药品柜
冰箱
天
平
磁 力 搅 拌 器
恒温水浴锅
2、洗涤室（区）
功能：完成各种器具的洗涤、干 燥、保存、材料预处理，同时兼 顾试管苗出瓶等。 要求：需安装一个较大的水池， 水泥制作，白瓷砖砌内外表面， 池底放一张橡胶垫，以减少玻璃 器皿的破损。下水道应畅通，以 免妨碍工作。 设备：玻璃器皿、塑料器皿、周 转箱、洗涤刷、洗瓶机、洗涤剂、 晾干台等。

3、培养基制作与灭菌室（区）
要求：20 m2左右，明亮，通风。配置大型 工作台1张。 功能：培养基配制、分装、 高压灭菌，无 菌水的制备以及其它物品的高压灭菌等。 设备：高压灭菌器、电炉、不锈钢锅、培 养基分注器、物品橱1-3个，用以放置线绳、 封口材料等。此外还应有烘箱、天平、酸度 计、盆与桶等。
洗 涤 室
接 种 室
培 养 室
灭 菌 室
驯 化 室
植物组织培养实验室 的组成
分体式-研究性质实验室，分开的若干房间将 准备室分解为药品贮藏室、培养基配制与洗涤室 和灭菌室等，功能明确，便于管理，但不适于大 规模生产。
通间式-规模化实验室，一般设计成大的通间 ，试验操作的各个环节在同一房间内按程序完成 。便于程序化操作与管理，减少各环节间的衔接 时间，提高工作效率。还便于培养基配制、分装 和灭菌的自动化操作程序设计，减少规模化生产 的人工劳动，更便于无菌条件的控制和标准化操 作体系的建立。
9、天平
植物组织培养实验室需要不同精度的天平。 感量0.001g的天平（分析天平）和感量0.0001g 的天平（电子天平）用于称量微量元素和一些 较高精确度的实验用品。 感量0.01g和0.1g的天平，用于大量元素母液配 制和一些用量较大的药品的称量。 陈列于 中

10、高压灭菌锅 用于培养基、玻璃器皿以及其它可高温灭菌用品 的灭菌，根据规模大小有手提式、立式、卧式等不 同规格。
思考题 1、植物组织培养实验室包括哪些部分？ 2、植物组织培养实验室的常规设备有哪些？ 3、简述无菌操作设备的类型及作用？
实践二 洗涤技术
一、内容 1．新器皿洗涤 新玻璃器皿，无论是软玻璃或硬玻璃， 都有游离的碱性物质，会影响组培试验结果，使用前必 须洗涤。 2．使用过的一般器皿如试管、烧杯、三角瓶等的洗 涤。洗好后的瓶子应透明锃亮，内外壁水膜均一，不挂 水珠。 3．使用过的量器如移液管、容量瓶、滴管及载玻片、 盖玻片等的洗涤 二、材料准备 各种培养瓶、移液管、洗衣粉、洗液、周转箱、瓶刷、 洗涤池、蒸馏水等。
实验室设置的基本原则是：科学、高效、经济和
实用。一个植物组织培养实验室必须满足3个基本的
需要：实验准备（培养基制备、器皿洗涤、培养基
和培养器皿灭菌）、无菌操作和控制培养。此外，
还可根据所从事的实验要求来考虑辅助实验室及其 各种附加设施，使实验室更加完善。
2、标准组织培养室组成
组培实验室
准 备 室
案例1：实验室平面设计
培养室
培养室
走廊
培养室
门 厅
接种室 灭菌室 洗涤室 准备室
案例2：实验室构成
准备室 灭菌室 走 洗涤室 廊 驯化室
观察室 培养室
接种室
培养室
1、准备室
功能：又叫化学实验室，进行一切与实验有关的 准备工作：器皿洗涤、完成所使用的各种药品的贮备 、称量、溶解、配制、培养材料的预处理等。 要求：最好有20平方米左右。要求宽敞明亮、以 便于放置多个实验台和相关设备，方便多人同时工作 ；同时要求通风条件好，便于气体交换；实验室地面 应便于清洁，并应进行防滑处理。 设备：准备室应具备工作台、天平，柜橱、水池、 仪器、蒸馏水器，磁力搅拌器，冰箱等。
• 三角瓶：50、100、250、500ml或用250ml罐头瓶代 替。 • 培养皿：6、9、12cm • 试管：18×180mm或20×200mm • 量筒：10、50、100、500、1000ml 烧杯：50、100、200、500、1000ml 容量瓶：100、200、500、1000ml 试剂瓶（棕色）：50、100、250、500、1000ml 移液管：0.2、0.5、1.0、2、5、10ml
16、摇床 进行液体培养时，为改善通气状况，可用振荡培 养箱或摇床。 17、生物反应器
进行植物细胞生产次生产物的实验室，还需生物 反应器。
其他设备
可安装时间程序控制器、温度控制系统或空调 ；实体显微镜、倒置式生物显微镜及配套的摄影、 录像和图像处理设备；电泳仪、萃取和层析设备、 紫外分光光度计、高效液相色谱仪、气相色谱仪、 酶联免疫测定系统。
三、玻璃器皿和用具
1、培养容器
包括各种规格的培养皿、三角瓶、试管、培养瓶 。一般分为：
玻璃容器—一般用无色并不产生颜色折射的硼硅 酸盐玻璃材质。
1.耐腐蚀；耐高温、高压； 2.透明度好； 3.便于接种。
塑料容器—材质轻、不易破碎、制作方便，广泛使 用。一般为聚丙烯、聚碳酸酯材料的培养容器。
玻璃器皿的规格：

