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时间分辨荧光CRP-poct试纸条的设计

时间分辨荧光CRP-POCT 试纸条的设计
本试剂条内部采用侧向流免疫层析的三明治方法,装置包括一个样品垫、一个结合物释放垫、一个反应膜和一个吸收垫(图1)。

其中样品垫用于加样(血清或全血);结合物释放垫中含过量的CRP 抗体A 和Eu 的复合物(α-CRPA-Eu);反应膜上有两道线:检测线,又称T 线:,含过量的CRP 抗体B(α-CRPB);对照线,又称C 线,含定量的CRP 抗体A 的抗体(α-α-CRPA )。

在测试中,血清样品在试纸条的毛细管
作用带动下流经结合物释放垫,血清中的
CRP 在此与CRP 抗体A-Eu 复合物结合,形
成CRP-抗体A-Eu 复合物(图2-A ),并在
流经反应膜上的捕获线时被捕获分子(CRP
抗体B )结合,形成抗体B-CRP-抗体A-Eu
的三明治复合物,产生T 线信号(图2-B )。

而结合物释放垫中过量的CRP 抗体A-Eu 复合物在流经反应膜上的捕获线时不能被捕获分子捕获,越过捕获线继续前行。

当到达对照线(C 线)时,被其抗体捕获,产生C 线信号(图2-C )。

将T 、C 线进行整合,去除信噪比后,即可判定血清中CRP 的含量(图3)。

图1 :CRP-POCT 试纸条的结构 1=样品垫,2=结合物释放垫,3=检测线,4=反应膜, 5=对照线,6=吸收垫
图2:铕标记的CRP 抗体与CRP 及本身抗体的结合
A. CRP 抗体A 与CRP 在结合物释放垫上结合;
B. CRP 抗体A 与CRP 的结合物在T 线处与CRP 的另一抗体B
结合,被捕获于T 线;
C. CRP 抗体A 与其本身的抗体被捕获于C 线 图3:时间分辨荧光CRP-POCT 试纸 条的检测结果。

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