【实验计算】
还原型抗坏血酸含量 (mg /100g)＝ (V1 V0 ) T 100 W
式中：
V0－空白实验消耗的染料体积(m1) V1－滴定样品消耗的染料体积(ml) T－单位体积的染料相当于抗坏血酸的质量(mg/ml) W－滴定时所用样品的质量(g)
注意事项
一、还原型抗坏血酸的测定 （2,6-二氯酚靛酚滴定法）
目的： 新鲜食物中的抗坏血酸主要以还原型形式存
在，测定还原型抗坏血酸可粗略了解该食品中抗 坏血酸的浓度。
通过本实验的学习，使学生掌握还原型抗坏 血酸的测定原理及其测定方法。
实验原理
用标准碘酸钾溶液标定抗坏血酸溶液； 用已标定的抗坏血酸溶液标定2,6-二氯酚
【操作步骤】
(1) 标定抗坏血酸标准溶液：吸取抗坏血酸溶液 (20μg/m1)5.0m1于锥形瓶中，加入6%碘化钾溶 液0.5m1，1%淀粉溶液3滴，再以0.000lmol/L碘 酸钾标准溶液滴定，终点为蓝色。
抗坏血酸标准溶液浓度 (mg / ml )＝V1 0.0528 V2
V1－滴定时所消耗0.001mol/L碘酸钾溶液的体积(ml) V2－所取抗坏血酸溶液的体积(ml)
C－抗坏血酸溶液的浓度(mg/ml) V1－抗坏血酸溶液的体积(ml) V2－滴定时消耗的2,6-二氯酚靛酚的体积(ml)
2. 样品测定
(1) 取样品100g剪碎后置捣碎机中，按 1:1(w/v)加入2%草酸制成匀浆。
(2) 称取匀浆10g于小烧杯中，倒入50m1具塞 量筒中，用1%草酸溶液冲洗烧杯，稀释至刻度， 振摇。如有泡沫影响定容可加数滴戊醇。
0.0528－0.0001mol/L的碘酸钾1.0ml相当于抗坏血酸 0.0528mg
(2)标定2,6-二氯酚靛酚溶液：
取已标定的抗坏血酸溶液5.0m1，1%草酸溶液 5.0m1于锥形瓶中，摇匀，用欲标定的2,6-二氯酚 靛酚溶液滴定至呈淡红色，15s不褪色为止。
1.0ml 2,6 二氯酚靛酚相当于抗坏 血酸的mg 数＝ C V1 V2
Cl
+N
Hale Waihona Puke HO C HCH2OH
OH
还原型维生素C 2,6-二氯酚靛酚
OC
OC O
OC
HC
OH
Cl
Cl
+
NH
HO C H
CH2OH
OH
氧化脱氢维生素C 2,6-二氯二对酚胺
滴定样品
【实验仪器与试剂】
1.仪器：组织捣碎机、5.0ml微量滴定管、 100m1容量瓶、50m1具塞量筒。
2.试剂 (1) 1%草酸溶液、2%草酸溶液、白陶土。 (2) 0.01mol/L碘酸钾标准储备液： (3) 0.0001mol/L碘酸钾标准应用液： (4) 1%淀粉溶液： (5) 6%碘化钾溶液： (6) 抗坏血酸溶液： (7) 碳酸氢钠溶液： (8) 2,6-二氯酚靛酚溶液：
2. 样品测定
(3) 将振摇后上层清液约20m1倒入100m1锥形 瓶中，加白陶士一勺，振摇数次，使充分脱色， 静置。同时，取一锥形瓶，加入1%草酸20m1， 加白陶士一勺，振摇数次作为空白。
(4) 取静置后上清液过滤，吸取滤液5.0m1， 以标定的2,6-二氯酚靛酚溶液滴定，至溶液呈 淡红色，l5s内不变化，记录染料的用量。
靛酚染料，再用此染料滴定样品中的抗坏 血酸。
用标准碘酸钾溶液标定抗坏血酸溶液 3C6H6O6+KIO3→C6H4O6+KI+3H2O IO3-+5I-+6H+=3I2+3H2O
H0-C=C-OH具有强还原性，极容易被氧化，能把+5价的碘还原成-1价的碘离子
标定溶液
OC
HO C O
HO C
HC
O
Cl