选修三第二讲细胞工程（克隆技术）二动物细胞工程［课时作业］一、选择题1.（2010-苏州棋拟）下列关于细胞工程的叙述，不正确的是（）■A.电刺激可诱导植物原生质体融合或动物细胞融合B.去除植物细胞壁和将动物组织分散成单个细胞均需酶处理C.小鼠骨葩瘤细胞和经抗原免疫的B淋巴细胞融合可制备单克隆抗体D.动植物细胞培养都需要经过脱分化处理解析：植物细胞培养需要经过脱分化处理，而动物细胞培养不需要，电剌激可诱导植物原生质体或动物细胞融合。
用纤维素酶、果胶酶可去除殖物细胞壁，用胰蛋白酶可将动物组织分散成单个细胞。
小鼠骨髓瘤细胞和经抗原免疫的B淋巴细胞融合可制备单克隆抗体。
答案：D2.某研究小组为测定药物对体外培养细胞的毒性，准备对某种动物的肝肿瘤细胞（甲）和正常肝细胞（乙）进行动物细胞培养。
下列说法正确的是（）A.在利用两种肝组织块制备肝细胞悬液时，也可用胃蛋白酶处理B.细胞培养应在含5%CO2的恒温培养箱中进行，CO2的作用是刺澈细胞的呼吸C.甲、乙细胞在持续的原代培养过程中，乙会出现停止增殖的现象D.仅用该培养液也能用来培养乙肝病毒解析：胃蛋白酶最适pH值接近于2 ,呈酸性，而细胞培养液的pH值接近于中性，所以不能用胃蛋白酶处理。
CO2的作用是调节细胞培养液的pH值。
由于存在细胞接触抑制现象，在原代培养过程中,会岀现停止增殖的现象，需要传代培养获劇胞株和细胞系；病毒在活细胞内才能増殖，不能用培养细胞的培养液逬行培养。
答案：C3.利用细胞工程方法，以SARS病毒核衣壳蛋白为抗原制备出单克隆抗体。
下列相关叙述正确的是（）A.用纯化的核衣壳蛋白反复注射到小鼠体内，产生的血清抗体为单克隆抗体B.体外培养单个效应B（浆）细胞可以获得大量针对SARS病毒的单克隆抗体C・将等量效应B（浆）细胞和骨髓瘤细胞混合，经PEG诱导融合后的细胞均为杂交瘤细D ・利用该单克隆抗体与SARS 病毒核衣売蛋白特异性结合的方法可诊断出病毒感染者 解析：经过特定抗原刺激后产生的效应B （浆）细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合后，产生杂交 瘤细胞，杂交瘤细胞所产生的特异性抗体叫做单克隆抗体。
在细胞融合过程中，可产生 三种类型的朶交细胞,要进行筛选；利用抗原一I 亢体反应可用来诊断岀病毒感染者,是 —种常用的诊断方法。
答案：D4. 单克隆抗体（单抗）实质上是单个效应B 细胞通过克隆形成的细胞群产生的化学性质单一、特异性强的免疫球蛋白。
下列有关叙述中，错误的是 （）A. 单抗作为生物导弹能定向到达癌细胞所在部位B. 单抗制备的过程要用到动物细胞培养和细胞融合技术C. 在单抗制备的过程中必须经过至少两次细胞筛选D. 只有用物理或化学方法的诱导，才能促使B 淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合形成杂交瘤细胞解析：诱导B 淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞的融合有三类方法：生物方法.物理方法和 化学方法。
答案:D5. （2010 ^宁质检）用a 表示骨礎瘤细胞，b 表示效应B 细胞，则细胞融合过程中两次筛选 的目的分别为解析：第一次筛选是选出朶交瘤细胞即ab ,第二次筛选是选岀产生特异性抗体的ab 细 胞。
