细胞培养基
1.概述
培养基是培养环境中最重要的成分,可提供细胞生长所必需的营养素、生长因子和激素,并能调节培养体系的pH 值和渗透压。
2.种类
(1)基础培养基
大多数细胞系均可在基础培养基中生长良好,基础培养基中含有氨基酸、维生素、无机盐和碳源(如葡萄糖),但是这种基础培养基配方中必须添加血清。
(2)减血清培养基
减少血清对细胞培养实验不良效应的另一种策略是使用减血清培养基。
减血清培养基是一种补充了营养素和动物来源因子从而降低了血清需要量的基础培养基配方。
(3)无血清培养基
无血清培养基 (SFM) 通过用适当的营养和激素成分代替血清,避免了使用动物血清带来的问题。
无血清培养基配方可用于多种原代细胞和细胞系,包括:用于重组蛋白生产的中国仓鼠卵巢(CHO) 细胞、各种杂交瘤细胞系、Sf9和Sf21 昆虫(草地贪夜蛾)细胞系以及用于病毒生产宿主细胞系(例如:293、VERO、MDCK、MDBK)等。
使用无血清培养基的一大优势是可通过适当的生长因子组合使培养基对特定细胞种类具有选择性。
3.常用细胞系培养基
许多哺乳动物连续细胞系均可采用相对简单的培养基(例如添加了血清的 MEM 培养基)进行培养,而采用MEM培养基培养的细胞同样也可采用DMEM或199培养基进行培养。
但是,如果细胞表达某种特殊功能,则可能需要使用较为复杂的培养基。
有关为某种细胞选择合适培养基的信息通常可通过发表的文献以及提供细胞的机构或者细胞库获得。
如果无法找到细胞该选择何种培养基的信息,您可根据经验选择生长培养基和血清,或者测试几种不同的培养基,以获得最佳结果。
一般而言,贴壁细胞可首先考虑MEM培养基,而悬浮细胞可首先考虑RPMI-1640 培养基。