基因工程菌发酵操作流程1.检查发酵车间是否达到发酵要求(所以设备处于待用状态)。
2.通知蒸汽车间按时送符合要求蒸汽。
3.种子罐基础培养基的领料及定容配制。
4.种子罐的PH、DO电极的校正安装和补料口堵头更换。
5.种子罐进料，调PH。
6.种子罐基础培养基在位灭菌，同时灭移种管道上段。
7.种子罐冷却后可连接酸、碱、消泡剂补料瓶。
8.种子罐培养基温度、PH(需进一步校准)、罐压、消泡达到发酵条件。
通知菌种室准备菌种转接。
9.无菌操作将种子罐所需MgSO4、Amp转入菌种转换罐。
10.种子罐扩增培养发酵阶段需平稳控制罐压、PH、DO、温度、消泡。
11.大罐基础培养基领料及配制。
12.大罐PH、DO电极校正安装及补料口堵头的更换。
13.大罐进料、定容、调PH；碱罐碱液的配制。
14.大罐基础培养基在位灭菌，同时对移种管道、进料管道、补料管道、碱罐及碱管道上段的灭菌。
15.大罐基础培养基温度降至发酵温度后再次校准PH、DO。
连接补料瓶调节至发酵条件。
16.无菌操作将大罐所需MgSO4、Amp转入菌种转换罐并转入种子罐。
17.利用压力差将种子罐里的种子液移接到大罐。
18.补碱时，将管道上阀门打开。
程序设为自动，控制流量。
19.补料罐补料培养基的领料定容配制。
20.补料罐补料培养基在位灭菌，同时对管道上段灭菌。
21.补料时，将管道上阀门打开。
程序设为自动，设置流量。
22.诱导剂领料，在配料罐中加水配制定容。
23.将诱导剂打入种子罐，灭菌后保持罐压。
24.利用压力差将种子罐里的诱导剂移接到大罐。
25.一段时间后，大罐的PH、DO呈上升形态即为发酵结束，可放罐离心。
芽孢杆菌发酵操作流程1.检查发酵车间是否达到发酵要求(所以设备处于待用状态)。
2.通知蒸汽车间按时送符合要求蒸汽。
3.种子罐基础培养基的领料及定容配制。
4.种子罐的PH、DO电极的校正安装和补料口堵头更换。
5.种子罐进料，调PH。
6.种子罐基础培养基在位灭菌，同时灭移种管道上段。
7.种子罐冷却后可连接酸、碱、消泡剂补料瓶。
8.种子罐培养基温度、PH(需进一步校准)、罐压、消泡达到发酵条件。
通知菌种室准备菌种转接。
9.无菌操作将种子罐所需MgSO4、Amp转入菌种转换罐。
10.种子罐扩增培养发酵阶段需平稳控制罐压、PH、DO、温度、消泡。
11.大罐基础培养基领料及配制。
12.大罐PH、DO电极校正安装及补料口堵头的更换。
13.大罐进料、定容、调PH；碱罐碱液的配制。
14.大罐基础培养基在位灭菌，同时对移种管道、进料管道、碱罐及碱管道上段的灭菌。
15.大罐基础培养基温度降至发酵温度后再次校准PH、DO。
连接酸、消泡剂补料瓶调节至发酵条件。
16.无菌操作将大罐所需MgSO4、Amp转入菌种转换罐并转入种子罐。
17.利用压力差将种子罐里的种子液移接到大罐。
18.补碱时，将管道上阀门打开。
程序设为自动，控制流量。
19.发酵一定时间后，程序中PH设为手动，停止对PH、DO控制20.一段时间后，大罐里孢子大量生长后即为发酵结束，可放罐离心。
设备操作规程一.种子罐灭菌1.首先排夹套水，关闭所有阀门。
然后先后打开夹套排污阀、夹套进蒸汽阀。
夹套开始进蒸汽对罐体进行预热。
2.微开取样排蒸汽阀、取样进蒸汽阀，对取样管路进行灭菌。
灭菌时间一般10分钟。
取样管路灭菌结束后，先后关闭排蒸汽阀、进蒸汽阀。
3.全开过滤器后端隔离阀，微开过滤器蒸汽排放阀、过滤器进蒸汽阀，对过滤器及管路进行灭菌，每隔一段时间需打开过滤器下端排污阀排放过滤器壳内冷凝水，通过调节进出蒸汽流量的大小将过滤器壳内压力维持在0.11 MPa左右。
