北美苜蓿协会
３３
三得利
ＭＮＧＮ－１
北美苜蓿协会
３４
图牧１号
甘农１号
全国畜牧总站
３５
德宝
龙 牧 ８０３
全国畜牧总站
３６
蔚县
陇中
全国畜牧总站
３７
公农１号
晋南
全国畜牧总站
３８
公农２号
皇冠
全国畜牧总站
３９
草原２号
北疆
全国畜牧总站
４０
河西
准格尔
全国畜牧总站
４１
驯鹿
敖汉
全国畜牧总站
４２
甘农３号
天水
全国畜牧总站
４３
全国畜牧总站
６０
Ｐｒｏｏｆ
北 林 ２０１
北京林业大学
６１
Ｄａｒｔ
北 林 ２０３
北京林业大学
６２
ＢＥＡＶＥＲ
来源 Ｓｏｕｒｃｅ 北京林业大学 全国畜牧总站 全国畜牧总站 全国畜牧总站 全国畜牧总站 全国畜牧总站 全国畜牧总站 全国畜牧总站 全国畜牧总站 全国畜牧总站 全国畜牧总站 全国畜牧总站 北美苜蓿协会 北美苜蓿协会 北美苜蓿协会 北美苜蓿协会 北美苜蓿协会 北美苜蓿协会 北美苜蓿协会 北美苜蓿协会 北美苜蓿协会 北美苜蓿协会 北美苜蓿协会 北美苜蓿协会 北京林业大学 北美苜蓿协会 北美苜蓿协会 北美苜蓿协会 北美苜蓿协会 北美苜蓿协会 北美苜蓿协会
ＦＯ－５。
１．２ 方 法
使用 ＭＳ培养基 培 养 苜 蓿 无 菌 苗，待 其 生 长 至
３～５片真叶 时 在 无 菌 环 境 下 使 用 注 射 器 吸 取 一 定
量的菌液，均匀打 入 培 养 基 内，进 行 病 原 菌 的 接 种，
以接种等量的无菌 水 作 为 对 照。 接 种 ８ｄ 后 从 三 角
存 活 率 （％ ）＝ 存 活 数／接 种 的 总 数 ×１００％ １．３ 数 据 处 理
所有数据 及 聚 类 分 析、显 著 性 分 析 均 由 ＳＰＳＳ １８．０ 软件进行统计处理。
２ 结果与分析
２．１ 不 同 菌 株 的 致 病 力 测 定 接种 供 试 的 ５ 个 菌 株 后，抗 病 品 种 Ｍｏａｐａ ６９
本 试 验 苜 蓿 品 种 由 北 美 苜 蓿 协 会 （ＮＡＡＩＣ）、全 国 畜 牧 总 站 和 北 京 林 业 大 学 提 供 ，总 共 ６２ 份 苜 蓿 材 料（表１）。其中，Ｍｏａｐａ ６９、Ａｇａｔｅ和 ＭＮＧＮ－１为 北美苜蓿协会提出的苜蓿抗根腐病评价的标准对照
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＊ 通 讯 作 者 ，Ｅ－ｍａｉｌ：ｌｕｘｉｎｓｈｉ３０４＠１２６．ｃｏｍ 收 稿 日 期 ：２０１２－０３－２６；修 回 日 期 ：２０１２－１０－２３ 基 金 项 目 ：国 家 科 技 支 撑 项 目 “优 质 多 抗 牧 草 新 品 种 选 育 与 良 种 繁 育 关 键 技 术 的 研 究 与 示 范 ”（２０１１ＢＡＤ１７Ｂ０１－０５） 作者简介：黄宁（１９８７－ ），女，山东 潍 坊 人，在 读 硕 士 生，主 要 从 事 苜 蓿 抗 病 性 研 究 ，Ｅ－ｍａｉｌ：ｈｕａｎｇｎｉｎｇ２２４＠１６３．ｃｏｍ．
公农３号
中兰１号
全国畜牧总站
４４
ＫＡＮＺＡ
中苜３号
全国畜牧总站
４５
ＫＳ ２０８
赤草１号
全国畜牧总站
４６
Ｎａｒｒａｇａｎｓｅｔｔ
游客
全国畜牧总站
４７
ＶＥＲＮＥＭＡ
维多利亚
全国畜牧总站
４８
ＷＡＰＨ－１
龙牧 ８０１
全国畜牧总站
４９
ＺＧ９８３０
阿尔冈金
全国畜牧总站
５０
ＷＬ３１６
中苜１号
全国畜牧总站
５１ Leabharlann ５２６２关 键 词 ：苜 蓿 ；根 腐 病 ；抗 病 性 ；品 种 评 价 ；标 准 对 照 品 种 中 图 分 类 号 ：Ｓ４３２．１ 文 献 标 识 码 ：Ａ
