效应细胞和成分
肥大细胞 嗜碱性粒细胞
FcR+细胞（吞噬 细胞、NK细胞） FcR+细胞、 补体 巨噬细胞、嗜酸 性粒细胞、CTL
初次介导组分
血管活性胺
二次介导组分
白三烯、PGD2、 PAF、细胞因子 溶酶体酶、穿孔 素
补体、 攻膜复合体 抗原-抗体、 补体复合物 IFN-γ、IL-4、 IL-5、eotaxin、 细胞毒素
临床反应，故又称速发型超敏反应（immediate
hypersensitivity）。
第一节 Ⅰ型超敏反应
一、Ⅰ型超敏反应体内检测方法
1. 皮肤试验
再次接触 Ag Mast cell IgE
Mast cell
Mast Mast cell cell
脱颗粒
20-30min
局部红肿、 硬结
第一节 Ⅰ型超敏反应
第二十二章 超敏反应性疾病及其免疫检测
重点提示
Ⅰ型超敏反应体外检测项目及检测方法。
抗血细胞抗体常见检测方法和临床意义。
抗原非特异性循环免疫复合物的检测方法和临床
意义。
第二十二章 超敏反应性疾病及其免疫检测
超敏反应（hypersensitivity）：是机体接受某些
抗原刺激时，出现生理功能紊乱或组织细胞损伤等异常
二、Ⅳ型超敏反应皮肤试验临床意义及应用评价 （一）临床意义
1．寻找变应原
2．结核菌素皮试意义：①了解机体是否对结核菌素 有免疫力及接种卡介苗后的免疫效果观察 ；②排除结核 菌感染 ；③了解机体细胞免疫功能状况 。 3．传染病的诊断 （二）应用评价 结核菌素皮试不但可以判断机体是否对变应原过敏， 而且可以反映机体的细胞免疫功能状况。斑贴试验虽然敏 感度不太高，但假阳性较少。
第一节 Ⅰ型超敏反应
第二节 Ⅱ型超敏反应
第二节 Ⅱ型超敏反应
Ⅱ型超敏反应：又称为溶细胞型或细胞毒型超敏反应， 特点是由IgG或IgM类抗体与靶细胞表面相应抗原结合后， 在补体、吞噬细胞和NK细胞参与下，引起的以细胞溶解或
组织损伤为主的病理性免疫反应，发作较快。
第二节 Ⅱ型超敏反应
一、Ⅱ型超敏反应常见检验项目及其检测方法 （一）抗血细胞抗体检测方法 1．抗球蛋白试验（antiglobulin test，AGT），即 Coombs试验。 2. 微柱凝胶法
和特异性均较好，但使用荧光素做标记时，试剂的使用有
效期较短。
第一节 Ⅰ型超敏反应
3. IgG4检测
（1）检测方法：包括放射免疫试验、酶联免疫吸附
试验、免疫比浊等。
（2）临床意义 ： ① IgG4异常增高可见于Ⅰ型超敏反应性疾病和IgG4 相关性疾病。 ②此外，类风湿关节炎、系统性红斑狼疮等自身免疫 病患者血清中亦可出现IgG4水平升高。
第一章 血液标本采集与处理
临床免疫学检验技术
第二十二章 超敏反应性疾病及其免疫检测
杨巍
第二十二章 超敏反应性疾病及其免疫检测
目 录
第一节 Ⅰ型超敏反应 一、Ⅰ型超敏反应体内检测方法 二、Ⅰ型超敏反应体外检测项目及检测方法 第二节 Ⅱ型超敏反应 一、Ⅱ型超敏反应常见检验项目及其检测方法 二、Ⅱ型超敏反应抗血细胞抗体检测的临床意义及应用评价 第三节 Ⅲ型超敏反应 一、Ⅲ型超敏反应常见检验项目及其检测方法 二、Ⅲ型超敏反应免疫复合物检测的临床意义及应用评价 第四节 Ⅳ型超敏反应 一、Ⅳ型超敏反应常见检验项目及其检测方法 二、Ⅳ型超敏反应皮肤试验临床意义及应用评价 本章小结
3．酶介质法：原理是IgG型不完全抗体与红细胞膜上 相应抗原结合不能形成肉眼可见的凝集。加入酶介质后， 红细胞膜表面的唾液酸糖肽被破坏，细胞膜表面负电荷减 少，细胞间排斥力减小，细胞之间距离缩小，呈现肉眼可 见的凝集。 最常用的酶是1%的木瓜酶或菠萝蛋白酶。
第二节 Ⅱ型超敏反应
（二）自身抗体检测 常见的介导Ⅱ型超敏反应的自身抗体还包括抗乙酰胆 碱受体抗体、抗促甲状腺激素受体抗体以及抗肾小球基底 膜Ⅳ型胶原抗体和抗肾小管基底膜抗体等。 检测方法：间接免疫荧光法（indirect immunofluorescence，IIF）。检测时，以特异性组织切 片作为检测基质。
第一节 Ⅰ型超敏反应
4．细胞脱颗粒测定 （1）类胰蛋白酶测定：作为肥大细胞活化、脱颗粒 的指标。一般采用双抗体夹心ELISA法。 （2）嗜碱性粒细胞脱颗粒测定：该试验阳性不仅能 够证实sIgE的存在，而且能够证明sIgE是有功能的，较单 纯皮肤试验或sIgE阳性结果更有临床意义。 （3）嗜酸性粒细胞阳离子蛋白(eosinophil cationic protein，ECP)测定：作为嗜酸性粒细胞活化、 脱颗粒的指标。ECP测定包括荧光免疫试验、化学发光免 疫试验、酶联免疫吸附试验和放射免疫试验等多种方法。
2 ．激发试验(provocation test)：是模拟自然发 病条件，以少量致敏原引起一次较轻的变态反应发作， 用以确定变应原的试验。
