抗核抗体测定——免疫印迹法
【申请单】请完成申请单所要求项目
XXX 市人民医院检验申请单
姓名
性别年龄
门诊号住院号
诊断或症状
检验标本
检验目的
送检科室医师
送检日期年月日
【方法选择】
表抗核抗体测定方法
方法 RIA 法免疫印迹法间接免疫荧光法本次检查选择√
【材料准备】
1.试验膜条：包被dsDNA、Sm、SS-A和SS-B抗原的硝酸纤维膜，为商品化试剂。

2.稀释缓冲液：直接使用
3.洗涤缓冲液：20倍浓缩，用前稀释。

4.结合物液：抗人IgG结合物，直接使用。

5.底物液：3,3‘，5,5’-四甲基联苯胺（1.2mmol/L），过氧化氢（2.4mmol/L）.
6.终止液：硫酸溶液（0.1mol/L），直接使用。

7.标本：待检血清、阴性和阳性对照血清。

8.仪器和材料：染色缸、吸管、滴管、孵育盘、培养箱等。

【操作方法】
1.样本准备：取10ul血清加入至1ml稀释缓冲液中混匀备用。

2.将试验膜条放入孵育盘，有色标面朝上，用洗涤缓冲液润湿反应膜，室温反应1分钟，
去除洗涤缓冲液。

3.加入稀释后的样本，室温孵育30分钟，清除液体，加入洗涤缓冲液孵育，同时轻微振荡，5分钟后去除液体，反复洗涤三次。

4.加入结合物液，室温孵育30分钟，按前述方法洗涤3次。

5.加入底物液，室温孵育10分钟，去除底物液。