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HPLC法测定穿心莲片中穿心莲内酯的含量.


上海必能信SB3200超声提取器
穿心莲内酯对照品 穿心莲片
[色谱条件]
ODS柱(250×4.6,5um),以甲醇-水 (60:40)为流动相,检测波长为225nm, 流速1ml/min。
注意事项

流动相应选用色谱纯试剂、高纯水或双蒸水,酸碱液及缓 冲液需经过滤后使用,过滤时注意区分水系膜和油系膜的
使用范围;

水相流动相需经常更换(一般不超过2天),防止长菌变质; 使用双泵时,A、B、C、D四相中,若所用流动相中有含盐 流动相,则A、D(进液口位于混合器下方)放置含盐流动 相,B、C(进液口位于混合器上方)放置不含盐流动相;
[实验步骤]
1.对照品溶液的制备:取穿心莲内酯对照品适量,精密
称定,加甲醇制成0.1mg/ml溶液。
[数据处理及计算]
外标一点法计算(mg/片) [思考题] 1.取样时为什么取10片,不是取1片提取测定? 2.为何要补足重量? 3.什么是续滤液?
2.供试品制备 取本品10片,除去包衣,精密称定,研 细,取0.6g,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加入甲醇
25ml,称定重量,超声处理30min,放冷,再称定重量,用
甲醇补足减失的重量,摇匀,滤过,取续滤液用0.45um的微 孔滤膜过滤,置样品瓶中,备用。 3.测定法 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各 10μl,注入液相色谱仪,测定。
HPLC法测定穿心莲片中 穿心莲内酯的含量
一、实验目的 二、仪器与试药 三、色谱条件 四、实验步骤
五、注意事HPLC法定量分析原理及实验方法。
2. 熟悉HPLC仪基本操作及其在中药制剂分析中应用。
[仪器与试药] 美国Agilent1100 高效液相色谱仪、紫外检测器、 手动进样器、自动进样器
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