苜蓿根腐病是 影 响 苜 蓿 产 量、品 质 及 限 制 苜 蓿 广泛应用的 主 要 因 素 之 一 。 ［１］ 已 有 研 究 报 道，尖 孢 镰刀菌 （Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｏｘｙｓｐｏｒｕｍ ）是 引 起 苜 蓿 根 腐 病 的主要病原菌，可使苜蓿根部腐烂，茎叶枯萎 。 ［２］ 目 前，国内已有许多针对苜 蓿 根 腐 病 的 相 关 研 究 ， ［２～４］ 但尚未对苜蓿抗根腐病进行系统评价。北美苜蓿协 会提出了苜蓿品种 对 根 腐 病 抗 病 性 的 测 定 标 准，包 括 抗 病 评 价 过 程 中 苜 蓿 苗 的 培 养 、菌 株 的 培 养 、相 应 的接种程序与评价 条 件 等，并 且 确 定 了 相 应 的 标 准 对照品 种，有 一 套 较 为 完 备 的 苜 蓿 抗 病 评 价 体 系 （其 标 准 为：悬 浮 液 浓 度 １×１０６ 个 孢 子／ｍＬ、温 度 ２８～３２℃、光 照 １６ｈ、苜 蓿 苗 龄 ８ 周，病 害 分 级 标 准 为 抗 病 ：根 部 无 感 病 症 状 ；感 病 ：根 颈 处 严 重 缢 缩 ，变 褐，直至植株 死 亡 ）［５］。 而 我 国 目 前 尚 未 有 自 主 的 标 准 对 照 品 种 ，因 此 ，本 研 究 在 对 不 同 苜 蓿 品 种 抗 根 腐病进行评价的基 础 上，初 步 筛 选 与 北 美 苜 蓿 协 会 提出的标准对照品 种 抗 性 相 近 的 国 内 苜 蓿 品 种，为 进一步确立我国苜蓿抗根腐病评价的标准品种提供 参考依据。
图 ２ 不 同 剂 量 孢 子 悬 浮 液 下 的 病 情 指 数 Ｆｉｇ．２ Ｔｈｅ ｄｉｓｅａｓｅ ｉｎｄｅｘ ｕｎｄｅｒ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｄｏｓｉｍｅｔｒｙ
ｏｆ ｓｐｏｒｅ ｓｕｓｐｅｎｓｉｏｎ
１．抗病品种 Ｍｏａｐａ ６９；２．感病品种 ＭＮＧＮ－１；＊为同一菌株接种 下 两 品 种 间 病 情 指 数 的 显 著 差 异 （＊ ：Ｐ＜０．０５，＊ ＊ ：Ｐ＜０．０１）； 下图同
第 ３５ 卷 第 １ 期
中 国 草 地 学 报
２０１３ 年 １ 月
Ｖｏｌ．３５ Ｎｏ．１ Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｇｒａｓｓｌａｎｄ Ｊａｎ．２０１３
文 章 编 号 ：１６７３－５０２１（２０１３）０１－００１２－０６
６２个苜蓿品种抗根腐病评价及抗病评价标准品种的筛选
表 １ 苜 蓿 品 种 及 来 源 Ｔａｂｌｅ １ Ｎａｍｅｓ ａｎｄ ｓｏｕｒｃｅｓ ｏｆ Ｍｅｄｉｃａｇｏ ｓａｔｉｖａ ｕｓｅｄ ｉｎ ｔｈｉｓ ｓｔｕｄｙ
品种 Ｃｕｌｔｉｖａｒ
来源 Ｓｏｕｒｃｅ
编号 Ｎｕｍｂｅｒ
品种 Ｃｕｌｔｉｖａｒ
Ｍｏａｐａ ６９
北美苜蓿协会
３２
北 林 ２０２
Ａｇａｔｅ
环，侧根 颜 色 逐 渐 变 褐；２ 级：根 颈 严 重 缢 缩 变 黑 坏
死，侧根腐烂；３级：根大部分变黑 变 褐，茎 叶 逐 渐 枯
死 ，植 株 死 亡 。
病情
指数
＝
∑ （各 级 发 病 株 数 × 该 级 代 表 值 ）×１００ 调查总株数×病情最高级代表值
１．１ 材 料 １．１．１ 供 试 苜 蓿 品 种
