病原微生物的检测方法研究进展
摘要：本文章主要对病原微生物的检测方法研究进展进行综述，具体介绍食品、环境方面的病原微生物的检测方法研究进展。
以及本人对病原微生物检测方法发展的一些看法及体会。
关键词：病原微生物检测方法PCR技术食品检测
Abstract: This article mainly summarized research progress on detection methods of
pathogenic microorganism，Specific introduction food, environment research progress of methods used for the detection of pathogenic microorganisms. And I have some views on the development of pathogenic microorganism detection method and experience
Key words: Pathogenic microorganisms Detection method PCR technology Food testing
病原微生物是指可以侵犯人体，引起感染甚至传染病的微生物，或称病原体。
病原体中，以细菌和病毒的危害性最大。
病原微生物指朊毒体、寄生虫（原虫、蠕虫、医学昆虫）、真菌、细菌、螺旋体、支原体、立克次体、衣原体、病毒。
本文主要介绍的是在食品、环境、医药方面病原微生物检测方法的应用及研究，目的在于了解病原微生物的检测方法及其研究进展，增加生物学科普知识。
1病原微生物概述
1.1 病原微生物概念
病原微生物是指可以侵犯人体，引起感染甚至传染病的微生物，或称病原体。
病原体中，以细菌和病毒的危害性最大。
病原微生物指朊毒体、寄生虫（原虫、蠕虫、医学昆虫）、真菌、细菌、螺旋体、支原体、立克次体、衣原体、病毒。
1.2 病原微生物检测方法
病原微生物的检测方法包括以下几类：1）生物化学方法2）血清免疫学方法3）分子生物学方法4）分子生物学与免疫学相结合的方法5）用生物传感器进行病原微生物的鉴定6）生物芯片7）蛋白质指纹图谱技术8）LANP技术
2病原微生物的检测方法在食品方面的应用及研究进展
食品病原微生物传统检验方法步骤非常繁琐，需要耗费大量人力、物力，且检测周期长灵敏度较低，难以满足国内外对食品检测的要求。
这里介绍几种效益高且易操作现代食品病原微生物的检测方法。
2.1 微生物培养法
微生物快速检测方法始于80年代早期，主要根据各种菌体的理化特性进行分析。
而后不断出现改进方法，通过加入抑制剂、指标剂或者荧光物质等或借助快速的预处理方法缩短增菌时间，合并检验步骤，使培养和鉴定一步完成，从而达到快速检测的目的。
常用的检测方法有1）疏水网膜法2）葡萄糖苷酶荧光法3）Oxoid沙门氏菌快速检测法。
微生物培养法是食品检测中较常用切简单易行的食品检测方法。
2.2 免疫学方法
免疫学法在食品检测中应用最为广泛，此技术是以抗原抗体的特异性反应为基础，通过病原物刺激机体产生免疫球蛋白建立的。
根据检测技术的不同可分为免疫扩散法、凝集反应、酶联免疫吸附法和探针检测法。
免疫学方法具有高度的特异性和灵敏性，且易操作，价格便宜，所以在食品的检测中是最为常用的方法。
2.3 分子生物学方法
分子生物学方法可针对病原微生物的核酸分子特征进行鉴定。
主要分为3种：1）核酸分子杂交2）基因重组法3）PCR技术。
核酸分子杂交是有特异探针识别特异碱基序列实现杂交；基因重组法无需对待测菌株进行纯培养，而且无需什么特殊的试剂和设备简便易行，所以是一种很有前途的食品鉴定方法。
PCP技术是一种核酸体外扩增技术，该方法灵敏度高，效果好，往往在很短时间内就能检测出食品中的病原微生物。
3病原微生物的检测方法在环境方面的应用及研究进展（主要介绍水环境）
当今水污染隐患令人担忧，世界卫生组织估计全球约有88%腹泻类疾病是由饮用水被病原微生物污染引起的。
饮用含有病原微生物的水可以引发多种疾病，如霍乱、军团菌病、肺炎等等。
1993年美国密尔沃基市因为应用水中包含隐孢子虫菌导致100人死亡。
所以水污染的防治与检测迫在眉睫！下面是目前比较前沿的检测水污染的方法。
3.1 聚合酶链反应技术(PCR技术)
PCR技术是当今较流行的分子检测技术。
虽然PCR检测技术应用广泛，但是缺点是稳定性差，容易产生非特异性产物且水体出现假阳性现象较高。
所以目前出现了很多改进的PCR 技术，缩小其缺点，使其可信度变高，特异性更好。
以下是利用相关PCR技术对水中病原微生物的报道，见表1
3.2 RPA检测技术（Rationmetricpre-rRNA
analysis,RPA）
PCR检测方法缺点很明显，稳定性差，容易产生非特异性产物。
检测水体假阳性的概率相当高，可信度不高。
RPA检测技术与PCR检测技术相比，RPA用于检测细菌在受到营养刺激后pre-rRNA的变化情况从而检测水中活的病原株。
减少PCR检测技术中假阳性的干扰。
同时该方法也避免了了由于试验过程中引入的DNA污染或者由于PCR试剂造成的污染的影响。
3.3 DNA芯片检测技术
DNA芯片检测水中病原微生物是生物技术检测法中的新突破。
DNA芯片也称DNA微阵列，是利用机械系统将DNA探针阵列分布于玻璃或硅基片上形成多个点，可在同一时间对大量样品进行高通量分析的技术。
利用此技术检测水污染的流程图见图 1 芯片检测法的最
大优点是快速，特别是是在水源处可能污染的情况下，尽快得到检测结果尤为重要。
4本人的对病原微生物检测方法研究进展的一些看法及体会
病原微生物对我们人类的危害极大，检测与防治病原微生物是一项重要的任务。
所以我认为对于病原微生物的检测方法的研究应被鼓励，在未来希望有更优秀的检测方法出现，帮助人类去认识并且消灭病原微生物，让人类远离病原微生物的侵害，使人们的生活更加和谐与健康。
参考文献
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