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玉米成分转基因检测知识

玉米成分转基因检测知识
转基因玉米就是利用现代分子生物技术,把种属关系十分遥远且有用植物的基因导入需要改良的玉米遗传物质中,并使其后代体现出人们所追求的具有稳定遗传性状的玉米。

转基因食品有很多优点:增加作物产量、降低生产成本;增强作物抗虫害、抗病毒等的能力;提高农产品耐贮性。

但转基因食品作为一种新物种,其对人体健康、生态平衡是否具有危害还未确定:可能通过基因漂流影响其他物种;转基因食品可能会引起过敏等等。

比如说水果玉米,就是那种吃起来带甜味的。

颗粒大小差不多,金黄色栗粒的,一般路边烧烤的那种玉米。

彩色玉米,就是栗粒有紫色白色黄色的哪种,这是最原始的转基因玉米了。

下列是对于其它相关转基因成分物质:
◆大豆◆马铃薯◆木瓜◆青椒
◆食用菌◆小麦◆烟草
◆油菜籽◆棉花◆植物性饲料
◆调味品◆食用油脂◆食品半成品、食品成品
◆水稻及其产品◆植物及其加工产品
下面我们来看一下实时荧光PCR反应体系:
试剂名称终浓度ЧL/反应
10×PCR反应缓冲液1× 5
MgCl2(25m mol/L) 2.5 m mol/L 5
dATP(10 m mol/L) 200 n mol/L 1
dGTP(10 m mol/L) 200 n mol/L 1
dCTP(10 m mol/L)200 n mol/L 1
dTTP(10 m mol/L) 100 n mol/L 0.5
dUTP(10 m mol/L) 200 n mol/L 1
UNG酶(1 U/чL)0.5U 0.5
上游引物(10чmol/L)200 n mol/L 1
下游引物(10чmol/L)200 n mol/L 1
探针(5 чmol/L)100 n mol/L 1
Taq酶(5U/чL) 2.5U 0.5
DNA模板(40 ng/чL~50ng/чL)- 5
补水至- 50
注:表中DNA模板为原料的模板量,加工产品可视加工程度适当增加模板量;也可根据具体情况或不同的反应总体积进行适当调整。

1×25
TaMan R Universal PCR Master
Mix(2×)
上游引物(10 чmol/L)150 nmol/L 0.75
下游引物(10чmol/L)150 n mol/L 0.75
DNA模板(40 ng/Чl~50 ng/чL)- 4.0
探针(5 чmol/L)50 nmol/L 0.50
补水至- 50
注:表中DAN模板为原料的模板量,加工产品可视加工程度适当增加模板量;也可根据具体情况或不同的反应总体积进行适当调整。

实时荧光定量PCR的反应参数为:50℃PCR前去污染2min;预变性95℃15s,60℃1min,45个循环。

待测样品外源基因检测Ct值大于或等于40,内源基因检测Ct值小于或等于24,设置的对照结果正常者,则可判定该样品未检出×××基因;
待测样品外源基因检测Ct值小于或等于36,内源基因检测Ct值小于或等于24,设置的对照结果正常者,则可判定该样品检出×××基因;
待测样品外援基因检测Ct值在36~40之间,应重做实时荧光PCR扩增。

再次扩增后的结果Ct值仍小于40,且设置的对照结果正常,则可判定该样品检出×××基因;再次扩增后结果Ct值大于40,且设置的对照结果正常,可判定该样品未检出×××基因。

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