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三、注意事项
Nissl染色液的染色能力很强，并且染色 后很难去除，请注意勿使染色液沾染皮肤和衣 物等。
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四、思考题
除了尼氏染色法以外，你知道还有哪些方 法可以对神经元进行特殊的染色，并详述其原 理和步骤。
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感谢您的欣赏！
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尼氏染色法的优势何在？
以往显示神经元中尼氏体多采用苏木精-伊红染色方法,此 法虽然也能观察到胞质中嗜碱性颗粒,但结构不甚清晰,胞 核、核仁、尼氏体颗粒模糊,分界不清,轴突、树突难以辨 认。
在尼氏染色中尼氏体清晰可辨,核、核仁也非常清晰,而且 很容易区分轴突和树突,收到了既可辨认器官又可同时观 察细胞质特殊结构的效果。
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7、切片用蒸馏水冲洗3次； 8、切片依次浸入75%、80%、95%的酒精中，每次约1min； 9、切片入特殊分色液中分色，约15s； 10、切片浸入100%酒精I，II，各1min； 11、切片浸入二甲苯I，II中透明，各5min； 12、中性树胶封片。 13、显微镜下观察照相并对尼氏染色阳性神经元进行计数。
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二、实验步骤
1、昆明小鼠以0.48%的戊巴比妥钠0.02ml/g腹腔注射麻醉， 待其麻醉后，迅速用手术剪刀及镊子剪开肚皮使其心脏 暴露，将针头从右心房插入，并用动脉夹夹住，剪破静 脉窦。
2、灌流和固定：先用生理盐水灌注（约30min），待小鼠 肝脏变白后，再换成4%多聚甲醛灌流，直到小鼠肝脏变 硬，尾巴僵硬为止（约2h）。
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尼氏染色中尼氏体受染后呈块状(形如虎斑) 或颗粒状,核周围尼氏体颗粒较大,近边缘 处较小而细长。在电镜下观察，尼氏体主 要由平行排列的粗面内质网和核糖体组成。
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尼氏体的功能是什么？
尼氏体的主要功能是合成蛋白质， 作为神经活动时所需，如细胞中 的某些成分的更新以及产生神经 递质有关的蛋白质和酶类。轴突 端的蛋白质大都来自胞体的尼氏 体。神经元在兴奋传导过程中， 不断消耗某些蛋白质物质，尼氏 体可合成新的蛋白质以补充这种 消耗。
3、待充分固定后，剪下小鼠头部并开颅取脑，再浸入4% 多聚甲醛1d。
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4、将脑组织用502胶水固定，在振荡切片机上切片， 厚度为25μm。
5、将切好的脑片浸于0.5%的明胶中，用毛刷将脑片贴 到预先用明胶处理的载玻片上，然后自然风干。
6、切片染色：将脑片置于0.5%甲苯胺蓝（母液：甲苯 胺蓝1g，无水乙醇100ml。使用时按1:1比例与新 鲜的0.1%NaCl溶液混合成工作液）或焦油紫（焦 油紫0.1g；蒸馏水99ml；1%冰醋酸1ml）中室温下 染色30min；
在生理情况下, Nissl小体大而数 量多，说明神经细胞合成蛋白质 的功能较强；相反在神经细胞受 到损伤时，Nissl小体的数量会减 少甚至消失。
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用于尼氏染色的常用染料有：焦油紫（cresyl violet）、硫堇（thionine）和甲苯胺蓝 (toluidine blue)。