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生药学实验讲义

生药学实验讲义————————————————————————————————作者: ————————————————————————————————日期:ﻩ生药学实验讲义漯河医学高等专科学校目录实验室守则ﻩ3实验一生药中常见的化学成分的理化鉴定(一)ﻩ4实验二生药中常见的化学成分的理化鉴定(二)ﻩ5实验三根类生药ﻩ6实验四根茎类生药7实验五皮类生药ﻩ8实验六茎木类生药ﻩ910实验七植物细胞基本结构ﻩ11实验八植物的组织ﻩ12实验九根的组织构造ﻩ13实验十双子叶植物茎的初生构造和次生构造单子叶植物、裸子植物茎的构造ﻩ实验十一叶的构造14 实验十二花的组织构造ﻩ15实验十三果实的内部组织构造1617实验十四种子的内部组织构造ﻩ实验十五菌类、裸子植物的性状显微鉴定18 实验十六双子叶植物根及根茎类生药的显微及显微理化鉴定19 实验十七单子叶植物根及根茎类生药的显微及显微理化鉴定20 实验十八皮类生药的显微及显微理化鉴定21 实验十九花类生药的显微及显微理化鉴定22 实验二十果实种子类生药的显微及显微理化鉴定2324实验二十一全草及其他类类生药的显微及显微理化鉴定ﻩ实验二十二动物类和矿物类生药的性状鉴别ﻩ25实验二十三户外见习ﻩ26实验二十四附院药房见习2728附录一常用试剂配置法ﻩ附录二层离法常用显色剂29 附录三显微镜测量法30 附录五显微镜的构造与使用31 32附录六生物绘图ﻩ实验室守则一、实验注意事项:1.根据教学进程,温习与本次实验有关的课堂讲授内容。

2.仔细阅读本次实验的内容,要求弄懂实验的原理与方法。

3.准备好各种自备的实验用品,如铅笔、橡皮、直尺、报告纸等。

二、实验过程中的几点要求:1.遵守实验室规则,保持实验室安静。

2.实验认真,观察仔细,观察应当与思考结合起来,应当手、眼、脑三者并用。

3.由于实验时间有限,实验时应当善于安排自己的工作,注意力应当集中在主要问题上,不要用过多时间去钻研细小的次要问题,一时解决不了的次要问题,可留课外时间去解决o 4.在实验过程中,应当随时注意观察到的现象,测量或称量的数据,计算结果等写在报告纸上,养成能随时作出准确、清淅、整齐的记录而不需要重抄的良好习惯。

5.实验进行过程中,必须注意听取教师的指导。

6.实验桌前应随时保持整洁,非实验必要物品一律不许放在桌面或桌架上。

7.纸屑、废物应放人污物缸内,不得乱丢地上,污物缸内不得倒入液体。

三、实验完毕时的几点要求:1.按照教师指定时间完成实验报告。

2.把实验用仪器、用品等收拾干净,放在指定位置。

发放给个人保管的可放抽屉或柜内。

3.临时借用物品应及时归还。

4.值日生负责最后清扫实验室卫生,并及时清除污物缸内的废弃物。

5.实验结束后,检查门、窗、水、电,保证无安全隐患后方可离开实验室。

实验一生药中常见化学成分的理化鉴定(一)一、实验目的要求:1.了解化学检出法在药材鉴定中的应用。

2.熟悉药材鉴定中常用的理化鉴定方法。

3.掌握生物碱,羟基蒽醌的理化性质和定性检识反应。

二、实验主要材料、仪器及试剂:马钱子、黄柏(苦参)黄连、大黄、秦皮、黄连乙醇液。

水浴锅、荧光灯、蒸发皿、锥形瓶、试管、微量升华装置。

碘化铋钾试液、碘化汞钾试液、碘一碘化钾试液、浓硝酸、浓硫酸、5%NaOH、HCl、乙醚、氨水。

三、实验内容:1.显微化学反应法:(1)将药材的切片或粉未置载玻片上,滴加适当试液,加盖玻片在显微镜下观察产生的颜色或结晶等,作为鉴别特征。

’①取干燥马钱子的胚乳部分作徒手切片,加l%硫矾酸试剂l滴,镜检,观察结果。

②另取一切片,加浓硝酸l滴,镜检,观察结果。

(2)取药材粗粉加适当试剂浸出,将浸出液滴于载玻片上,滴加适当试剂,加盖玻片,镜检观察反应结果。

取黄连乙醇液1滴,加浓HN03 1滴,镜检,观察结果。

(3)取药材的切片或粉末滴加适当试剂,直接观察皇现的种种颜色作为鉴别特征。

取大黄饮片,加5%NaOH l~2滴,出现什么颜色?再加稀HCl1~2滴,又出现什么颜色?2.微量升华法:是利用药材中所含的某些成分,在一定温度下能升华的性质,获得升华物,在显微镜下观察其形状,颜色及化学反应,作为鉴别特征。