4、加热器
用于培养基的配制。研究性实验室一般选用带磁 力搅拌功能的加热器，规模化大型实验室用大功率加 热和电动搅拌系统。
5、其它 纯水器、分装设备
6、超净工作台


其操作台面是半开放区，具 方便、操作舒适优点，通过 过滤的空气连续不断吹出， 大于0.03um直径的微生物很 难在工作台的操作空间停留， 保持了较好的无菌环境。由 于过滤器吸附微生物，使用 一段时间后过滤网易堵塞， 因此应定期更换。 陈列于 中 类型：垂直式和水平式 作用：无菌操作用
11、干热消毒柜 用于金属工具如镊子、剪刀、解剖刀，以及玻璃器皿 的灭菌。一般选用200℃左右的普通或远红外消毒柜。
12、过滤灭菌器 用于一些酶制剂、激素以及某些维生素等不能 高压灭菌试剂的灭菌，主要有真空抽滤式和注射器 式。
13、紫外灯 方便经济的控制无菌环境的装置，缓冲间、接种 室和培养室必备。
①
③
②
作业： 植物组织培养基本实验室包括哪些组 成?各有何功能与要求？
二、仪器和设备
１、烘箱 陈列于洗涤室
作用：干燥洗后的器皿



高温干热灭菌 测定培养物的干重 气浴
２、冰箱
各种维生素和激素类药品以及培养基母 液均需低温保存，某些试验还需植物材 料进行低温处理，普通冰箱即可。 陈列于 中
缓冲间
功能：是进入无菌室前的一个缓冲场地，减少人体 从外界带入的尘埃等污染物。工作人员在此换上工作 服、拖鞋，戴上口罩，才能进入无菌室和培养室。
要求：可建在准备室外（ 需3-5平方米） 或无菌操作 室外（面积1平方米为宜），应保持清洁无菌；备有鞋 架和衣帽挂钩，并有清洁的实验用拖鞋、已灭菌过的 工作服；墙顶用1-2盏紫外灯定时照射，对衣物进行灭 菌。 设备：1-2盏紫外灯、灭菌后的工作服、拖鞋、口 罩。
刻度移液管
在配制培养基时，生长调节物质和微量元
素等溶液，用量很少，只有用相应刻度的
移液管才能准确量取。同时，不同种类的
生长调节物质，不能混淆，这就要求专管
专用。常用的移液管容量有0.1ml、0.2ml
、0.5ml、2ml 、5ml、10ml等。
2、金属用具
1）镊子类：接种、转移 材料或分离茎尖用，以 100ml三角瓶为培养瓶， 可用20cm长。
三、方法与措施 1.新玻璃器皿先用1%的Hcl溶液浸泡一昼夜，然后 再按一般使用过的玻璃器皿进行洗涤。 2.使用过的培养器皿洗涤方法是先将器皿中的残渣 废液除去，用清水冲洗净。再用浓洗衣粉水浸泡 15～30min，然后用瓶刷沿瓶壁上下刷动和呈圆周旋 转两个方向刷洗，瓶外也要刷到，不要留下未刷到 之处，最后用流水冲洗3～4次，以彻底冲去洗衣粉 残留物。 3 .用过的移液管、载玻片、盖玻片先放到铬酸洗 液中浸泡2h以上，取出后经流水冲洗0.5h左右，再用 蒸馏水冲洗一次，放入干燥箱内烘干或晾干。室（接种室）
要求：接种室要求干爽安静，清洁明亮。接种室 宜小不宜大，一般10～20平米，要求地面、天花 板及四壁尽可能密闭光滑，易于清洁和消毒，地 面及内墙壁都应采用防水和耐腐蚀材料，室内物 品越少越好。配置拉动门，以减少开关门时的空 气扰动；室外设有缓冲间。 功能：主要用于植物材料的消毒、接种、培养物 的转移、试管苗的继代以及一切需要进行无菌操 作的技术程序。 主要设备：紫外光源、超净工作台、消毒器、酒 精灯、接种器械（接种镊子、剪刀、解剖刀、接 种针）、紫外线灭菌灯、空调等。
5、培养室（区）
功能：对接种到培养瓶等器皿中的植物离体材料进行控制条件 下的培养，无论是研究性实验室还是生产性实验材料进行培养的 场所。
要求：约需10-20平方米左右。基本要求是能够控制光照和温 度，并保持相对的无菌环境，因此，培养室应保持清洁和适度干 燥；为满足植物培养材料生长对气体的需要，还应安装排风窗和 换气扇等培养室的换气装置；为节省能源和空间，应配置适宜的 培养架，并安装日光灯照明。 主要设备：培养架（控温控光控湿）、温湿度计、摇床、培 养箱、光源、除湿机、换气扇、紫外光源等。
2）剪刀类：医用剪刀，剪 切割外植体或继代培养时分 离材料。
3）解剖刀：切割芽、茎段、 愈伤组织等，继代时分离 材料，也可用于微小外植 体的接种等。 4）解剖针：转移细胞或愈 伤组织，微茎尖分离及接 种等。
5）其它：周转筐 搪瓷盘
移液管架 、玻璃棒、酒精 灯、试管架等。
3、塑料用具
各种封口膜、盖、塑料盘及其它实验用具。
7、酸度计
用于测定培养基及其它溶液的pH，一般要求 可测定pH范围1-14之间，精度0.01即可。

陈列于
中
PHS-802中文台式酸度计
通用型或经济型酸度计
8、显微镜

陈列于观察室中
类型： 倒置显微镜 普通显微镜 荧光显微镜 解剖显微镜
原生质体观察 染色体和叶片气孔观察 细胞活力观察 立体观察