非特异性激发试验 特异性激发试验
二、Ⅰ型超敏反应体外检测方法 血清总IgE检测 特异性IgE检测 体外检测方法 IgG4检测 细胞脱颗粒测定
第一节 Ⅰ型超敏反应
第三节 Ⅲ型超敏反应
第三节 Ⅲ型超敏反应
Ⅲ型超敏反应：又称为免疫复合物型或血管炎型超敏 反应，是由抗原和抗体结合形成中等大小的可溶性免疫复 合物沉积于局部或全身多处毛细血管基底膜后，激活补体
，并在中性粒细胞、血小板、嗜碱性粒细胞等效应细胞参
与下，引起的以充血水肿、局部坏死和中性粒细胞浸润为 主要特征的炎症反应和组织损伤。
1．血清总IgE(total IgE，tIgE)检测 （1）检测方法：包括免疫比浊、化学发光免疫试验
和酶联免疫吸附试验。
（2）临床意义 ：TIgE升高常见于过敏性疾病 ，当 患者有选择性IgA缺乏症，感染、肿瘤和其他情况（输血、川 崎病、肾病综合症、肝脏疾病）时也出现血清TIgE升高。 单纯TIgE升高不能作为疾病诊断依据，也不能说明患者属
清tIgE结果时须建立当地人群tIgE水平的参考区间。

第一节 Ⅰ型超敏反应
2．特异性IgE（specific IgE，sIgE）检测
（1）检测方法：包括放射免疫试验、免疫印
迹和荧光酶免疫试验。 放射变应原吸附试验 （radioallergosorbent test，RAST） RAST是目前公认的检测Ⅰ型超敏反应的有效方 法之一 。根据标记物不同分为：RAST RIA 、RAST EIA 、RAST FEIA。
第一节 Ⅰ型超敏反应
（2）sIgE检测的临床意义 ：sIgE检测可以与变应原 皮试和支气管激发试验互为补充，但不能完全代替后两种 试验。
（3）sIgE检测的应用评价： ①RAST方法检测效率低
（每次只能检测一种变应原）；有放射性核素污染风险； 当待测血清中含有相同特异性IgG时可干扰正常结果。② 免疫印迹无污染、无需特殊设备、操作简单、能一次性确 定多种变应原，故广泛应用。③荧光酶免疫试验的敏感性
于特异质个体；TIgE正常也不能排除变态反应疾病。
第一节 Ⅰ型超敏反应
（3）血清总IgE检测的应用评价： ①免疫比浊和化学发光免疫试验敏感性高、特异性强、 稳定性好，测定自动化、检测时间短；酶联免疫吸附试验 方便、实用，敏感性和特异性均好，不需要特殊仪器。 ②血清tIgE含量受多种因素的影响，因此，在分析血
溶酶体酶 趋化因子、细胞 因子、细胞毒素、 炎症介质
第二十二章 超敏反应性疾病及其免疫检测
第一节
Ⅰ型超敏反应
第一节 Ⅰ型超敏反应
Ⅰ型超敏反应：亦称变态反应（allergy）或过敏反 应（anaphylaxis），主要由特异性IgE抗体介导产生，因 其发生速度快，常在再次接触相同抗原后数分钟内即出现
第三节 Ⅲ型超敏反应
一、Ⅲ型超敏反应常见检验项目及其检测方法
类别 物理法 原理 溶解度 方法 PEG比浊试验 敏感度（μg） 20
补体法
抗球蛋白法
结合C1q
结合RF
C1q固相试验
mRF固相抑制试验
0.1
1~20
细胞法
补体受体
Raji细胞试验
6
第三节 Ⅲ型超敏反应
二、Ⅲ型超敏反应免疫复合物检测的临床意义及应用
RBC 通过凝 胶，沉 积在管 底
+
凝集 RBC 在凝 胶下 部
++
凝集 RBC 在凝 胶中 部
双群
凝集 RBC在 凝胶顶 部；未 凝集 RBC在 管底
+++
凝集 RBC 在凝 胶中 上部
++++
凝集 RBC 在凝 胶顶 部， 呈线 条形
第二节 Ⅱ型超敏反应
2．凝聚胺法： 原理： 低离子介质——降低溶液的离子强度——促进不完全 抗体与红细胞抗原结合； 高价阳离子多聚物（凝聚胺）——中和红细胞表面的 负电荷——使IgG型抗体直接凝集红细胞。 加入中和液——由凝聚胺引起的非特异性凝集——分 散；由抗体介导的特异性凝集——不分散。 结果判定： 凝集块在短时间（1分钟）内分散——判断为阴性； 形成不同强度的凝集块——判断为阳性。
第四节 Ⅳ型超敏反应
Ⅳ型超敏反应皮肤试验结果的判断标准
反应程度 + ++ +++ ++++ 皮内试验斑贴试验 无反应或小于对照 仅有红肿 红肿伴硬结 红肿、硬结、水疱 大疱和（或）溃疡 皮内试验斑贴试验 无反应或小于对照 轻度红肿、瘙痒 明显红肿、时有红斑 红肿伴豆疹、水疱 红肿、水疱、溃疡
第四节 Ⅳ型超敏反应
评价
（一）临床意义 免疫复合物阳性或浓度升高主要见于感染性疾病和自 身免疫性疾病。 CIC的消长可反映病情的严重程度、检测治疗效果。 须对比多次检测结果才能证实其与疾病的相关性。 对有蛋白尿、关节痛、血管炎、浆膜炎、紫癜症状等 诊断不明确的患者，可考虑检测循环免疫复合物，并结合 局部免疫复合物的免疫组化检测结果以明确病变是否与Ⅲ 型超敏反应有关。