具体方法:取金属片,安放在有圆孔(直径约2cm)的石棉板上,金属片上放一小金属圈(高度约0.8cm),对准石棉板上的圆孔,圈内加药材粉末一薄层,圈上放一载玻片,在石棉板下圆孔处用酒精灯徐徐加热(火焰距板约4cm)数分钟,至粉末开始变焦,并有气化物发生,去火待冷,则有结晶状升华物附着于覆盖的载片上,将载玻片取下反转,在显微镜下观察结晶形状,并可加化学试液,观察其变化。

取大黄粉未,进行如上操作,观察反应结果。

3.荧光分析法:将药材切片或粉末或提取液等,在荧光灯下观察荧光,有些药材不产生荧光,如以酸碱处理或其他化学方法处理后,可使其中某些成分在荧光灯下产生荧光,以便鉴别。

如取黄连饮片、浙贝母粉末或秦皮水浸液,在紫外灯下观察荧光颜色。

.‘4.层析法:‘分为纸层析、柱层析、薄层层析等(略)。

’5.化学定性检查:药材中的化学成分可利用其能与某些试剂产生特殊的颜色、沉淀反应来进行鉴别。

(1)生物碱的检出:沉淀反应取黄连,马钱子,黄柏(苦参)粉未各2g,分别盛入锥形瓶中,各加水l 5ml,浓HCl O.5ml,60℃水浴上温浸30分钟,时时振摇,取滤液备用。

各取2ml滤液于试管中,分别加下列试液2—3滴,观察有何现象?碘化铋钾试液碘化汞钾试液碘一碘化钾试液黄连马钱子黄柏(苦参)(2)羟基功醌的检出:Bomtrǎger反应取大黄粉未0.2g,置试管中加入5%NaOH试液4ml,在小火上煮沸,取滤液加HCl呈酸性后,再加乙醚5ml,振摇,分取醚层,于醚层中加入等量氨试液,振摇,观察反应现象。

四、作业:简要记录各反应的实验步骤和结果。

五、思考题:1.显微化学反应法有几种操作方法?2.微量升华法用于生药鉴别有何特点?3.含何类成分的生药常会产生荧光?4.生物碱常甩的沉淀试剂有哪些?Bornträger反应过程的原理是什么?实验二生药中常见化学成分的理化鉴定(二)一、实验目的要求: .掌握香豆精类,强心苷类、皂苷类、鞣质类、氰苷类、黄酮类的理化性质和定性检识反应。

二、实验主要材料、仪器及试剂:秦皮、桔梗、穿山龙、五倍子、儿茶、苦杏仁、洋地黄叶、黄芩(槐米水浴锅蒸发皿锥形瓶盐酸羟胺甲醇液、l0%氢氧化钾甲醇液、乙醚、氯仿、盐酸、l%三氯化铁乙醇液、2%红血球悬浮液、1%盐酸奎宁试液、明胶液、铁铵矾试液、三氯化铁试液、冰醋酸、浓硫酸、镁粉。

三、实验内容:1.化学定性检查(1)香豆精类的检出:异羟肟酸铁反应取秦皮粗粉0.2g,置具塞试管中,加乙醚3ml,浸渍5~10分钟,时加振摇,放置,吸取上清液(或滤过)于试管中加新配制的盐酸羟胺甲醇溶液2~3滴,l 0%氢氧化钾甲醇溶液2~3滴,水浴温热1~2分钟,冷后加l0%盐酸,使pH为3~4,再加l%三氯化铁乙醇溶液1~2 滴,两液混合面或溶液应显什么颜色?(2)强心苷的检出:三氯化铁一冰醋酸反应取洋地黄叶粉末0.5g,加水5ml,水浴加热20分钟,滤液加3mlCHCl3,振摇萃取后,再加乙醚3ml,待分层,用吸管吸取取下层,将CHCl3层转于蒸发皿中蒸干,放冷,加冰醋酸lml使残渣溶解,移人试管中,加三氯化铁溶液1滴,并沿管壁缓缓注入浓H2S04l5~20滴,观察上层液及界面的颜色变化。

