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如何去除内毒素

3.2.1原本法用于去除实验用玻璃器皿上的内毒素。

将玻璃器皿置于烤箱中,加热到250℃,持续30min,即可去除内毒素。

3.2.2方法与步骤1、内毒素去除效率的评估(1)制备浓度分别为1000和1000EU/mL 的CSE溶液。

按内毒素测量方法检测这些溶液。

(2)向所有待去除内毒素的玻璃器皿滴入1mL的CSE溶液。

(每种类型的玻璃器皿至少有3EU的CSE)。

(3)将玻璃器皿置放烤箱中,在60℃下,干烤持续30min,烘干,然后在烤箱中,250℃下,干烤30min。

(4)加入适量的LAL水,剧烈振荡5min,以清洗玻璃器皿,然后测量清洗后的LAL水中的内毒素的浓度。

(5)比较原来的内毒素含量和现存的内毒素浓度。

当内毒素含量至少减少了3—log时,该方法有效。

必要时,重复操作,去除内毒素。

用鲎度验法计算内毒素去除的百分比。

2、去除实验玻璃器皿上的内毒素确定可使内毒素玻璃器皿上的内毒素对于用来配置无同一内毒素溶液的玻璃器皿,重复操作,直至内毒素含量下降3—log。

(例如,1000 IEU和10000 10EU)数个加热循环后,用前述的鲎试验法,测定内毒素含量。

3、对照阴性对照:用只盛有LAL水的玻璃器皿,在250℃下,干烤30min并用LAL法测量内毒素的含量。

阳性对照:干燥(60℃,30min)每种玻璃器皿中的内毒素溶液,不经过干烤(250℃,30min)去内毒素的操作,然后测定其内毒素质量。

3.2.3质控与提示(1)保烤箱散热均匀,为此,在操作过程中,可将玻璃器皿放置在烤箱中的每一层上,当温度在250℃后,温度的波动不要超过±15℃。

(2)用含100EU的内毒素过行的检测,可用来确定去内毒素的效率。

用含10000EU的内毒素进行的检测,可用来确定对内毒素含量较高的器皿去除内毒素的效率。

(3)如果如果不理想,可增加每一次操作的时间和操作次数。

(4)其他技术适用于培养基的内毒素,例如,超滤,反向渗透,但比较昂贵。

选取有效的滤过膜,确保去内毒素后,培养基的营养成分不丢失并且内毒素含量下降3—log。

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