１．Ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ ｃｈｅｃｋ ｃｕｌｔｉｖａｒ Ｍｏａｐａ ６９；２．Ｓｕｓｃｅｐｔｉｂｌｅ ｃｈｅｃｋ ｃｕｌｔｉｖａｒ ＭＮＧＮ－１；＊ ｍｅａｎｓ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ ｃｕｌｔｉｖａｒ ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅ ｅｘｉｓｔｓ （＊ ：Ｐ＜０．０５，＊ ＊ ：Ｐ＜０．０１）；Ｔｈｅ ｓａｍｅ ａｓ ｂｅｌｏｗ
图 １ 不 同 菌 株 的 致 病 力 测 定 Ｆｉｇ．１ Ｐａｔｈｏｇｅｎｉｃｉｔｙ ｔｅｓｔ ｏｆ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｓｔｒａｉｎｓ
２．２ 孢 子 悬 浮 液 接 种 剂 量 的 筛 选 参照北美苜蓿协会制定的评价苜蓿抗根腐病标
准，将菌株 ＦＯ－３孢子配成浓度为１×１０６ 个孢子／ｍＬ 的悬 浮 液，接 种 抗 病 品 种 Ｍｏａｐａ ６９ 与 感 病 品 种 ＭＮＧＮ－１，结果如图 ２ 所 示。 接 种 无 菌 水 的 对 照， 苜蓿幼苗 均 未 发 病；接 种 ２ｍｌ孢 子 悬 浮 液 的 处 理， 抗病品种 Ｍｏａｐａ ６９和感病品种 ＭＮＧＮ－１的病情 指数有 极 显 著 差 异 （Ｐ＜０．０１），分 别 为 ２５．１９ 和 ５９．６３；接种４ｍｌ孢子悬 浮 液 的 处 理，抗 病 品 种 和 感 病品种的病情 指 数 有 显 著 差 异 （Ｐ＜０．０５），分 别 为 ４３．３３和 ６９．２６；接 种 ６ｍｌ和 ８ｍｌ孢 子 悬 浮 液 的 处 理 ，病 情 指 数 虽 均 较 大 ，但 是 抗 病 品 种 和 感 病 品 种 的 差异较小，较难评价 出 抗 病 品 种 和 感 病 品 种 之 间 的 差异。因此，选 用 ２ｍｌ的 菌 液 为 最 佳 接 种 剂 量，既 节省菌 液 又 能 够 高 效 准 确 地 评 价 苜 蓿 品 种 的 抗 病性。
与感病品种 ＭＮＧＮ－１的病情指数如图１。 由图中 可见，接种 菌 株 ＦＯ－３ 后，抗 病 品 种 Ｍｏａｐａ ６９ 与 感 病品种 ＭＮＧＮ－１ 的 病 情 指 数 存 在 极 显 著 差 异 （Ｐ ＜０．０１），分 别 为 ４２．２２ 和 ７１．１１；接 种 菌 株 ＦＯ－５ 后，Ｍｏａｐａ ６９ 和 ＭＮＧＮ－１ 的 病 情 指 数 存 在 显 著 差异（Ｐ＜０．０５），分 别 为 ４８．５２ 和 ７２．５９；接 种 菌 株 ＦＯ－２后，抗病品种 和 感 病 品 种 的 病 情 指 数 均 较 高， 但差异不明 显；接 种 菌 株 ＦＯ－１ 的 苜 蓿 幼 苗 病 情 指
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中 国 草 地 学 报 ２０１３ 年 第 ３５ 卷 第 １ 期
数最低，Ｍｏａｐａ ６９ 和 ＭＮＧＮ－１ 两 个 品 种 的 病 情 指数分 别 为 ３６．６７ 和 ４５．９３，且 两 品 种 间 无 显 著 差 异；接种 ＦＯ－４和 ＦＯ－５菌株的两品种间差异小于接 种 ＦＯ－３；而 喷 洒 无 菌 水 的 对 照 苜 蓿 幼 苗 则 均 未 发 病。为评价出不同 品 种 的 抗 病 性，选 择 致 病 力 较 强 且对标 准 抗、感 病 品 种 致 病 力 存 在 极 显 著 差 异 的 ＦＯ－３ 菌 株 作 为 接 种 剂 量 、接 种 后 评 价 时 间 测 定 及 各 品种抗病性测定的菌株。