(3)皂苷的检出:①泡沫反应取桔梗粉末0.2g,加水5ml,加热煮沸,过滤,滤液在试管中强烈振摇,注意是否产生大量持久性泡沫。

②溶血试验取穿山龙的l%生理盐水溶液lml和l%生理盐水lml,分别置试管中,各加2%红血球悬浮液0.3ml,摇匀后放置,注意观察哪支试管溶液变清而透明。

(示溶血现象)(4)鞣质的检出:显色及沉淀反应取五倍子,儿茶粉末各0.5g,分别置于锥形瓶中,加25ml水,水浴加热,过滤备用。

各取滤液2ml,分别加下列试剂,观察反应现象。

1%盐酸奎宁试液明胶液铁铵矾试液、五倍子儿茶(5)氰苷类的检出:苦味酸钠反应取苦杏仁一粒捣碎,用水湿润置试管中,试管中悬挂用NaHC03饱和溶液湿润的苦味酸试纸一条,用软木塞塞紧,置40—50○C水浴中,观察试纸颜色变化。

(6)黄酮苷的检出:盐酸镁粉反应取黄芩(槐米)粉末约0.2g,加乙醇5ml,水浴温热约5分钟,滤过,取滤液2ml,加镁粉少量,混匀,滴加盐酸数滴,注意有气泡产生,同时观察呈现什么颜色。

四、作业:简要记录各反应的实验步骤和结果。

五、思考题:1、香豆精苷,强心苷,氰苷,黄酮苷及鞣质的反应机理是什么?2、黄酮类成分遇盐酸一镁粉是否都显红色?如不显红色是否可以否定黄酮成分的存在?实验三根类生药黄芪Rabix Astragali、甘草Radix Clycyrrbizae一、实验目的:l、掌握黄芪、甘草生药性状。

2、掌握黄芪、甘草粉末显微特征。

二、实验主要仪器及试剂:显微镜、临时装片用具、蒸馏水、水合氯醛溶液、白瓷板、蒸发皿、蒸馏水、80%硫酸。

三、实验材料:.蒙古黄芪Astragalis membranaceusBgc.Var.mongholieus(Bgc.)Hsiao粉末、甘草clycyrrbiza uralensis Fisch. 粉末。

四、实验内容及步骤:1、镜检黄芪粉末,分别以蒸馏水和水合氯醛试液装片,注意以下特征:①纤维众多,成束,细长,直径9~36μm,壁厚,非木化,孔沟不明显。

另取黄芪生药,刮取少量纤维(粉末),透化后装片,注意纤维的先端常纵裂成扫帚状。

②导管主为具缘纹孔导管,纹孔呈椭圆形,类方类或斜方形。

③木栓细胞表面观呈多角形或类方形。

④淀粉粒单粒类圆形、椭圆形或类肾形,直径3~13μm,复粒由2~4分粒组成。

2、镜检甘草粉末分别以蒸馏水和水合氯醛试液装片,注意以下特征:①纤维众多,成束或散离,细长,直径6~14μm,壁厚,木化或非木化,孔沟不明显;晶鞘纤维易察见,草酸钙方晶类双锥形,长方形或类方形,含晶细胞的壁增厚,微木化或非木化。

②导管主为具缘纹孔导管,多破碎,纹孔椭圆形或略呈斜方形,对列或互列,有的导管旁可见小型具缘纹孔管胞。

.③木栓细胞棕红色,壁薄,微木化,表面观呈多角形。

④淀粉粒众多,单粒椭圆形、卵形或类球形,直径3~16μm,脐点点状或短缝状。

复粒稀少,由2分粒组成。

此外,尚有少数黄棕色或红棕色的色素块。

五、作业:1、绘黄芪粉末特征图,示纤维,导管,木栓细胞与淀粉粒。

2、绘甘草粉末显微特征图,示晶纤维,具缘纹孔导管,木栓细胞和淀粉粒。

六、思考题:l、甘草的组织构造中,有哪些较显著的鉴别特征?2、什么是晶鞘纤维?3、如何能方便而有效地鉴别甘草和黄芪粉末?实验四根茎类生药黄连、大黄一、实验目的:l、掌握黄连、大黄的生药性状特征。

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