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生化实验:分光光度计使用及常用技术
(5) 吸光度A的测量:调整选择钮显示“A”,读数显示为 “.000”。如果不是此值,调消光零旋钮。再移动拉杆,使 标准液和待测液分别置于光路,读取“A”值。
(6) 打开检测室盖,取出比色杯,倾去比色液,用水冲洗干 净,倒置于铺有滤纸的平皿中。
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分光光度计的注意事项
1. 拉比色杆时动作要轻。
2. 手持比色杯的毛面(粗糙面),不可用手或滤纸等摩 擦比色杯的透光面;比色杯先用蒸馏水冲洗后,再 用比色液润洗才能装比色液。盛装比色液时,约达 比色杯2/3体积,不宜过多或过少;若不慎使溶液 流至比色杯外,须用棉花或擦镜纸吸干,才能放入 比色架。比色杯用后应立即用自来水冲洗干净。
分光光度计使用及常用技术
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生物化学实验要求
1. 成绩பைடு நூலகம்
平时成绩 (30%)
实验报告,考勤(20%) 实验考试(10%)
期末成绩(70%)
2
生物化学实验要求
2. 实验报告 题目(日期,温度) 摘要:目的,方法,结果,结论 原理:简单扼要 步骤:操作要点 结果:原始数据、计算过程、颜色变化等。 讨论:对结果归纳、概括、探讨
A标/ C标=KL, A测/ C测=KL
A标/ C标= A测/ C测
C测
A测 A标
C标
722型分光光度计的使用
(1) 接通电源,预热20min。
(2) 调节波长旋钮至所需波长。
(3) 比色杯依次放入检测室比色杯架内,空白液对准光路。
(4) 检查722型分光光度计的旋钮,使选择钮指向透光度 “T”,按“0”键,盖上检测室盖(光门打开),按“100”键, 重复数次,直至达到稳定。
周三2点前上交实验报告!
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分光光度法(specrophotometry)
I0
入射光
透光度(T):I/I0
I
出射光
分光光度法(specrophotometry)
Lambert-Beer定律:
A=KCL
A: 吸光度(光密度、消光度) K:常数(消光系数) C: 浓度 L: 光通过溶液距离
A标=KC标L, A测=KC测L
3. 测定溶液浓度的吸光度值在0.1~0.8之间最符合光吸 收定律,线性好、读数误差较小。
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实验结果
标准管,测定管分光光度值 (表格,写明样品名称) 计算公式,代入数据,结果
实验讨论
实验结论
由结果归纳总结的规律
思考题:使用分光光度计时,空白管的作用?
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