答案:C6. 以下四种细胞工程技术中培育出的新个体，只有一个亲本遗传性状的方法是（）A.植物组织培养 B.细胞融合 C. 动物胚胎移植 D •细胞核移植解析：植物组织培养的过程是无性生殖的过程，形成的新个体中只有一个亲本的遗传物 bb 、 b ~a 、aa 、ab-^ab 培养aa^ ab> bb 、 bb 、 D ・iu bb. b-^abx bbx b->ab 培养b-ab~产生特定抗体的ab 培养bf aa —能无限增殖的aa 培养答案：A7.下列关于细胞工程的叙述中，正确的是(双选) ()A. 植物细胞工程中，融合叶肉细胞时，应先去掉细胞膜，制备原生质体B. 植物体细胞杂交培育出的新品种一定不是单倍体C. 植物细胞工程中，叶肉细胞经再分化过程可形成愈伤组织D. 单克隆抗体制备过程中，采用经免疫的B 淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合从而获得杂交 瘤细胞解析：制备原生质体应先去掉细胞壁；叶肉细胞经脱分化过程才能形成愈伤组织；制备 单克隆抗体时，采用经过免疫的B 淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合来获得杂交瘤细胞；植 物体细胞杂交)咅育岀的新品种中一定含有两个物种的遗传物质所以一定不是单倍体。
答案：BD8. 基因型为Aa 与基因型为Bb 的动物体细胞混合，用灭活的仙台病毒处理后，可获得下列哪种基因型的细胞(双选) ()A.aaBb B.AaBb C.Aabb D.BBbb解析：基因型为Aa 与基因型为Bb 的动物体细胞混合，用灭活仙台病毒处理后，会有 三种细胞融合的情况岀现，Aa 和Aa 融合形成的细胞基因型是AAaa , Bb 和Bb 融合 形成的细胞基因型是BBbb , Aa 和Bb 融合形成的细胞基因型是AaBb 。
答案：BD二、非选择题9. 下图是单克隆抗体制备流程阶段示意图。
(1) _____________ 技术是单克隆抗体技术的基础。
(2) 根据培养基的用途分类，图中HAT 培养基属于 ________________ 培养基。
(3) 单克隆抗体与常规的血清抗体相比，最大的优越性是 ________________________ 。
⑷动物细胞融合除了采用植物细胞原生质体融合常用的诱导剂外，还可以采用 _______________________________________________ 。
(5) ___________________________________________ 选出的杂交瘤细胞既具备骨柑ta 痢细胞•••(>!' 能在 HAT 培 杂交痫细瞅 、分开Ji杂交痛 am 生长 弼选出能产 生高待斤性 抗体的细胞歸瘤细胞_________________________________________________ 的特点，又具备淋巴细胞的特点。
(6)淋巴细胞是由动物体________ 中的_______ 细胞分化、发育而来的。
(7)杂交瘤细胞从培养基中吸收葡萄糖、氨基酸的主要方式是_____________________ o解析：⑴单克隆抗体是通过细胞融合、动物细胞培养制备的，其中动物细胞培养是动物细胞工程的基础。
(2)由图示信息可知:图中所用的培养基是选择培养基，目的是筛选出杂交瘤细胞，并将杂交瘤细胞分开,筛选之后逬行扩大培养，从而获得大量抗体。
(3)单克隆抗体与常规抗体相比，特异性强，灵敏度高，可被广泛应用到疾病诊断、治疗和预防等方面。
(4)动物细胞融合除了使用离心、振动、电刺激等物理方法和聚乙二醇等化学方法诱导外，通常还采用灭活的病毒诱导融合。
(5)抗体是由浆细胞分泌的，每一种浆细胞只能分泌一种特异性抗体，要想得到大量的单一抗体，必须将同一种浆细胞大量克隆，但在体外培养的条件下，一个浆细胞不能无限增殖，而骨髓瘤细胞可以在体外无限增殖，因此，通过细胞融合，得到既能分泌抗体，又能无限增殖的杂交瘤细胞。