灭菌时间一般10分钟。
过滤器灭菌结束后，同时关闭过滤器后端隔离阀、过滤器进蒸汽阀，关闭阀门时过滤器壳内压力不允许跌到0，然后开启过滤器前端隔离阀通入空气，过滤器壳内压力在0.10 MPa左右后，关闭过滤器前端隔离阀，将过滤器段保压。
需注意，因过滤器壳与管路降温时，内部压力也会损失，因此在压力损失后通入空气以便维持其保压压力。
4.在种子罐温度上升期间，要打开启尾气调节阀排放罐内冷空气然后关闭。
当罐内温度升到90℃时，打开取样进蒸汽阀和取样阀，使蒸汽从取样阀进入罐内，并打开进气路进蒸汽阀，先将进气路进蒸汽阀到过滤器蒸汽排放阀间那段管路灭透后，关闭过滤器蒸汽排放阀，打开进气隔膜阀，使蒸汽从空气管路进入罐内。
5.当温度达到设定灭菌温度121℃后，通过调节取样进蒸汽阀、进气路进蒸汽阀、尾气调节阀的开度，使罐压保持在0.11 MPa及灭菌温度121℃。
夹套进蒸汽阀可以根据蒸汽情况微开或关闭，夹套排污阀一定要开着。
注意：尾气调节阀不能全部关闭，以保证蒸汽流通，达到有效灭菌。
6.当罐温达到121℃后，灭菌倒计时开始。
此时可对种子罐接种管、移种补料管（3000L罐）进行灭菌操作。
对于种子罐接种管可全开罐体端隔离阀，微开排放阀对管路进行灭菌，灭菌时间30分钟。
7.当倒计时为0时，程序自动将灭菌开关关闭，灭菌结束。
先关闭取样阀、取样进蒸汽阀，再关闭进气路进蒸汽阀，全开过滤器前后端隔离阀，将空气通入罐内。
（注意：此操作时需保持过滤器处压力高于罐体压力）调节尾气调节阀，使罐压始终高于大气压。
检查所有进蒸汽阀是否关闭。
注意：实罐灭菌过程保证罐压始终处于正压状态，否则会染菌。
8.关闭夹套排污阀，打开夹套排水阀、夹套手动进冷水阀，进冷水对罐体进行降温。
待罐温低于100℃后，关闭夹套排水阀、夹套手动进冷水阀，打开自控进水隔离阀、回水阀。
系统进入发酵控制状态：按工艺要求设置控制参数，打开发酵开关，各单项控制开关，如温度控制开关、转速控制开关等进入发酵正常运行。
二.发酵罐灭菌1.首先排夹套水，关闭所有阀门。
然后先后打开夹套排污阀、夹套进蒸汽阀。
夹套开始进蒸汽对罐体进行预热。
2.微开取样排蒸汽阀、取样进蒸汽阀，对取样管路进行灭菌。
灭菌时间一般10分钟。
取样管路灭菌结束后，先后关闭排蒸汽阀、进蒸汽阀3.全开过滤器后端隔离阀，微开过滤器蒸汽排放阀、过滤器进蒸汽阀，对过滤器及管路进行灭菌，每隔一段时间需打开过滤器下端排污阀排放过滤器壳内冷凝水，通过调节进出蒸汽流量的大小将过滤器壳内压力维持在0.11 MPa左右。
灭菌时间一般10分钟。
过滤器灭菌结束后，同时关闭过滤器后端隔离阀、过滤器进蒸汽阀，关闭阀门时过滤器壳内压力不允许跌到0，然后开启过滤器前端隔离阀通入空气，过滤器壳内压力在0.10 MPa左右后，关闭过滤器前端隔离阀，将过滤器段保压。
需注意，因过滤器壳与管路降温时，内部压力也会损失，因此在压力损失后通入空气以便维持其保压压力。
4.在发酵罐罐温度上升期间，要打开启尾气调节阀排放罐内冷空气然后关闭。
当罐内温度升到90℃时，打开放料进蒸汽阀和放料阀，使蒸汽从放料阀进入罐内，并打开进气路进蒸汽阀，先将进气路进蒸汽阀到过滤器蒸汽排放阀间那段管路灭透后，关闭过滤器蒸汽排放阀，打开进气隔膜阀，使蒸汽从空气管路进入罐内。
5.当温度达到设定灭菌温度121℃后，通过调节放料进蒸汽阀、进气路进蒸汽阀、尾气调节阀的开度，使罐压保持在0.11 MPa及灭菌温度121℃。
夹套进蒸汽阀可以根据蒸汽情况微开或关闭，夹套排污阀一定要开着。
注意：尾气调节阀不能全部关闭，以保证蒸汽流通，达到有效灭菌。
6.当罐温达到121℃后，灭菌倒计时开始。
此时可对发酵罐移种补料管及补碱管道（3000L罐）进行灭菌操作。
打全开移种管道、补料管道及补碱管道阀门，微开移种管道、补料管道及补碱管道的排蒸汽阀门，灭菌30分钟。
7.当倒计时为0时，程序自动将灭菌开关关闭，灭菌结束。
先关闭放料阀、放料进蒸汽阀，再关闭进气路进蒸汽阀，全开过滤器前后端隔离阀，将空气通入罐内。
（注意：此操作时需保持过滤器处压力高于罐体压力）调节尾气调节阀，使罐压始终高于大气压。
检查所有进蒸汽阀是否关闭。
注意：实罐灭菌过程保证罐压始终处于正压状态，否则会染菌。
8.关闭夹套排污阀，打开夹套排水阀、夹套手动进冷水阀，进冷水对罐体进行降温。
待罐温低于100℃后，关闭夹套排水阀、夹套手动进冷水阀，打开自控进水隔离阀、回水阀。
系统进入发酵控制状态：按工艺要求设置控制参数，打开发酵开关，各单项控制开关，如温度控制开关、转速控制开关等进入发酵正常运行。
三.补料罐灭菌1.首先排夹套水，关闭所有阀门。
然后先后打开夹套排污阀、夹套进蒸汽阀。
夹套开始进蒸汽对罐体进行预热。
2.微开取样排蒸汽阀、取样进蒸汽阀，对取样管路进行灭菌。
灭菌时间一般10分钟。
取样管路灭菌结束后，先后关闭排蒸汽阀、进蒸汽阀。
3.全开过滤器后端隔离阀，微开过滤器蒸汽排放阀、过滤器进蒸汽阀，对过滤器及管路进行灭菌，每隔一段时间需打开过滤器下端排污阀排放过滤器壳内冷凝水，通过调节进出蒸汽流量的大小将过滤器壳内压力维持在0.11 MPa左右。
灭菌时间一般10分钟。
过滤器灭菌结束后，同时关闭过滤器后端隔离阀、过滤器进蒸汽阀，关闭阀门时过滤器壳内压力不允许跌到0，然后开启过滤器前端隔离阀通入空气，过滤器壳内压力在0.10 MPa左右后，关闭过滤器前端隔离阀，将过滤器段保压。
需注意，因过滤器壳与管路降温时，内部压力也会损失，因此在压力损失后通入空气以便维持其保压压力。
4.在补料罐温度上升期间，要打开启尾气调节阀排放罐内冷空气然后关闭。
当罐内温度升到90℃时，打开取样进蒸汽阀和取样阀，使蒸汽从取样阀进入罐内，并打开进气路进蒸汽阀，先将进气路进蒸汽阀到过滤器蒸汽排放阀间那段管路灭透后，关闭过滤器蒸汽排放阀，打开进气隔膜阀，使蒸汽从空气管路进入罐内。
5.当温度达到设定灭菌温度121℃后，通过调节取样进蒸汽阀、进气路进蒸汽阀、尾气调节阀的开度，使罐压保持在0.11 MPa及灭菌温度121℃。
夹套进蒸汽阀可以根据蒸汽情况微开或关闭，夹套排污阀一定要开着。
注意：尾气调节阀不能全部关闭，以保证蒸汽流通，达到有效灭菌。
6.当罐温达到121℃后，灭菌倒计时开始。
灭菌时间30分钟。
当倒计时为0时，程序自动将灭菌开关关闭，灭菌结束。
先关闭取样阀、取样进蒸汽阀，再关闭进气路进蒸汽阀，全开过滤器前后端隔离阀，将空气通入罐内。
（注意：此操作时需保持过滤器处压力高于罐体压力）调节尾气调节阀，使罐压始终高于大气压。
检查所有进蒸汽阀是否关闭。
注意：实罐灭菌过程保证罐压始终处于正压状态，否则会染菌。
7.关闭夹套排污阀，打开夹套排水阀、夹套手动进冷水阀，进冷水对罐体进行降温。
降至一定温度后为发酵罐的补料做准备。
四.碱罐灭菌1.首先排夹套水，关闭所有阀门。
然后先后打开夹套排污阀、夹套进蒸汽阀。
夹套开始进蒸汽对罐体进行预热。
2.微开取样排蒸汽阀、取样进蒸汽阀，对取样管路进行灭菌。
灭菌时间一般10分钟。
取样管路灭菌结束后，先后关闭排蒸汽阀、进蒸汽阀。
3.全开过滤器后端隔离阀，微开过滤器蒸汽排放阀、过滤器进蒸汽阀，对过滤器及管路进行灭菌，每隔一段时间需打开过滤器下端排污阀排放过滤器壳内冷凝水，通过调节进出蒸汽流量的大小将过滤器壳内压力维持在0.11 MPa左右。