六、自制或创造的实验条件：利用饮料瓶装取废液，以备不时之需；
七、实验流程及操作方法：
（一）实验流程流程：
槐米粗粉（150 克） 加水 800ml 加热，加氢氧化钠调 PH8-8.5，升温至 80℃， 加硼砂 3.2 克，搅拌加热，95℃保温 50 分钟，趁热过滤， 滤渣再如上提取一次，合并滤液。
滤液 加 10%盐酸调 PH4-5，放置过夜，抽滤。
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五、实验方法创新之处：
这些都提醒我们在实验过程中要积极的去思考，知道自己每一步操作的原 理，找到最适合自己实验的方法；如果在实验中遇到任何问题，要及时查找原因 并向老师请教，切不可自己盲目操作。
十、新的研究课题：槲皮素治疗癌症的研究
十一、合理化建议：
为了避免实验过程中的交叉污染及仪器乱用现象，希望能尽量满足每组有一 套仪器；同时要求各位实验人员在借用其他组的仪器的时候要告知对方，并及时 送还。
（二）操作方法： 1、提取分离方法
（1）秤取槐米 300 克，用研钵研碎，将研碎的槐米粗粉放入铝盆中，加入
800ml 水于常温下浸渍；
（2）浸渍 2h 后，取一半药材用铝盆盛放，放置电磁炉上蒸煮 15 分钟，另
一半药材同样蒸煮 15 分钟；
（3）收集所用蒸煮液，放置在 1000ml 烧杯中放置析晶，有浅黄色晶体析出，
17 玻璃漏斗
18
研钵
19 胶头滴管
20 薄层板
21 展开缸
22
紫外光谱 仪
23
熔点测定 仪
24 真空泵
25 电热套
数量
1台
1个 1个 1个 1个 1个 1个
1个
1个 2条 1个 1个 1个 1个 1个 1张 1个 1套 1个 10个
1个
1台
1台
1台
1台
型号
IM-B2002
GG-17 1000ml GG-17 1000ml
滤取结晶，合并所有结晶产区，获得芦丁粗品（15.4 克）；
（4）将芦丁粗品置于 500mL 烧杯中，加入 43mL 无水乙醇溶解，待溶解完全
后放置析晶，得到芦丁精品（12.3 克）；
（5）将芦丁精品放于 500 ml 圆底烧瓶中，加入 1000ml4%硫酸，微沸回流 120 分钟，酸水解获得米黄色针状结晶，即槲皮素粗品（10.7 克）； （6）将槲皮素粗品放置于安瓿瓶中，用无水乙醇重结晶获得槲皮素精品 （4.12 克）； 2、结构鉴定方法 （1）测熔点：取槲皮素少量，用熔点测定仪测其熔点，观察熔距的大小， 在 0.5~2℃为纯品（m.p.313~314℃）。 （2）薄层色谱法：硅胶 GF254 板，用甲苯-乙酸乙酯-甲酸（5:4:1）展开， 紫外灯（365nm)观察，经展开，显色尽显示槲皮素的斑点。
第二天，药材粉碎及其蒸煮三次，过滤，滤液静置； 第三天，抽滤，滤液装入饮料瓶，滤渣放入烧杯，烧杯放入烘箱烘干，
称重；按 1:200 的比例加水，加热溶解，趁热滤过，静置，得芦丁精品，称重； 第四天，称取芦丁置于圆底烧瓶中，加 2%硫酸加热回流 1 小时，放
冷，静置，抽滤； 第五天，水洗沉淀两次，干燥，乙醇重结晶，称重； 第六天，铺薄层板，置于水平台面上风干 12 小时； 第七天，将薄层板放入烘箱中活化半个小时，活化完成后进行薄层
（3）紫外光谱：槲皮素在 375nm 和 255nm 有两个吸收峰，分别属
(A
环)电子跃迁和
(B 环)电子跃迁，分别对应两个生色团组成：375nm
吸收带由肉桂酰生色团产生，为 I 带；250nm 吸收带由苯甲酰生色团产生， 为 II 带，将紫外光下的图谱与标准图谱对照； 实验记录:
八、结果与分析
（一）实验结果： 1、产率：实验所用槐米粗品300g,所得槲皮素晶体4.12g。 产率%=4.12g/300g*100%=1.373% 2、熔点：利用显微熔点测定仪测得最后结果如下： 理论熔点：313.7℃ 所测熔点：312.9℃~314.0℃ 3、薄层色谱：利用薄层色谱法鉴定实验所得产品的纯度如下图：
滤渣 蒸馏水洗至中性，抽干，90℃以下干燥。
粗芦丁 加入原生药四倍量 4%硫酸，回流微沸 95 分钟， 适量水稀释，冷却，静置过滤
沉淀 水洗至中性，抽滤。
