南昌大学实验报告
学生姓名:学号:专业班级:
实验类型:√验证□综合□设计□创新实验日期:实验成绩:
实验七培养基的配制和灭菌
一、实验目的:
1 、学习玻璃器皿的洗涤和灭菌前的准备工作;
2、了解配制微生物培养基的基本原理,本实验通过学习常用细菌培养基的配制来了解并掌握常规培养基配制和无菌水的制备方法;
3、学习各类物品的包装及灭菌技术;
二、实验基本原理:
培养基是应科研、生产需要,根据微生物对营养的需求按一定比例人工配置的适合微生物生长繁殖或产生代谢产物的混合营养物,任何培养基都应具备微生物生长所需要的六大类营养要素。
培养基配制好后应立即灭菌后备用。
由于微生物的种类及代谢的多样性,因而培养基的种类也很多,它们的配方及配制方法也各有差异,除一些特殊培养基外,一般培养基的配制过程大致相同。
一款成熟的培养基配方都会在其配方后面附上配制方法及pH值、灭菌温度等其他配制要求。
三、主要仪器设备及耗材:
1、药品及试剂:
可溶性淀粉、营养琼脂(或牛肉膏、蛋白胨、氯化钠、琼脂粉、10%NaOH,10%HCl)
2 、仪器及其它
高压蒸汽灭菌锅、干燥箱、试管、三角瓶、烧杯、量筒、玻棒、天平、药匙、pH试纸(1-14)、棉花、牛皮纸、记号笔、麻绳、纱布、培养皿、吸管、玻璃珠等
四、实验步骤:
(一)培养基的制备与分装
1 称量:按培养基配方比例依次准确地称取药品。
(可溶性淀粉先用少量冷水溶化后再加入)
2 熔化:在沸水浴锅中加热熔化。
3 调pH:10%NaOH,10%HCl调pH至7.4-7.6。
4 过滤:趁热用多层纱布过滤(本实验勿需过滤)
5 分装:将溶化的固体培养基趁热加至漏斗上,装试管时,装量不超过试管的1/4,注意管口不要沾上培养基。
6 加塞:试管应先捆成一捆,然后再于棉塞外包扎牛皮纸,贴上标签,注明培养基名称、日期、组别。
(二)无菌水的制备
用量筒量取150ml自来水于带玻璃珠三角瓶中,塞上棉塞,包扎牛皮纸。
(三)器皿的准备
1、培养皿的包装每6~10个一包,用旧报纸包扎(或放在特制铁皮圆筒里加盖扣严)。
2、吸管的包装首先在吸管的上端塞上一小段棉花,用长纸条包扎、打结。
(四)培养基、无菌水、器皿的灭菌
1、将培养基、无菌水放入高压蒸汽灭菌锅内,湿热灭菌。
2、培养基灭菌完毕,将试管培养基搁成斜面。
3、器皿放入干热灭菌箱内干热灭菌。
(注:详情请同学参考教材实验五培养基的配制和灭菌)
五、思考讨论题
1、培养基是根据什么原理配制的?
2、营养琼脂中含有些什么成分?
3、为什么湿热灭菌比干热灭菌优越?
六、实验体会及对实验改进的建议。