(6)淋巴细胞是由动物体骨髓中的造血干细胞分化、发育而来的。
(7)杂交瘤细胞培养过程中需要吸收氨基酸、葡萄糖等营养物质，它们是通过主动运输逬入细胞内的。
答案：(1)动物细胞培养(2)选择(3)特异性强，灵敏度高(4)灭活的病毒(5)在体外大量增殖分泌特异性抗体(6)骨髓造血干(7)主动运输(主动吸收)10.人CD20单克隆抗体是治疗一些恶性肿瘤的特效药物，目前主要是通过培养哺乳动物细胞的方式生产。
我国科学家已经培冇出世界上第一头转入了CD20抗体基因的转基因牛，可以从它产的牛奶中直接提取CD20抗体。
这项技术成熟后，有望使这一特效药的生产成本降至现在的1/10。
请回答：(1)单克隆抗体的制备需先将_______ 和_________ 融合，这一过程的诱导方法与植物体细胞杂交不同的是_____________ o(2)动物细胞培养需要在含________________ 混合气体的培养箱中进行，培养液中通常需加入_______ 等一些天然成分。
⑶转基因技术的核心是______________________________ 。
该过程用到的工具酶有和__________ O解析：单克隆抗体是通过细胞融合技术制备的。
此顷技术需先获得浆（效应B ）细胞，并 使之与瘤细胞融合成杂交瘤细胞，此过程可用灭活的病毒诱导。
在培养时需提供气体坏 m ,其中含5%co 2 ,是为了维持培养液的pH 。
转基因技术的核心是第二步——基因 表达载体的构建。
答案：（1）经过免疫的B 淋巴细胞 骨觸瘤细胞 可用灭活病毒诱导（2）95%空气加 5%CO 2血清、血浆（3）基因表达载体的构建限制性核酸内切酶（限制酶）DNA 连接 酶11. （2010•亦京讥研）有性生殖的生物产生后代需进行受精作用，植物体细胞杂交要进行原生 质体融合，单克隆抗体的制备需进行动物细胞融合，可见细胞融合技术有着广泛的应 用。
下列为细胞融合的简略过程，据图回答相关问题：（1）若a 、b 表示两种植物体细胞，则由d 细胞形成杂种植株的原理是 ______ ,这种育 种方法的优点是 ___________________________________________________ 。
⑵若a.b 分别为骨譴瘤细胞和效应B 淋巴细胞，则d 细胞特点是 ___________________ o 由d 细胞产生的抗体与普通血清抗体相比较，具有 _________________ 的特点。
生产上, 一般不能通过宜接培养效应B 细胞来生产单克隆抗体，其主要原因是 ________________________________（3）下列各图表示单克隆抗体制备过程的各阶段图解，请用箭头把代表各图解的字母按 单克隆抗体制备过程的顺序连接起来。
顺序是 _________________________________生殖隔离，实现了远缘杂交。
朶交瘤细胞具备了效应B 细胞产生特异性抗体的特点和 瘤细胞无限增殖的特点,使得单克隆抗体的产生成为现实。
答案:（1）植物细胞的全能性 克服了远缘杂交不亲和的障碍（2）既能无限増殖，又能 产生特定的抗体特异性强、灵敏度高、化学性质单一效应B 细胞不能无限増殖解析：殖物体细胞杂交形成杂种植株的基本 体外站养产生特定 抗体的杂交勵细胞 I ）把产牛•特定抗体 的杂交耀细胞注是细胞的全能性,此技术打破了种间—冇性杂交后代一体细胞杂交槓株——单克隆抗体已兔疫的B 淋巴细屜A 敢克縫抗休 F(3) IWA H\ / \C->G FE °12.科学家从某些能无限增殖细胞的细胞质中分离出无限增殖调控基因(prG),该基因能激发许多动物细胞分裂，这为单克隆抗体的制备提供了更为广阔的前景。