实验五白细胞分类计数
07.03.2021
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结果记录方式:
Ne 正 一 Ly 正 Mo 正 Eo 正 Ba 正
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体尾交界处
理理想想区区域域
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细胞重叠
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细胞太稀
各类成熟白细胞的形态学:
中性粒细胞(Ne):在瑞氏染色血涂片上呈
圆形,直径10~13µm,胞浆染粉红色,核形一 叶(杆状核)至五叶不等,以三叶者多见,染成 深紫红色,胞浆中有许多细小均匀紫红色颗粒。
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淋巴细胞(Ly):胞体呈圆形,直径介于
6~15µm之间,在成人血涂片中以小淋巴细胞 为多见,直径6~9µm,核大呈深紫色致密而 浓染,胞浆量极少;大淋巴细胞胞浆量较多, 呈清澈的淡蓝色,可见少量嗜苯胺蓝颗粒,胞 核圆或椭圆,常偏向细胞一侧,染色较深。
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性染料伊红结合而染成红色,呈嗜酸性。 • 细胞核的核蛋白为酸性物质,故与碱性染料美
兰结合,染成深蓝色或深紫红色,呈嗜碱性。 • 中性颗粒与美兰和伊红同时结合而染为淡紫红
色,呈嗜中性。
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[器材]
• 光学显微镜
• 推片,载玻片
[试剂]
• Wright染液
Wright
1.0g
Ly
20%~40%
Mo
3%~8%
Eo
0.5%~5%
Ba
0%~1%
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[注意事项]
1.血涂片制备要厚薄适宜、均匀、头体尾分 明,无溶血、无空洞。
2.很多因素影响涂片时血膜的厚度。血滴大、 血粘度高、推片角度大、速度快则血膜厚, 反之则血膜薄。
3.按一定顺序,有秩序地连续进行,避免选 择视野。
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血涂片制作
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羽 状 尾 部
良好血涂片外观
-羽(子弹头)状尾部
-周边有空白
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-无划痕 精品课件
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不 良 血 涂 片
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2.瑞氏染色操作
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3.白细胞分类:
低倍镜下所见
先用低倍镜选择厚薄适宜,染色 良好,细胞分布均匀的体尾交界 处,滴加香柏油一滴,油镜下分 类计数。分类时要有秩序的连续 进行,避免主观选择视野。通常 分类计数100个白细胞,计算并 报告各种白细胞所占比例。
4.分类计数时应同时报告RBC和WBC的形态
07.03是.2021否有异常。退化细精胞品课不件 计数。
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RBC异常
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21Biblioteka 中性粒细胞血小板嗜酸性粒细胞
淋巴细胞
嗜碱性粒细胞(右)
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单核细胞 22
实验报告(注意学号)
1原理
2方法
3各类细胞百分比报告
❖ 2)加染液:在涂片上滴加瑞氏染液数滴,以染液 覆盖整个血膜为度,稍静置1min。
❖ 3)加缓冲液:滴加缓冲液等量或多些,与上述染 液充分混匀。
❖ 4)染色:染色10min.
❖ 5)冲洗:不要先倒掉染液,平持血涂片用流水缓 缓冲洗干净。
❖ 6)干燥:直立血涂片,使其自然干燥。
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单核细胞(Mo):在瑞氏染色涂片上为12~
20µm,胞体圆形、椭圆形或不规则形;核形多 种多样,最重要的特点是染色质较细致疏松,呈 丝网状或条缕状,着色较淡胞浆较多,淡兰色,
含大量细小尘土样颗粒。
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[参考值]
正常成人外周血白细胞分类参考值:
Ne
50%~70%
4讨论
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瑞氏染色原理:
• 瑞氏染料溶于甲醇,离解为带正电的碱性美兰 (M+)和带负电的酸性伊红(E-)离子。细胞的 染色既有物理的吸附作用,又有化学的亲和作用。 各种细胞成分的化学性质不同,对染料的亲和力 也不一样,故可呈不同的着色特点。
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染色原理: • 血红蛋白、嗜酸性颗粒均为碱性物质,故与酸
甲醇
600ml
• 磷酸盐缓冲液(PH6.4~6.8)
• 香柏油
[标本来源]
•
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EDTA-K2抗凝全血精品课件
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[操作]
1.制备血涂片 ❖1)推片:血膜厚薄适中,边缘整齐,
外观呈舌形,头、体、尾分明。 ❖2)干燥 ❖3)标记
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2.染色
❖ 1)准备:血膜干透后,用蜡笔在两端划线,以防 止染色时染液外溢。将血涂片放染色架上。
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嗜酸性粒细胞(Eo):较中性粒细胞稍大,胞 核多为两叶,呈眼镜、八字形,核染色质粗糙 染深紫红色,胞浆内充满粗大均匀的嗜酸性颗 粒,瑞氏染色时呈桔红色,有折光性。
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嗜碱性粒细胞(Ba):胞浆中含有大小不等
的嗜碱性颗粒,瑞氏染色时呈兰黑色。于光学显 微镜下常见胞浆中有小空泡,乃因嗜碱性颗粒易 溶于水或因功能活动而脱颗粒所致;核呈淡紫红 色常看不清,呈杆状或分叶状。
实验二
白细胞分类计数
(differention count of leukocyte)
谢海啸
07.03.2021
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一、白细胞分类计数
白细胞分类计数是将血液制备成涂片,
瑞氏染色后显微镜下根据白细胞的形
态特征进行分类计数。通常分类100
个白细胞,计算得出各种白细胞所占
百分比。
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