(10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请号 201510320760.5(22)申请日 2015.06.11C12N 1/20(2006.01)C12R 1/125(2006.01)(71)申请人山东西王糖业有限公司地址256209 山东省滨州市邹平县韩店镇驻地西王工业园电厂路南侧(72)发明人王棣 王居亮 李伟 杨荣玉唐海静 夏颖颖(74)专利代理机构济南舜源专利事务所有限公司 37205代理人宋玉霞(54)发明名称一种用玉米粗蛋白粉生产枯草芽孢杆菌微生态制剂的方法(57)摘要本发明提供一种以玉米淀粉生产过程中的副产品玉米粗蛋白粉为原料生产枯草芽孢杆菌微生态制剂的生产方法，采用本方法在不添加其它碳源和氮源的条件下，单纯以玉米粗蛋白粉为营养源经过固态培养可以生产出活菌数为3000亿-5000亿/g 的枯草芽孢杆菌微生态制剂。
生产过程不需要通压缩空气，不产生任何废水废气。
减少了枯草芽孢杆菌微生态制剂的生产成本。
且所得产品以玉米纤维低聚糖为载体具有益生元的功能提高了产品质量。
(51)Int.Cl.(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请权利要求书1页 说明书4页(10)申请公布号CN 104988088 A (43)申请公布日2015.10.21C N 104988088A1.一种用玉米粗蛋白粉生产枯草芽孢杆菌微生态制剂的方法，步骤如下：(1)取玉米粗蛋白粉移入固体发酵罐中，加水调到料水比为1：0.7-0.9，加氧化钙调pH 到6.0-7.0；(2)打开循环水使固体发酵罐温度上升到80-90℃后，通入蒸汽消毒30分钟；(3)待原料冷却到40℃-44℃后，加入物料干基重量1/9-1/10培养15h以后的种子液，固含量为5％；(4)维持30-40℃培养50-60h，24h后每隔6h搅拌一次物料；(5)培养到50-60h后，物料明显粘湿，有较浓的枯草芽孢杆菌特有气味，升温到44-56℃继续培养12-22h；(6)共计培养72h后移出物料，65-80℃烘干物料；(7)烘干物料水份到小于6％后，粉碎物料；(8)将粉碎的物料进行包装，取样检测产品质量。
2.根据权利要求1所述的用玉米粗蛋白粉生产枯草芽孢杆菌微生态制剂的方法，其特征在于，所述的步骤(1)中，料水比是指：物料干基质量即无水的物料质量。
3.根据权利要求1所述的用玉米粗蛋白粉生产枯草芽孢杆菌微生态制剂的方法，其特征在于，所述的种子液为将枯草芽孢杆菌菌种在液体培养基中通气搅拌培养15小时以后的液体培养基和菌种的混合物，所述的液体培养基为：葡萄糖5％w/w，玉米浆10％w/w,硫酸镁0.03％w/w,碳酸钙调pH到7.0，其余为黄河水，所述的玉米浆干基含量为26％。
4.根据权利要求1所述的用玉米粗蛋白粉生产枯草芽孢杆菌微生态制剂的方法，其特征在于，所述的步骤(4)中，维持温度为33-38℃。
5.根据权利要求1所述的用玉米粗蛋白粉生产枯草芽孢杆菌微生态制剂的方法，其特征在于，所述的步骤(5)中，升温到45-50℃。
6.根据权利要求1所述的用玉米粗蛋白粉生产枯草芽孢杆菌微生态制剂的方法，其特征在于，所述的步骤(4)(5)中，发酵过程罐体与空气相通，有空气过滤器装置过滤掉空气中的杂菌。
7.根据权利要求1所述的用玉米粗蛋白粉生产枯草芽孢杆菌微生态制剂的方法，其特征在于，得到的枯草芽孢杆菌微生态制剂，活菌数3000-5000亿/g。
