SDS-PAGE
蛋白质在聚丙烯酰胺凝胶电泳时，它的迁移率取决 于它所带净电荷以及分子的大小和形状等因素。
如果在丙烯酰胺凝胶系统中加入阴离子去污剂十二 烷基磺酸钠(SDS)，则蛋白质分子的电泳迁移率主要 取决于它的分子量，而与所带电荷和形状无关。
因此可以利用SDS-PAGE测定蛋准备：标准品按说明书进行处理， 样品加入ddH2O溶解后，再加入SDS上样缓冲液。
7. 加样电泳（每孔加样15μl）。
8. 卸下玻板，剥离凝胶放在器皿内，切去一角作为 方位标记。
9. 染色：用至少五倍体积染色液浸泡凝胶，于平缓 摇摆平台上室温1h左右。
10.脱色：用蒸馏水漂洗数次，再用脱色液脱色，至 蛋白质条带清晰
注意事项
（1）聚丙烯酰胺具有神经毒性，操作时要戴手套。 （2）安装电泳槽时要注意均匀用力旋紧固定螺丝，防
止夹坏玻璃板，避免缓冲液渗漏。 （3）梳子需一次平稳插入,梳口处不得有气泡,梳底需
水平。
（4）微量注射器（加样器）上样时, 注射器不可过低, 以防刺破胶体；也不可过高, 样品下沉时易发生扩散， 溢出加样孔。
（5）剥胶时要小心,保持胶完好无损,染色要充分。
上层为浓缩胶，凝胶孔径较大，没有分子筛效应， 其pH为6.8，由于快慢离子所形成的高电压梯度， 使得变性蛋白质分子在泳动中被压缩为很薄的一层， 大大提高了分辨率。
下层为分离胶，凝胶孔径较小，有分子筛效应， pH为8.8，变性蛋白质分子所带负电荷基本一致， 泳动速度主要决定于分子量。
实验步骤
1. 安装制胶模具。 2. 调制分离胶，立即灌注至模具高度的70% 。 3. 加一层纯水，约30min后聚合。 4. 倒出水并用滤纸把剩余的水分吸干。 5.调制浓缩胶，立即灌注插入梳子。静置。
SDS-PAGE凝胶电泳
姓名：杨文骏 学号：S1309008
主要内容
SDS-PAGE凝胶电泳简介及应用 SDS-PAGE凝胶电泳的实验步骤 注意事项
聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)
聚丙烯酰胺凝胶是由单体丙烯酰胺(Acr)和 交联剂N,N-甲叉双丙烯酰胺(Bis)在加速剂 和催化剂作用下聚合交联成三维网状结构的 凝胶。以此凝胶为支持物的电泳称为聚丙烯 酰胺凝胶电泳(PAGE)。