指纹图谱中应包含的信息
1. 对于中药材和中药饮片：种的共性，用药 部位的共性，产地的个性，采收期、炮制 方法的个性信息。
2. 对于半成品和中药制剂：原药材（甚至辅 料）的信息；工艺信息等。
3. 药效信息：药效信息。
中药指纹图谱构建方法
TLC
色谱技术 HPLC, LC/MS
GC, GC/MS
HPCE, CE/MS 光谱技术 UV IR 波谱技术 MS NMR X-射线衍射法 分子生物学技术
●开放系统，对环境温 度、相对湿度要求较高
●具有色彩参数，可获得色彩丰富的 色谱图像，直观性强；同时辅以功能 团显色剂还可提示成分的类别，提高 鉴别的专属性。
TLC举例：区分不同品种
TLC举例：监控工艺
气相色谱 Gas Chromatography (GC)
●分离效能高
●分析速度快
●适用于植物的挥发油成分 及其它易挥发性成分或可转 化为可挥发的成分测定
色谱指纹图谱
薄层色谱
●可在同板同时分析多达18个样品， 时效高
●所用的是正相展开剂，其组成变化 灵活，可适应多种成分的分离
●离线操作，即可直观比较图谱，又 可扫描得到轮廓图和处理数据
●占机时间短
●展距局限在 10cm~20cm ，‘柱效’ 相对较低，对复杂组分 不提高分离度则难以提 取指纹特征的药材受到 限制。
二、供试品溶液制备
原则 1. 确保中药中的主要化学成分或有效成分在 图谱中得以体现 2. 所含成分的理化性质和检测方法
●流动相选择范围宽
●灵敏度高
●色谱柱可多次重复使用
●流出组分可以收集
●采用多种检测器，可同时获 取保留值信息和化合物的光谱、 质谱信息
诃子指纹图谱
I
II
III 诃子
小诃子 大诃子 绒毛诃子
（1） 紫外可见分光光度法和红外光谱法 这两种方法能够给出药效物质基础的结构信息
，但所给出的信息是所有化学物质结构结构信息的加 和，不具备指纹特征，但可作为中药指纹图谱研究的 辅助方法。
2 .基因组学指纹图谱： 用以阐明中药作用的个体差异和特定基因的作用模 式。
3.蛋白组学指纹图谱： 全面提供中药负杂物质基础的大量信息，同时还能 提供量效的相关信息，具有鉴定和研究的双重作 用，对于制剂可以确定该制剂的主要活性物质。
第二节中药指纹图谱研究程序及技术要求
固定产地、采收期 和加工炮制的中药
（1） 紫外可见分光光度法和红外光谱法
操作简便（不需要复杂的提取 仪器）、快速、准确、经济、 溶剂低毒、重复性高、实用性 强。
●几乎所有的物质都有特征的 红外光谱。
●虽然植物中药提取物还是一 个混合物，但是由于不同物 质的红外光谱具有加合性， 因此，植物中药提取物的红 外光谱能反映出所有成分的 综合信息因而具有全息光谱 的特点。
中药指纹图谱的含义
中药经适当处理后，采用一定的 分析手段，得到的能够标示该中 药特征的共有峰的图谱。
中药指纹图谱的特性
能反映中药 有效部位所 含大部分成 分的种类， 或指标成分 的全部
能特征地区 分中药的真 伪与优劣
稳定性（重现性）
在规定的方法与条件下，不同的操作者和 不同的实验室应能重复
第一节 概述
红外光谱图
小蓟丁酮提取物的红外 指纹图谱
• 中国药典规定：小 蓟在开花时采。
• 根据1384cm-1处 吸收峰的有无，可 以鉴别其采集时间 是否正确。
质谱（ＭＳ）
• 按照带电粒子的质荷比（ｍ／ｚ）和其相 对丰度大小排列组成图谱。
• 中药特征提取物置质谱仪中进行轰击裂解 为不同的碎片，获得提取物中化学成分的 MS图，不同中药由于所含化学成分的种类 及组成比例的不同，所得质谱图中分子离 子峰和碎片离子峰亦不一致。
建立中药指纹图谱检测标准的必要性
中药 ➢ 药材 ➢ 饮片 ➢ 提取物 ➢ 中成药
特点与问题
➢ 来源于生物，化 学成分变化大
➢ 化学成分复杂， 有效成分尚未阐 明
➢ 多成分、多靶点 作用
➢ 种植技术与生产 过程控制水平差
单指标或少数 指标定性、 定量分析
？
特征图谱鉴别 指纹图谱整体
成分控制
药品 ➢ 质量一致性 ➢ 生物等效性 ➢ 使用安全性
X射线衍射法（XRD）及核 磁共振法（NMR）
• 这两种方法能给出药效物质基础的结构信 息，部分信息也可能与特定化学成分直接 关联。但该两种方法所使用的仪器在国内 尚未普及，不适应该方法的应用与推广。 在中药指纹图谱研究过程中不建议采用X射 线衍射法及核磁共振法。
生物学方法
1. DNA指纹图谱： 用于中药真伪、品种及种质资源的鉴定。
代表性 均一性
10批以上中药
预处理
中药未 知检品
图谱测试、相似度评价 方法检验
评价标准
图
药效学试验
谱
相关性
评
价
供试品溶液
选择测试条件 方法建立考察
中药指纹图谱
测定图谱参数
图谱分析
图谱信息
不同产地、采收期 和加工炮制的中药
一、样品收集
1. 最关键的步骤 真实性 代表性 2. 10批以上 3. 原药材 ：不同产地、不同采收季节等
●可提供保留值信息，与质 谱联用，还可提供更丰富的 化学结构信息
• 分辨率高，得到的 色谱组份非常复杂， 尤其是含挥发油药材， 单萜类成分组成很不 稳定，样品间差异可 能很大，处理数据和 判别相似度时一定程 度的取舍
肉桂油的气相色谱指纹图谱
羌活GC指纹图谱 独活GC指纹图谱
毛细管电泳 Capillary Electrophoresis
第五章 中药指纹图谱
Fingerprints of Chinese Materia Medica
第一节 概述 指纹图谱的起源与发展
指纹图谱技术应用于植物药质量控制，是从20世纪 70 年 代 ， 色 谱 技 术 的 发 展 ， 人 们 大 量 采 用 薄 层 色 谱 （ TLC）方法，将植物中化学成分展载于由各种担体铺成 的薄层板上。根据薄层板上的斑点的位置、斑点大小、 斑点颜色、斑点数目的多少进行定性鉴别，这种薄层鉴 别方法具备了指纹图谱的特征。
●分离效能高 ●分析速度快 ●高分辨率 ●可与紫外、荧光、电化学、质 谱、拉曼光谱等联用，可提供更 丰富的化学结构信息
H P C E 指 纹 图 谱
反相高效液相色谱 (RP-HPLC)
●适用范围广 ●分离性能好 ●分析速度快
对较为复杂的色谱实 验条件要求比较苛刻，由 此带来不同实验室之间重 现性的难度增大