动物细胞工程常用的技术手段
• 作为基因工程中的受体细胞 • 培养的动物细胞可以用于检测有毒物质,
判断某种物质的毒性 • 为治疗和预防癌症及其他疾病提供理论依
据
动物细胞工程常用的技术手段
二、动物体细胞核移植技术:
将动物的一个细胞的细胞核,移入一个已经去掉细 胞核的卵母细胞中,使其重组并发育成一个新的 胚胎,这个新的胚胎最终发育成动物个体。
用核移植的方法得到的动物称为克隆动物
核移植
胚胎细胞核移植
体细胞核移植 受体细胞:MⅡ期的
(难度高)
卵母细胞
动物细胞工程常用的技术手段
A母绵羊
B母绵羊
多
卵细胞
乳腺细胞
莉
羊 的
细胞质
细胞核
培
细胞核移植
融合后的卵细胞 卵裂
育
早期胚胎
胚胎移植
过
程
C母绵羊子宫
妊娠 分娩
多莉羊 动物细胞工程常用的技术手段
克隆动物的研究意义
A.细胞系 C.原代细胞
B.细胞株 D.传代细胞
2、动物细胞工程技术的基础是 ------( D )
A.动物细胞融合 B.单克隆抗体
C.胚胎移植
D.动物细胞培养
动物细胞工程常用的技术手段
3、用于动物细胞培养的组织和细胞大都取自胚胎 或出生不久的幼龄动物的器官或组织,其主要原因 是这样的组织细胞 ( D )
4、气体环境:
保证细胞顺利的 生长增殖
O2和CO2(95%空气和5% CO2 )
动物细胞工程常用的技术手段
动物细胞培养液的主要成分: 葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素和动物血清等。
动物体细胞大都生 活在液体的环境
(1)液体培养基 与植物培养基相比物细胞工程常用的技术手段
动物细胞工程常用的技术手段
提问:
❖ 植物细胞工程常用的技术手段有哪些?
植物组织培养, 植物体细胞杂交
动物细胞工程常用的技术手段:
动物细胞培养、 动物细胞核移植、 动物细胞融合、 单克隆抗体 动物细胞培养技术是其他动物细胞工程技术的基础。
动物细胞工程常用的技术手段
动物细胞培养和核移植技术
• 动物细胞培养就是从动物机体内取出相关的组织, 将它分散成单个细胞,然后,放在适宜的培养基 中,让这些细胞生长和增殖。
物的组织、器官 剪碎
制成 悬浮
细胞增值
去掉组织
液
间蛋白
无限传代
细胞系
动物细胞培养不能 最终培养成生物体 动物细胞工程常用的技术手段
细胞株
动物细胞培养条件:
1、无菌、无毒的环境
(添加一定量的抗生素,定期更换培养液)
2、营养
(葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素、动物血清等。)
3、温度和PH 36.5+(-)0.5度, 7.2-7.4
1.克隆动物作为生物反应器,生产医用蛋白 2.改良动物品种 3.治疗人类疾病,作为供体 4.保护濒危动物
体细胞核移植技术存在的问题:
许多克隆动物表现出遗传和生理缺陷, 如体型过大,异常肥胖,发育困难,脏 器缺陷,免疫失调等。
动物细胞工程常用的技术手段
1、在动物细胞培养过程中遗传物质发生改 变的细胞是 --------------------( A )
4.过程:
动物细胞工程常用的技术手段
5.如何界定原代培养和传代培养;细胞株和细胞 系?
随细胞增多,细胞就会停止分裂增殖
细胞 悬浮 液
细胞株
细胞系遗传物质改变
10代 细胞
50代 细胞
无限传 代
原代培养
传代培养
多数组织细胞固定在表面
生长和分裂。
动物细胞工程常用的技术手段
加培养液
动物胚胎或幼龄动 胰蛋白酶 单个细胞 细胞
灭活的病毒颗粒黏附于细胞表面
细胞膜被病毒颗粒穿通 细胞膜连接
细胞融合,形成杂种细胞 动物细胞(工程细常用胞的膜技术具手段有一定的流动性)
(三)单克隆抗体
提 问
?
1.其由何种细胞产生? 2.主要分布在哪里? 3.如何得到抗体?
动物细胞工程常用的技术手段
(三)单克隆抗体
1。抗原 刺激 动物体内 效应B 抗体
植物细胞和动物细胞培养的比较
比较项目
植物组织培养
动物细胞培养
原理 培养基性质
细胞的全能性
细胞增殖
固体培养基 液体培养基
培养基特有成分
蔗糖、植物激 葡萄糖、动物
素
血清
培养结果
植物体
细胞株、细胞系
培养目的
快速繁殖、培育 无病毒植株等
动物细胞工程常用的技术手段
获得细胞或 细胞产物
动物细胞培养应用
• 大规模培养生产生物制品(病毒疫苗、干 扰素、单克隆抗体)
A.容易产生各种变异 B.具有更强的全能性 C.取材十分方便 D.分裂增殖的能力强
动物细胞工程常用的技术手段
4.动物细胞培养与植物细胞培养的重要区别在于 ------------------------------( A )
A.培养基不同; B.动物细胞培养不需要在无菌条件下进行; C.动物细胞可以传代培养,而植物细胞不能; D.动物细胞能够大量培养,而植物细胞只能培
1、选材:
动物胚胎或幼龄动物的组织、器官, 它们细胞增殖能力强,分裂旺盛,分化 程度低,容易培养。
动物细胞工程常用的技术手段
2.分散成单个细胞 ❖在进行动物细胞培养时,用胰蛋白酶分散 细胞,说明细胞间的物质主要是蛋白质。动 物细胞培养适宜的PH为7.2—7.4,此环境下 胃蛋白酶(2.0)没有活性,而胰蛋白酶(7.28.4)的活性较高。
动物细胞工程常用的技术手段
3.动物细胞生长特性:
• 细胞贴壁: 悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上,
称为细胞贴壁。 要求:
培养瓶或培养皿的内表面光滑、无毒、易于贴 附。 细胞的接触抑制:
当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时,细胞 就会停止分裂增殖,这种现象称为细胞的接触抑 制。
动物细胞工程常用的技术手段
2。特异性差、纯度低;产量低、反应不够灵敏
抗原 刺激 动物体内 效应B 抗体
抗原不纯
抗体不纯
筛选单一效应B细胞
动物细胞工程常不用的能技术手增段 值产生大量抗体
(三)单克隆抗体
-化学性质单一、特异性强的抗体。 设计方案: 一个B淋巴细胞--只分泌一种特异性抗体 小鼠骨髓瘤细胞--能无限增殖
杂种细胞
动物细胞工程常用的技术手段
效应?
B细胞
(三)单克隆抗体
抗?原
2.制备过程:
养成植株。
动物细胞工程常用的技术手段
植物体细胞杂交的意义: 打破生殖隔离,克服远缘杂交不亲和的障碍, 培育作物新品种
动物细胞工程常用的技术手段
1.过程:
物理法
诱导方式
化学法 生物法: 灭活的病毒
仙台病毒 紫外线
丧失感染性(不感染细胞)
动物细胞保工程留常用融的技合术手活段 性(诱导细胞融合)
1.过程: