3
1.3 阳性血培养的临床意义
经验治疗
A I A A I
A
I I
培养后
A A I A I I A I
药敏后 T
A
A
A I A I I I
相关死亡率 (%)
10.5 13.3 20.0 20.0 25.8 28.6 0.0 (2) 33.3
相关风险
1.0 1.27 1.91 1.91 2.46 2.73 0.05 3.18
集。 （儿童采血量少，更应注意颠倒混匀）
医院常用血培养瓶
树
含
脂
溶
需
血
氧
素
瓶
厌
氧
瓶
树
分
脂
枝
儿
杆
童
菌
瓶
瓶
及
真
菌
瓶
采集标本前：于室温保存，切勿冷冻。如冷藏需恢复至室温使 用。
采集标本后：尽快送微生物室，如无法及时送检，应置于室温，
不能置于冰箱或温箱，以免影响检出。
结论：
只要怀疑血流感染，应做血培养(发热要做血培养)
血培养临床实践指南
CLSI Principles and Procedures
for Blood Culture; Approved Guideline (M47-P,2006)
美国【临床实验室标准化协会】
血培养的关键要点
采血指征 采血时机 采血套数 接种血量 消毒灭菌
问题： 血培养的指征是什么?
中华医学会检验医学分会建议一般患者 出现以下一种体征时可作为采血的重要指征
⑴发热( ≥38 ℃) 或低温( ≤36 ℃)
⑵寒战
⑶白细胞增多(计数大于10.0 ×109/ L ,特别有“核左
移”时)
⑷皮肤黏膜出血
⑸昏迷 ⑹多器官衰竭
发热要做血培养！
⑺血压降低
⑻C 反应蛋白,PCT，SAA升高
⑼血液病患者出现粒细胞减少，血小板减少等
2－3套血培养，有助于污染的判断。
Tokars, JI. Clin Infect Dis 2004; 39:333
问题： 为什么要做厌氧培养？
厌氧培养的研究分析
根据文献，厌氧瓶除了检出厌氧菌，另外对葡萄 球菌，肠杆菌科细菌以及苛养菌的检测有优势
资料显示：16%的链球菌和17%的肠杆菌科细菌血 培养时仅厌氧瓶报告阳性1
怀疑血流感染时应常规行血培养
摘自：《血培养检测规范化操作》，主编：徐英春、倪语星、王金良，上海科学技术出版社
怀疑血流感染，何时采血最佳？
体温
寒战 血培养
菌血症的水平
0
30
60
0
时间 (3分0 钟)
60
体温与细菌浓度并不完全同步
怀疑血流感染，何时采血最佳？ 答 案：
• 寒战时，体温高峰前采集最好。但是错过了没关 系
90%阳性标本可在12小时内被检测，36小时内可检测出 99%的阳性标本。
与孵育7天相比，只有0.3%有临床意义的阳性血培养在5 天内不能被检出。设定5天为孵育周期是最具有性价比 的。
Huang, et al., European Journal of Clinical Microbiology 17: 637. 1998 (Cockerill, et al. CID 2004)
65％
1套
Cockerill, CID 2004
80％ 2套
96％ 3套
99％ 4套
血培养套数
表皮葡萄球菌的临床意义
阳性套数 采集套数
1
1
1
2
2
2
1
3
2
3
3
3
临床意义 ％
0 2 60 0 75 100
污染可能 无法确认
％
％
97
3
95
3
3 37
100
0
0 25
0
0
采集1套无法判 断是病原菌还 是污染菌。
问题： 应该采集多少血液?
采血量与检出率的关系
100 90 80 70 60
检出率％ 50
40 30 20 10
0 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60
ml
每增加1毫升，成年人真性菌血症阳性检出率增加3％
要采集少血液? 答 案：
采血量是影响灵敏度最关键因素 成人一份标本2个培养瓶（需氧＋厌氧），每瓶8－10ml，共
75%乙醇擦拭静脉穿刺部位，等待30秒
1-2% 碘酊30秒或10%碘伏消毒60秒 ，从穿刺点向外画圈消毒,直径1.52cm.
用75%乙醇消毒 60秒（脱碘），待 酒精挥发干燥后采血.
注意：对于碘过敏的患者，只能使用 75％乙醇消毒60秒，待酒精挥发干 燥后采血.