8.根据权利要求1所述的用玉米粗蛋白粉生产枯草芽孢杆菌微生态制剂的方法，其特征在于，采用的玉米粗蛋白粉的情况见表1，表1 玉米粗蛋白粉指标蛋白质％脂肪％纤维质％淀粉％灰分％木质素％水份％玉米皮1125412 2.612粗蛋白10 2.41250 4.6—10胚芽粕1825314 2.3—。
一种用玉米粗蛋白粉生产枯草芽孢杆菌微生态制剂的方法技术领域[0001] 本发明属于枯草芽孢杆菌微生态制剂制备的技术领域，尤其涉及以玉米淀粉副产品玉米粗蛋白粉为原料生产枯草芽孢杆菌微生态制剂的方法。
背景技术[0002] 畜牧业生产是人类动物蛋白、皮革和有机肥料等畜产品的重要来源，随着世界人口持续增长的压力和人类生活水平的不断提高，需求量也不断增加，要求必须不断提高动物生产水平。
然而，随着畜牧业的发展，养殖量的不断增加，也带来了一系列问题，如由于滥用抗生素药物，造成畜禽抗病力减弱，肉、蛋、奶品质下降，饲养成本上升，畜禽粪便造成严重的环境污染。
但在现代社会，人们对动物性食品质量要求越来越高，除了要价格便宜，还必须健康、安全，并尽可能是纯天然、无污染食品。
消费者对使用动物饲料添加剂表现出越来越多的忧虑，使得一些可能带来潜在危害作用的动物饲料添加剂在动物日粮中被禁用。
[0003] 益生菌能促进畜禽生长、提高饲料转化率、防止肠道感染、降低死亡率、改善产品品质和减少有害气体的产生,目前益生菌主要有乳球菌、芽孢杆菌等。
[0004] 目前已有很多企业把枯草芽孢杆菌制成微生态饲料添加剂用于畜牧业。
[0005] 枯草芽孢杆菌(bacillus subtilis)也称枯草杆菌,是一类需氧型、内生孢子的杆状革兰氏阳性菌，是芽孢杆菌中应用较为广泛的菌种之一，该菌可通过调节动物胃肠道菌群平衡，增强机体的免疫功能，提高动物的生产性能。
[0006] 枯草芽孢杆菌最适生长温度约为37℃，但也能在80℃的温度下存活，具有良好的耐高温、耐酸性和耐胆盐能力；适应环境能力很强，即使在极端环境下，也可诱导产生抗逆性很强的内源孢子。
该菌自身没有致病性，只具有单层细胞外膜，可以分泌淀粉酶、蛋白酶、脂肪酶、纤维素酶等酶类；枯草芽孢杆菌是我国农业部公布的可直接饲喂动物且允许使用的益生菌菌种之一。
[0007] 关于利用玉米淀粉副产品玉米粗蛋白粉为原料生产枯草芽孢杆菌微生态制剂的方法未见报道。
发明内容[0008] 本发明的目的在于提供一种以玉米淀粉生产过程中的副产品玉米粗蛋白粉为原料生产枯草芽孢杆菌微生态制剂的生产方法，采用本方法在不添加其它碳源和氮源的条件下，单纯以玉米粗蛋白粉为营养源经过固态培养可以生产出活菌数为3000亿-5000亿/g 的枯草芽孢杆菌微生态制剂。
生产过程不需要通压缩空气，不产生任何废水废气。
减少了枯草芽孢杆菌微生态制剂的生产成本。
且所得产品以玉米纤维低聚糖为载体具有益生元的功能提高了产品质量。
[0009] 本发明的技术方案为：[0010] 一种用玉米粗蛋白粉生产枯草芽孢杆菌微生态制剂的方法，步骤如下：[0011] (1)取玉米粗蛋白粉移入固体发酵罐中，加水调到料水比为1：0.7-0.9，加氧化钙调pH到6.0-7.0；[0012] (2)打开循环水使固体发酵罐温度上升到80-90℃后，通入蒸汽消毒30分钟；[0013] (3)待原料冷却到40℃-44℃后，加入物料干基重量1/9-1/10培养15h以后的种子液，固含量为5％；[0014] (4)维持30-40℃培养50-60h，24h后每隔6h搅拌一次物料；[0015] (5)培养到50-60h后，物料明显粘湿，有较浓的枯草芽孢杆菌特有气味，升温到44-56℃继续培养12-22h；[0016] (6)共计培养72h后移出物料，65-80℃烘干物料；[0017] (7)烘干物料水份到小于6％后，粉碎物料；[0018] (8)将粉碎的物料进行包装，取样检测产品质量。
[0019] 料水比是指：物料干基质量即无水的物料质量。
[0020] 所述的种子液为将枯草芽孢杆菌菌种在液体培养基中通气搅拌培养15小时以后的液体培养基和菌种的混合物，所述的液体培养基为：葡萄糖5％w/w，玉米浆10％w/w,硫酸镁0.03％w/w,碳酸钙调pH到7.0，其余为黄河水，所述的玉米浆干基含量为26％。
[0021] 所述的步骤(4)中，维持温度为33-38℃。
[0022] 所述的步骤(5)中，升温到45-50℃。
[0023] 所述的步骤(4)(5)中，发酵过程罐体与空气相通，有空气过滤器装置过滤掉空气中的杂菌。
[0024] 本发明得到的枯草芽孢杆菌微生态制剂，活菌数3000-5000亿/g。
[0025] 本发明中采用的玉米粗蛋白粉的基本情况详见表1。
[0026] 表1 玉米粗蛋白粉部分指标[0027]蛋白质％脂肪％纤维质％淀粉％灰分％木质素％水份％玉米皮1125412 2.612粗蛋白10 2.41250 4.6—10胚芽粕1825314 2.3—[0028] 本发明的有益效果为：[0029] 玉米粗蛋白粉的碳氮比情况比较适合枯草芽孢杆菌的生长要求，同时玉米粗蛋白粉中含有一定量的粗纤维或玉米皮，能够适应枯草芽孢杆菌的好气性要求。
通过发酵得到的产品以粗纤维被分解后的多糖为载体(一般生物态制剂的载体为硅藻土或蒙脱石等)，玉米纤维低聚糖是一种高活性生物材料，有利于改善肠道微环境，使本产品具有益生元和吸附毒素的功能提高了本产品的功能性。
[0030] 总之，本发明的以玉米淀粉生产过程中的副产品玉米粗蛋白粉为原料生产枯草芽孢杆菌微生态制剂的生产方法，采用本方法在不添加其它碳源和氮源的条件下，单纯以玉米粗蛋白粉为营养源经过固态培养可以生产出活菌数为3000亿-5000亿/g的枯草芽孢杆菌微生态制剂(一般产品只有200-2000亿/g)。
生产过程不需要通压缩空气，不产生任何废水废气。
减少了枯草芽孢杆菌微生态制剂的生产成本。
且所得产品以玉米纤维低聚糖为载体具有益生元的功能提高了产品质量。
具体实施方式[0031] 下面通过具体实施例对本发明的技术方案进行详细的说明，但并不理解为对本技术方案的限定。
[0032] 所述的液体培养基为：葡萄糖5％w/w，玉米浆10％w/w,硫酸镁0.03％w/w,碳酸钙调pH到7.0，其余为黄河水，所述的玉米浆干基含量为26％。
[0033] 本发明中采用的玉米粗蛋白粉的基本情况详见表1。
[0034] 表1 玉米粗蛋白粉部分指标[0035]蛋白质％脂肪％纤维质％淀粉％灰分％木质素％水份％玉米皮1125412 2.612粗蛋白10 2.41250 4.6—10胚芽粕1825314 2.3—[0036] 实施例1：[0037] 1、取35g玉米粗蛋白粉移入三角瓶中，加水调到料水比为1：0.8，加氧化钙调pH 到7.0。
[0038] 2、开循环水使罐温度上升到80-90℃后，通入蒸汽消毒30分钟。
[0039] 3、待原料冷却到40℃左右，加入物料干基重量1/10(w/w)量培养15h以后的种子液，固含量为5％。
[0040] 4、维持30-40℃培养50-60h，24h后每隔6h搅拌一次物料。
[0041] 5、培养到55h左右当物料明显粘湿，有较浓的枯草芽孢杆菌特有气味时，升温到44-56℃继续培养17h。