葛根中总黄酮提取工艺研究
摘要葛根中总黄酮含量相对同类产品较高，其利用价值也较高。
总黄酮具有治疗心脑血管疾病、抗癌、舒张平滑肌、改善血液流变学指标、解酒及低毒性等药理作用本文通过对葛根中总黄酮几种提取方法（超声辅助提取法、醇提取法、铅盐提取法和水提取法）的研究和比较，从而确定出一种较好的提取方法——醇提取法。
为提高原材料利用率，增加经济效益提供有用的数据。
关键词总黄酮；超声辅助提取法；醇提取法
葛根为豆科多年生落叶藤本植物葛的干燥根[1] , 属于卫生部公布的既是食品又是药品的物品[2] ,其主要有效成分为葛根素、大豆素、大豆苷等异黄酮类化合物, 具有治疗心脑血管疾病、抗癌、舒张平滑肌、改善血液流变学指标、解酒及低毒性等药理作用[3 ～5 ]。
总黄酮是指黄酮类化合物，是一大类天然产物，广泛存在于植物界，是许多中草药的有效成分。
在自然界中最常见的是黄酮和黄酮醇，其它包括双氢黄（醇）、异黄酮、双黄酮、黄烷醇、查尔酮、橙酮、花色苷及新黄酮类等。
黄酮参与了磷酸与花生四烯酸的代谢、蛋白质的磷酸化、钙离子的转移、自由基的清除、抗氧化活力的增强、氧化还原作用、螯合作用和基因的表达。
它们对健康的好处有：抗炎症、抗过敏、抑制细菌、抑制寄生虫、抑制病毒、防治肝病、防治血管疾病、防治血管栓塞、防治心与脑血管疾病、抗肿瘤、抗化学毒物等。
天然来源的生物黄酮分子量小，能被人体迅速吸收，能通过血脑屏障，能时入脂肪组织，进而体现出如下功能：消除疲劳、保护血管、防动脉硬化、扩张毛细血管、疏通微循环、活化大脑及其他脏器细胞的功能、抗脂肪氧化、抗衰老。
葛根总黄酮提取法有醇回流法、醇渗漉法、浸渍法、超声辅助萃取法等,但利用超声辅助提取中药有效成分具有生产周期短、效率高、设备简单、成本低的优点[6 ,7]。
本文主要介绍了超声提取法、醇提取法、铅盐提取法和水提取法，并对葛根中总黄酮的开发利用前景作出了一些说明。
1.超声辅助提取法
1.1工艺流程[8]
葛根→破碎→超声提取→过滤→减压浓缩→过柱→水洗脱→乙醇洗脱→减压浓缩→真空干燥→总黄酮提取物。
称取葛根干燥粗粉25 g ,按照表1 的试验设计加入溶剂,设定超声提取的时间、温度和超声处理次数进行提取。
提取完成后纱布过滤(多次超声提取时,合并滤液) ,然后常压滤纸过滤,减压浓缩至100 mL ,加入适量蒸馏水,加CaCl 2 1 g ,静置过夜,次日离心。
分别收集上清液,用氨水调p H 至7～8 ,过大孔吸附树脂, 蒸馏水洗去水溶性杂质, 然后用80 %乙醇洗脱, 分别收集洗脱液,减压浓缩,真空干燥,即得葛根总黄酮粗品。
1.2对该法的评价
对葛根总黄酮的提取率有直接影响的因素分别为乙醇浓度、乙醇用量、超声处理次数、提取时间、提取温度，各因素影响强弱顺序：乙醇浓度> 提取温度> 乙醇用量> 超声处理次数> 提取时间。
其中,乙醇浓度、提取温度、乙醇用量是决定浸出液浓度的主要因素,超声提取时间和处理次数是次要因素。
结果与理论相符,因超声处理只是一种辅助手段, 与经典的提取方法相比, 它可加快提取过程[6 , 7 ]。
用95 %乙醇比用水做溶剂提取率高.超声波法提取时间25 min ,温度5 ℃,提取率高. 连续提取1 ,2 ,3 次,提取率增加幅度较大;连续提取4 ,5 次,提取率虽然增加,但增加幅度很小,表明连续提取 3 次已基本将总黄酮从葛根中提取完毕.因此,超声波连续提取3 次即可[8]。
2.醇提法
2.1提取工艺流程[10]
工艺条件: 鲜葛根300g; 溶媒采用甲醇或95% 乙醇, 每次用量750m l, 回流2 次, 每次2h; 再用Ca (OH) 2 乳300m l 提取1 次; 减压浓缩控制温度≤70℃。
2.2对该工艺的评价
使用甲醇与使用95% 乙醇的提取效果较接近; 使用65% 乙醇的提取效果要差些。
考虑到甲醇有一定的毒性, 故工业上建议选用95% 乙醇作为葛根总黄酮的提取溶媒。
3.铅盐法
3.1提取工艺流程[11]
3.2对该工艺的研究
铅盐法葛根提取物的总黄酮含量较低, 收得率也较低, 可能是在中性乙酸铅沉淀杂质的同时, 也共沉淀了一些黄酮类物质; 同时在脱铅过程中, 有可能吸附了些许黄酮类物质。
4.水提取法
4.1提取工艺流程[13]
工艺条件: 鲜葛根300g; 水800m l 浸提12h; 5%NaOH 水溶液浸提15h; 减压浓缩控制温度≤70℃;水洗、95% 乙醇洗脱时控制流速和用量。
4.2对此法的评价
醇提法效果优于水提法, 这可能是有些葛根黄酮类化合物更易于溶于醇之故。
5.对葛根中总黄酮的开发应用前景展望
葛根属卫生部公布的“药食兼用食品”，既具有上乘的保健疗效功能，又可以作为粮食食用。
野生葛根未受污染，也极少发现病虫害。
因此，葛根及其产品是理想的绿色食品[16]。
近代研究证明[17]:它含有钙、铁、铜、磷等十多种人体所必须的微量元素，而这些微量元素的含量高于其它同类食品，其中的总黄酮含量也高于其它同类食品，是一种很有开发前景的资源，葛根的深加工产品定将因其独特的疗效功能而倍受人们欢迎。
以葛根为原料，可以开发出一系列功能性保健食品，如葛根面包，葛根红肠，葛根果冻，葛根粉丝等。
5.1降糖食品
开发糖尿病病人的保健食品是近年研究的热点。
由于葛根有降血糖的作用，在专为糖尿病研制的食品，饮料中，葛根都是理想的首选材料。
5.2醒酒饮料
草根具有独特的醒洒功效，我国民间历来就有用葛根解酒的习惯。
制成有保健作用的全天然醒酒饮料，能够迅速醒酒，解除饮酒后出现的头晕、恶心等症状。
6.结语
本实验介绍了几种葛根总黄酮的提取方法：超声辅助提取法、醇提取法、铅盐提取法、水提取法，以及各方法的一些评价。
结果表明，相比水提取法，超声波辅助法有提取速度快，提取率高的优点；相对于醇提取法来说，超声波辅助法有节能、环保的优点。
而铅盐提取法，提取出的总黄酮含量低，效率低，同时对环境也有一定的影响。
说明超声波辅助法在保证相对较高提取率的同时还有节能、环保的优势，对于葛根总黄酮提取的工业生产有更高应用价值，在天然产物有效成分的提取面有更广阔的应用前景。
葛根总黄酮除药用外, 还可添加于方便食品或饮料中。
提取葛根总黄酮的方法同样适用于葛根藤茎和叶中总黄酮的提取[13,14]。
充分且有效地利用葛根总黄酮, 必将促进葛根资源的开发和发展。
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