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动物细胞工程常用的技术手段

• 作为基因工程中的受体细胞 • 培养的动物细胞可以用于检测有毒物质,
判断某种物质的毒性 • 为治疗和预防癌症及其他疾病提供理论依

动物细胞工程常用的技术手段
二、动物体细胞核移植技术:
将动物的一个细胞的细胞核,移入一个已经去掉细 胞核的卵母细胞中,使其重组并发育成一个新的 胚胎,这个新的胚胎最终发育成动物个体。
用核移植的方法得到的动物称为克隆动物
核移植
胚胎细胞核移植
体细胞核移植 受体细胞:MⅡ期的
(难度高)
卵母细胞
动物细胞工程常用的技术手段
A母绵羊
B母绵羊

卵细胞
乳腺细胞

羊 的
细胞质
细胞核

细胞核移植
融合后的卵细胞 卵裂

早期胚胎
胚胎移植


C母绵羊子宫
妊娠 分娩
多莉羊 动物细胞工程常用的技术手段
克隆动物的研究意义
A.细胞系 C.原代细胞
B.细胞株 D.传代细胞
2、动物细胞工程技术的基础是 ------( D )
A.动物细胞融合 B.单克隆抗体
C.胚胎移植
D.动物细胞培养
动物细胞工程常用的技术手段
3、用于动物细胞培养的组织和细胞大都取自胚胎 或出生不久的幼龄动物的器官或组织,其主要原因 是这样的组织细胞 ( D )
4、气体环境:
保证细胞顺利的 生长增殖
O2和CO2(95%空气和5% CO2 )
动物细胞工程常用的技术手段
动物细胞培养液的主要成分: 葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素和动物血清等。
动物体细胞大都生 活在液体的环境
(1)液体培养基 与植物培养基相比物细胞工程常用的技术手段
动物细胞工程常用的技术手段
提问:
❖ 植物细胞工程常用的技术手段有哪些?
植物组织培养, 植物体细胞杂交
动物细胞工程常用的技术手段:
动物细胞培养、 动物细胞核移植、 动物细胞融合、 单克隆抗体 动物细胞培养技术是其他动物细胞工程技术的基础。
动物细胞工程常用的技术手段
动物细胞培养和核移植技术
• 动物细胞培养就是从动物机体内取出相关的组织, 将它分散成单个细胞,然后,放在适宜的培养基 中,让这些细胞生长和增殖。
物的组织、器官 剪碎
制成 悬浮
细胞增值
去掉组织

间蛋白
无限传代
细胞系
动物细胞培养不能 最终培养成生物体 动物细胞工程常用的技术手段
细胞株
动物细胞培养条件:
1、无菌、无毒的环境
(添加一定量的抗生素,定期更换培养液)
2、营养
(葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素、动物血清等。)
3、温度和PH 36.5+(-)0.5度, 7.2-7.4
1.克隆动物作为生物反应器,生产医用蛋白 2.改良动物品种 3.治疗人类疾病,作为供体 4.保护濒危动物
体细胞核移植技术存在的问题:
许多克隆动物表现出遗传和生理缺陷, 如体型过大,异常肥胖,发育困难,脏 器缺陷,免疫失调等。
动物细胞工程常用的技术手段
1、在动物细胞培养过程中遗传物质发生改 变的细胞是 --------------------( A )
4.过程:
动物细胞工程常用的技术手段
5.如何界定原代培养和传代培养;细胞株和细胞 系?
随细胞增多,细胞就会停止分裂增殖
细胞 悬浮 液
细胞株
细胞系遗传物质改变
10代 细胞
50代 细胞
无限传 代
原代培养
传代培养
多数组织细胞固定在表面
生长和分裂。
动物细胞工程常用的技术手段
加培养液
动物胚胎或幼龄动 胰蛋白酶 单个细胞 细胞
灭活的病毒颗粒黏附于细胞表面
细胞膜被病毒颗粒穿通 细胞膜连接
细胞融合,形成杂种细胞 动物细胞(工程细常用胞的膜技术具手段有一定的流动性)
(三)单克隆抗体
提 问

1.其由何种细胞产生? 2.主要分布在哪里? 3.如何得到抗体?
动物细胞工程常用的技术手段
(三)单克隆抗体
1。抗原 刺激 动物体内 效应B 抗体
植物细胞和动物细胞培养的比较
比较项目
植物组织培养
动物细胞培养
原理 培养基性质
细胞的全能性
细胞增殖
固体培养基 液体培养基
培养基特有成分
蔗糖、植物激 葡萄糖、动物

血清
培养结果
植物体
细胞株、细胞系
培养目的
快速繁殖、培育 无病毒植株等
动物细胞工程常用的技术手段
获得细胞或 细胞产物
动物细胞培养应用
• 大规模培养生产生物制品(病毒疫苗、干 扰素、单克隆抗体)
A.容易产生各种变异 B.具有更强的全能性 C.取材十分方便 D.分裂增殖的能力强
动物细胞工程常用的技术手段
4.动物细胞培养与植物细胞培养的重要区别在于 ------------------------------( A )
A.培养基不同; B.动物细胞培养不需要在无菌条件下进行; C.动物细胞可以传代培养,而植物细胞不能; D.动物细胞能够大量培养,而植物细胞只能培
1、选材:
动物胚胎或幼龄动物的组织、器官, 它们细胞增殖能力强,分裂旺盛,分化 程度低,容易培养。
动物细胞工程常用的技术手段
2.分散成单个细胞 ❖在进行动物细胞培养时,用胰蛋白酶分散 细胞,说明细胞间的物质主要是蛋白质。动 物细胞培养适宜的PH为7.2—7.4,此环境下 胃蛋白酶(2.0)没有活性,而胰蛋白酶(7.28.4)的活性较高。
动物细胞工程常用的技术手段
3.动物细胞生长特性:
• 细胞贴壁: 悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上,
称为细胞贴壁。 要求:
培养瓶或培养皿的内表面光滑、无毒、易于贴 附。 细胞的接触抑制:
当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时,细胞 就会停止分裂增殖,这种现象称为细胞的接触抑 制。
动物细胞工程常用的技术手段
2。特异性差、纯度低;产量低、反应不够灵敏
抗原 刺激 动物体内 效应B 抗体
抗原不纯
抗体不纯
筛选单一效应B细胞
动物细胞工程常不用的能技术手增段 值产生大量抗体
(三)单克隆抗体
-化学性质单一、特异性强的抗体。 设计方案: 一个B淋巴细胞--只分泌一种特异性抗体 小鼠骨髓瘤细胞--能无限增殖
杂种细胞
动物细胞工程常用的技术手段
效应?
B细胞
(三)单克隆抗体
抗?原
2.制备过程:
养成植株。
动物细胞工程常用的技术手段
植物体细胞杂交的意义: 打破生殖隔离,克服远缘杂交不亲和的障碍, 培育作物新品种
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1.过程:
物理法
诱导方式
化学法 生物法: 灭活的病毒
仙台病毒 紫外线
丧失感染性(不感染细胞)
动物细胞保工程留常用融的技合术手活段 性(诱导细胞融合)
1.过程:
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