细菌是干死的，不是淹死的
• 其他皮肤消毒方法
厌氧瓶平均报阳时间快于需氧瓶
62套血培养大肠埃希菌培养瓶分析
厌氧瓶先报警
53
需氧瓶先报警
9
0
20
40
60
厌氧瓶平均报阳时间 需氧瓶平均报阳时间
35
30
小时
25
20
15
10
5
0
大肠埃希菌 肺炎克雷伯菌 肠球菌
葡萄球菌
厌氧培养的意义
提高厌氧菌感染患者的诊断率 提高临床常见兼性厌氧菌的检出率 早期报告时间 保证了足够的采血量
标本（Ⅱ级）。 • 但对怀疑血管内的感染，则应该间隔一段时间取不同部位的静脉穿刺
抽血，有助于诊断持续性菌血症（Ⅱ级）。 • 成人：任何时候，绝对不能只送一瓶！
Crit Care Med 2008 Vol. 36, No. 42；0 CLSI指南；英国指南
血培养套数与阳性检出率（％）
100 90 80 70 60 50 40 30 20 10 0
20ml；要求至少采两份标本，即40ml。 儿童一般只需采集儿童需氧瓶，在保证采集血量＜1％总血量
下，一般为1－3ml 采血量不足时应优先保证需氧瓶，因临床90％以上的感染为需
氧菌或兼性需氧菌感染
利用瓶身 刻度准确 采血
BD BACTEC 每个瓶 都清晰显示最佳采血量
血培养孵育时间
CLSI推荐全自动系统只需孵育5天
重视血流感染 规范送检血培养标本
BD临床诊断部门
宋伟
2018.3.14
2015年标本培养状况
江苏省人民医院 香港玛丽医院
培养标本25746份 12% 培养标本276215份 14.5%
血培养重要吗？
血培养是血流感染检测中最有价值的诊断工具 阳性血培养能确定血流感染中的病原体 抗菌药物敏感试验，指导抗菌药物治疗
洗必泰使用方法： 葡萄糖酸洗必泰作用30 秒，但不适用于2个月以内的 新生儿。
安尔碘使用方法：
原液均匀涂擦二遍，或用原液直接喷于消毒部位二 次。作用1-2分钟。（参照厂家说明书）
细菌是干死的，不是淹死的
培养瓶的消毒程序：
1. 去掉培养瓶口的塑料瓶盖。 2. 75%酒精消毒血培养瓶橡皮塞子60秒。 3. 自然待干。 4. 将标本注入培养瓶内。 5. 颠倒混匀标本与肉汤，以避免血液凝
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指南中强调：血培养至少送2套4瓶
• 在发热开始的24 h内进行血培养。 • 尽力保证在抗感染治疗前获得首份血培养标本。 • 同时经2个独立部位抽取血标本，此结果比单一部位的血培养更有临床
意义。除外新生儿外，不建议只进行单套血培养（Ⅱ级）。 • 48-96 h后评估治疗效果，再次血培养不能单取1套，必须同时抽取2套
• 体温峰值采血，并不显著增加阳性率
J Clin Microbiol. 2008;46(4):1381-5. Ann Oncol. 2007， 18(11):1870-4.Pediatr Rep. 2011，3(1):e4.
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问题： 应该采几套血液标本?
血培养：“一套”或“一份”的定义
“一次静脉穿刺 + 2个血培养瓶”= “一套或一份血培养”
判断感染性疾病的类型
评价疗效及预后
正确采取感染控制措施 • 是否隔离 • 减少院内感染
血培养是诊断血 流感染的金标准
国内血培养现状
—阳性检出率低10%（国外约为15％）
原因何在？
血流中含菌量低 血液中抗菌物质 抗生素的应用
血培养的临床实践 欠规范！！
培养条件限制
二、血培养的规范实践
问题： 如何进行消毒与标本采集？
护理老师们，您知道您有多重要！
血培养的采集：无菌操作
血培养对无菌操作的要求比注射、采集生化、 凝血等其它标本要高。
所以要最先采集血培养标本。 污染率的指标是 < 3%
（100份标本里只能有不到3个标本出现污染）
细菌是干死的，不是淹死的
皮肤消毒程序（三步法）：
床科室！
一、血培养概念与意义
1.1 血培养概念
采集患者的血液或无菌体液标本,送至微生物实验室 培养检测.
检测原本无菌的血液及体液中是否有细菌存在. 如有细菌,则极有可能为致病的细菌. 进一步进行鉴定/药敏试验.
1.2 血培养检测的意义
根据培养结果：
选择正确的抗感染治疗方案 或调整经验治疗方案
阳性血培养能显著改善治疗而降低死亡率
• A = Appropriate Therapy（正确治疗） • I = Inappropriate Therapy（不正确治疗） • Clin Infec Dis 24:584-602, 1997
共同优化血培养的流程
医生
护士
检验科
沟通--有效的连接检验科微生物室与临
Khanna等2对7072份同时做需氧瓶和厌氧瓶的血培 养结果分析显示: