中药制剂中生物碱成分时行高效液相色谱法测定时,使用 较多的是紫外检测器.
气相色谱法
只适用于有挥发性的、遇热不分解的生物碱类;
生物碱盐在急速加热过程中产生的酸对色谱柱和 检测器不利,应该注意;
制备供试品溶液时一般应采用冷提取,净化过程也 要避免加热,以防成分流失,最后需用氯仿等低极性有 机溶剂为溶媒制备成供试液.
直接测定 不经过化学反应,利用生物碱物质自身的光吸收直接进行 比色测定的方法; 一般用于药味较少、干扰不大的中药制剂中总生物碱的 含量测定;
离子对萃取比色法 酸性染料比色法 应用本法的关键在于介质的pH、酸性染料的种类和有机溶 剂的选择; 常用的酸性染料有甲基橙、溴麝香草酚兰（BTB）和溴甲 酚绿等； PH的选择要根据染料的性质及生物碱的碱性(pKa)大小来 确定;
强碱滴定生物碱盐时,在70%-90%的乙醇介质中终点比 在水中明显,因此常将生物碱盐溶于90%乙醇,再用标准碱 乙醇液滴定.
酸碱滴定法指示反应终点可用指示剂和各种电位法。
分光光度法 目前多用单波长光度法，测定波长可选用待测生物碱
成分本身的吸收波长，也可加入某些试剂如亚硝酸钠试剂、 雷氏盐试剂及酸性染料等反应显色后用可见光波测定。 常用方法：直接测定、离子对萃取比色法
苯醌类化合物从结构上可分为邻苯醌及对苯醌两 大类。因前者不稳定，故天然存在的苯醌化合 物多为对苯醌的衍生物，且在醌核上多有-OH、 -OCH3、-CH3等基团或更长的烃类侧链。
O
1
6
2
5
3
4
O
O
6
1O 2
5
3
4
对苯醌
邻苯醌
萘醌类
萘醌化合物从结构上考虑可以有α(1,4)、β(1,2)及
选择有机溶剂的原则是根据离子对与有机相能否形成氢键 以及形成氢键能力的强弱而定.
氯仿、二氯甲烷与离子对形成氢键,有中等程度的提取率,且 选择性也较好,故是常 用的提取溶剂.
高效液相色谱法
以反相高效液相色谱应用较多。在反相高效液相色谱中, 由于硅胶表面残留硅醇基的影响,使生物碱分析易产生保 留时间延长、峰形变宽、拖尾.可采取改进流动相、固定 相等措施以克服游离硅醇基的影响,满足定量定量分析的 要求.
二、生物碱类成分分析方法
1、单体生物碱分析
（1）定性鉴别 沉淀反应是生物碱理化鉴别常用方法，主要利用生物
碱能与一些试剂生成沉淀这一特性。此反应一般在酸性水 溶液中进行。
（2）单体生物碱的含量测定
①薄层色谱法 此法简便、快捷。选用的吸附剂、展开剂及显色方法
与鉴别严格，但比鉴别严格。
②高效液相色谱法 可用液-液分配色谱法、液-固吸附色谱法以及离子交
（3） 沉淀反应 大多数生物碱在酸性水溶液中可以与某些试剂生成不 溶于水的复盐或分子复合物，这些试剂称生物碱沉淀试 剂。
生物碱的沉淀试剂根据其组成有碘化物复盐、重金属 盐和大分子酸三大类。
生物碱的沉淀反应可以检查中药制剂中生物碱的存在， 当某些沉淀试剂与生物碱生成的沉淀组成恒定时，还可 以用于中药制剂中生物碱成分的含量测定。
（4）显色反应 生物碱与一些浓无机酸为主的试剂反应产生不同的 颜色，这些呈色反应多用于检识和区别纯品生物碱， 而较少用于中药制剂中生物碱成分的分析。
生物碱在一定pH条件下可与一些酸性染料（多为 磺酸肽类）生成有色络合物，可被氯仿等有机溶剂定 量提出.
还有些结构中具有酯键的酯碱如乌头碱等可与异羟 肟酸铁试剂反应产生紫红色，这些特点可用于中药制 剂中生物碱成分的分析。
（2）各生物碱组分分析
根据总生物碱中各生物碱的性质差异，如碱性 差异、极性差异。通常采用色谱法对每种生物碱 进行分离后分析
3、应用示例
戊已丸中生物碱的含量测定 处方组成：黄连、吴茱萸（制）、白芍（炒）。 取本品粉末（过三号筛）0.7-0.9g，精密称定，置索 氏提取器中，加盐酸-甲醇（1：100）适量，加热回 流至提取液无色，提取液浓缩后移至25ml量瓶中， 加乙醇稀释至刻度，摇匀。精密量取5ml，置氧化铝 柱（内径约0.9cm，中性氧化铝5g，湿法装柱，用乙 醇30ml预洗）上，用乙醇35ml洗脱。收集洗脱液， 置50ml量瓶中，加乙醇稀释到刻度，摇匀，照分光 光度法，在345nm处测定吸收度，按盐酸小糪碱的 吸收系数728计算，即得。本品按干燥品计算，每1g 含生物碱以盐酸小糪碱(C20H18ClNO4)计，不得少于 30mg。
第二节 蒽醌类成分分析
一、概述
中药中醌类化合物主要有苯醌、萘醌、菲醌和蒽醌四种类 型。
其中以蒽醌类化合物最为多见，包括蒽醌及其不同还原程 度的产物和二聚物，如蒽酚、氧化蒽酚、蒽酮、二蒽酮、 二蒽醌等。
这些化合物在中药中可游离存在，也可与糖结合成苷，称 为蒽苷。
二、结构特征及理化性质 1、结构类型及特征 苯醌类
（5）碱性 大多数生物碱呈碱性反应，能使红色石蕊试纸变蓝。生
物碱之所以能显碱性，是因为它们分子中氮原子上的孤电 子对对质子有一定程度的亲和力，因而表现出碱性。
（6）紫外光谱特征 结构中具有共轭体系的生物碱均有紫外吸收，其中包括 结构母核即为共轭体系的和只有部分结构为共轭系统的。 紫外光谱的吸收峰位置除与其他化合物一样与共轭系统 中助色团的种类、位置、数量有关外，需要特别指出的是， 结构中的氮原子与发色团直接连接或参与发色团的生Байду номын сангаас碱， 其吸收峰位置还与测定时溶剂的pH有关。
中药制剂中各类化学成分 分析(1)
第一节 生物碱类成分分析
生物碱是生物界除生物体必须的含氮化合物（如氨基酸、 蛋白质和B族维生素等）之外的所有含氮有机化合物，因 其结构中氮原子上的未共享电子对而大多具有碱性。
生物碱绝大多数具有显著的生物活性,因此中药制剂中有 含有生物碱类成分的中药时，常选择该中药含有的生物碱 成分作为定性定量的依据。
换色谱法。
③气相色谱法
2、中药中生物碱分析 （1）总碱分析 ①定性鉴别
由于中药制剂中成分复杂，有些成分如蛋白质、多肽和 鞣质等也可与试剂生成沉淀而造成假阳性结果，因此，制 备样品供试液时必须净化处理，除去干扰成分，方能用沉 淀反应进行中药制剂中生物碱类成分的鉴别.
②总生物碱的含量测定 化学分析法
化学分析法包括重量分析法和容量分析法。目前主要使 用酸碱滴定法。