黄色槲皮素粗品 （80℃干燥） 20 倍量 95%乙醇溶解（回流）， 趁热过滤。
滤液 20 倍量蒸馏水稀释，静置 24 小时，抽滤。
槲皮素精品（黄色针晶）
四、实验所用试剂、仪器的型号及生产厂家：
（一）实验试剂，见下表：
序号 1 2 3 4 5 6
名称 95%乙醇溶液
浓 H2SO4 甲醇
无水乙醇 纯净水
硅胶 GF254
数量 25ml 12ml 10ml 43ml 1500ml
30g
规格 500ml／瓶 AR 500ml／瓶 AR 500ml／瓶 AR 500ml／瓶 AR
4、紫外图谱：利用紫外光谱仪测得的紫外数据及图谱如下
（二）结果分析： 1、由所测得的熔点，薄层显示出的颜色及吸收波长可知，我们组所得的槲
皮素晶体的纯度较高，因为芦丁易溶于碱性水，故可用碱性水提取，再将碱水提 取液调成酸性，槲皮素难溶于酸性水，槲皮素即可水解析出；同时在操作过程中， 我们也注意使其免受其他试剂的污染，在重结晶时，使用易挥发的无水乙醇溶解， 使得其纯度较高；
掌握槐米中槲皮素的提取及提取方法 了解槲皮素的药理作用及应用价值 掌握槲皮素的纯度检测 掌握槲皮素的结构鉴定的方法
三、实验基本原理：
本实验主要利用黄酮类化合物虽然有一定的极性，可溶于水，但却难溶于 酸性水，易溶于碱性水，故可用碱性水提取，再将碱水提取液调成酸性，黄酮苷 类即可沉淀析出。以槐米为原料，采用煎煮法提取槐米有效成分芦丁，然后酸溶 液水解获得槲皮素粗品，乙醇重结晶获得槲皮素精品。
色谱鉴定； 第八天，进行槲皮素的紫外测定，得到吸收峰； 第九天，归还仪器，打扫实验室。
九、结论：
通过这次实验，我们发现了很多实验的陋习，体现出我们的实验操作能力需 要更多地锻炼，首先实验前的准备工作是非常重要的，我们要提前安排好时间， 在实验前我们觉得实验很简单，可是正真操作起来发现很不容易，就拿抽滤来说， 我们的溶液基本每次抽滤都要两个小时，非常耗时，有时候一上午就在等着抽滤， 所以在实验前一定要对实验有彻底的了解与学习；其次我们的操作能力太差，对 自己的实验不确定，在做实验中经常会怀疑自己做的是不是对的，致使实验过程 中浪费很多时间；另外，实践是检验真理的一切标准，理论和实际有时也是有很 大差距的，我们查找资料上说槐米用水蒸煮加入原料的 6 倍量水，可是实际操作 起来发现其实水太多，对蒸煮也不是一件好事；还有在最后槲皮素重结晶的过程 中损失了很多产品，槲皮素都粘在烧杯壁上了；
天然药物化学实验报告
一、实验题目：槐米中槲皮素的提取分离及结构鉴定
二、实验目的:
通过对该选题进行资料查阅、方案设计、试验、结果分析等，让我自己学到 一套系统、完整的槐米药效成分芦丁和槲皮素进行基源鉴定、提取、分离和结构 鉴定的方法，并通过此项训练，提高自己的动手操作能力及综合运用自己所学知 识的能力，培养自己独立思考、分析问题、解决问题的能力。
2、由产量和产率知，我们所得的槲皮素产率偏低，由于浸泡液中基本没有 再析出结晶，而且槲皮素粗品不少，所以产率低的原因是在槲皮素重结晶的过程 中，我们使用大烧杯，使许多产物粘烧杯壁上，造成大量损失。
3、和另外两组相比，我们的的产品纯度更好一些，他们采用的是加入氢氧 化钠提取，而我们直接采用的蒸煮法，所以碱提取会影响产品的纯度； 实验记录：第一天，领取药材以及实验仪器；
GG-17 500ml GG-17 250ml
100ml 10ml
10ml 直径 7mm 长 40cm
BZ24129
GG-17 500ml
P-1 100×100 UV-8三用紫外分
析仪 X-6显微熔点测定
仪 SHD-III型循环水
式多用真空泵 98-1-C型数字控
温电热套
生产厂家 余姚市纪铭称 量校验设备有
18L/桶
500g／瓶
薄层层析
生产厂家 天津天力 天津天力 天津天力 天津天力 万家纯水 青岛海浪
（二）实验仪器，见下表：
序号 名称
1 电子天平
2 圆底烧瓶
3
烧杯
4
烧杯
5
烧杯
6
量筒
7
量筒
8
直型冷凝 管
9 75˚弯管
10 橡胶管 11 移液管
12 玻璃棒
13 尾接管
14 布氏漏斗
15 抽滤瓶

16
滤纸