酒、酒精棉球、 注射器、蜡烛
实验方法
鸡胚孵化 • 将鸡卵气室向上放于蛋托上，置孵化器内，温度
37.5℃，相对湿度（45%～60%）条件下孵育， 从第3天开始每隔4~6h翻蛋一次。 • 第7~8天集中用检卵器验蛋一次，受精卵可见有 鸡胚，发育良好的胚胎可见清晰的血管及活的胚 胎，血管及其主要的分枝均明显，呈鲜红色，鸡 胚可以活动。未受精和死胚胚体固定在一端不动， 看不到血管或血管消散。剔除未受精卵和死胚。
实验要求
• 出勤率 • 实验过程中安静、有序、认真、无污染 • 实验报告书写 • 值日生打扫卫生
实验一 鸡胚接种培养
鸡胚结构
• 2、接种方法
• 病毒的鸡胚培养法主要有四种接种途径，即尿囊 腔、绒毛尿囊膜、羊膜腔和卵黄囊，不同的病毒
应选择各自适宜的接种途径，并根据接种途径确 定鸡胚的孵育日龄。
• 例：
痘类病毒
绒毛尿囊膜
9～10
腮腺炎病毒 尿囊腔
9～11
嗜神经性病毒 卵黄囊
5～6
• 实验目的：掌握鸡胚的孵化和观察方法， 掌握尿囊腔接种与收获方法，了解鸡胚培 养的结果观察方式。
• 实验原理：尿囊腔接种法广泛应用于病毒 的适应和传代培养，病毒被注射到尿囊腔 后，可在内皮细胞中被复制，复制的病毒 被释放到尿囊液中，因此，在尿囊液中含 有大量的病毒。
鸡胚接种
1 选用9～11日龄发育良好的鸡胚。 2 在接种前用检卵器观察并标记出胚胎的气室及胚胎位置，
在气室下边的胚胎附近没有大血管区域标示出尿囊腔接种 部位。 3 把鸡胚气室向上放置于蛋托上，对接种的气室蛋壳表面 用酒精棉和碘酊消毒。 4 将钻孔器在酒精灯火焰下烧灼消毒后，在气室卵壳端打 孔，用1ml注射器吸取接种0.1ml病毒液，从气室下的蛋 壳侧面经气室将针头斜刺入要接种的尿囊腔部位约1.5cm， 注入接种液。 5 用熔化的蜡封闭卵壳上的孔，气室朝上置于温箱内孵育。 6 对已接种的鸡胚每天在检卵灯下检查胚卵，发现鸡胚死亡 立即放入冰箱，将24h内死亡的鸡胚剔除。 7 2～4天后，收获尿囊液。
注意事项
1 最好选用SPF鸡胚。 2 受精卵入孵后要注意翻蛋。 3 检卵时避免照蛋时间过长引起鸡胚温度下
降过大。 4 接种鸡胚时应尽可能避开血管丰富区域。 5 温箱底盘中要思考题
为什么要将接种后孵化24h内死亡的鸡胚剔除？