细胞爬片用小玻片处理
清洗
1. 用纱网包裹小玻璃片,然后放入强酸(高锰酸钾:浓硫酸)浸泡24小时以上(或把小玻璃片放入玻璃杯,然后加入强酸浸泡,以备不时之需);强酸极为危险,请注意操作安全!!!
2. 把浸泡好的小玻璃片放入烧杯,用纱网包裹烧杯口,用自来水反复冲洗15分钟;
3. 使用超纯水洗涤3次*5分钟(脱色摆床);
4. 加入超纯水(记录加入了多少超纯水),用锡纸包裹烧杯口,高压灭菌(121℃,20min);
5. 在超净工作台中操作,加入无水乙醇至浓度为70%乙醇,把爬片浸泡在70%乙醇至使用为止;
5. 制备爬片前,用无菌小镊子取小玻片,用酒精灯稍微烘烤之后置于孔板,用无菌PBS洗涤3次,然后彻底吸干PBS,该小玻璃片可以使用了;
6. 如果还有足够的时间,请揭开盖子于超净台紫外消毒10-15分钟
包被
为何进行包被处理:细胞贴壁不牢,药物处理会导致细胞凋亡、死亡的、需要检测细胞周期的(分裂期细胞易脱落),需要长期观察的(也可能由于poly-lysine 致使细胞状态不良,请详细思考);
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