血小板抗原
血小板抗原
血小板抗原
24个抗原主要分布在糖蛋白GPⅡb，GPⅢa，GPⅠb，GPⅠa 以及CD109上 ；
GPⅢa（CD61）携带9种HPA抗原，分别为HPA-1，HPA-4， HPA-6bw，HPA-7bw，HPA-8bw，HPA-10bw，HPA-11bw， HPA-14bw，HPA-16bw GPⅡb（CD41）是跨膜蛋白，细胞外116 kD的重链，通过 二硫键与22 kD的轻链共价结合。GPⅡb上携带 HPA-3和 HPA-9bw；
血清学定型 即用已知特异性抗体检测血小板血型抗原 缺点：特异性抗体来源困难 ---人血清中血小板抗体通常为多特异性 ---单克隆抗体匮乏，目前国际上仅有HPA-1a单抗， 无其它HPA单抗。 基因定型 限制性片段长度多态性分析（RFLP） 序列特异性寡核苷酸聚合酶链反应(PCR-SSO) 序列特异性引物聚合酶链反应(PCR-SSP)
血小板抗体检测 血清学 ELISA法(酶联免疫试验) 血小板抗原单抗特异性固相化法(MAIPA) 固相血小板免疫血清学试验(SPISA)
简易致敏红细胞血小板血清学试验(SEPSA)
流式细胞仪 改良抗原俘获(ELISA) 免疫荧光试验
简易致敏红细胞血小板血清学试验 SEPSA
由HLA抗体引起PTR约占80%，其次为HPA或ABO抗体。 现由于临床广泛输注去白细胞的成分血治疗血液病，发病 率已经大为下降
血小板相关疾病-血小板输注无效(PTR）
非免疫学原因(67.3%) 发热 脾功能亢进 感染 药物作用 DIC 血小板的质量问题 免疫学原因(17.5%) HLA抗体 HPA抗体 ABO血型不合 血小板自身抗体 药物 预防 1.白细胞过滤 2.辐照 3. HLA和HPA配型输注
诊断血小板免疫性疾病
筛查血小板相容性供者
筛选基因型相容的供者 避免血小板抗体的产生
采取预防和治疗措施 避免流产、出血等
减少血小板输注无效 避免紫癜、出血和死亡
血小板抗原定型
HPA-1 HPA-2 a b a b HPA-3 a b HPA-4 HPA-5 HPA-15 a b a b a b 阳性对照条带 等位基因条带 1bb 2ab 3bb 4aa 5aa 15aa
血小板相关疾病-血小板输注无效(PTR）
Platelet transfusion refractoriness, PTR: 患者接受充足治疗剂量 （≥2.5x1011个/次）的血小板输注后，血液循环中血小板计数未见有效 提高，临床出血表现未见明显改善，处于血小板治疗不应状态。一般临 床上认为至少有2次及以上输注血小板效果不佳才能做出PTR诊断。 1.若输注后1小时 CCI〈 7500/μL 12小时 CCI〈 6000/μL 24小时 CCI〈 4500/μL 连续3次，可判断为血小板无效输注 2.血小板恢复（回收率）百分率（PR%） 若输注血小板24小时后，PR%〈20%，可判断为血小板无效输注
Passive alloimmune thrombocytopenia, PAT: 患 者输入含有血小板特异性抗体的血浆，在数个小时 之内出现血小板减少症，约一周后缓解。 一旦发现献血员血浆、血清中含有血小板特异性抗 体应立即停止献血，这类献血员多为有妊娠史。 Transplantation-associated alloimmune thrombocytopenia, TAT: 器官接受者的淋巴细胞产生抗外来移植物（血小板 ）的特异性抗体；或供体器官中残留的淋巴细胞产 生抗宿主血小板的抗体
移植相关同种异体 免疫性血小板减少 症
自身 抗体 自发性血小板减少 症
HPA-1a,HPA-3,HPA-5b
多数位于GPⅡb/Ⅲa GPIb/IX/V，少数位 于 GPIV/V 和 GPIa/IIa 同上
继发于母体自发性 血小板减少症
抗体检测及交叉配血
血小板相容性检测
抗原定型
抗体检测
交叉配型
建立血小板供者库
自身免疫性血小板减少症 药物引起的血小板减少症 移植相关的血小板减少症
血小板相关疾病-血小板输注无效(PTR）
Platelet transfusion refractoriness, PTR: 患者接受充足治疗剂量 （≥2.5x1011个/次）的血小板输注后，血液循环中血小板计数未见有效 提高，临床出血表现未见明显改善，处于血小板治疗不应状态。一般临 床上认为至少有2次及以上输注血小板效果不佳才能做出PTR诊断。 1.若输注后1小时 CCI〈 7500/μL 12小时 CCI〈 6000/μL 24小时 CCI〈 4500/μL 连续3次，可判断为血小板无效输注 2.血小板恢复（回收率）百分率（PR%） 若输注血小板24小时后，PR%〈20%，可判断为血小板无效输注
血小板相关疾病- 新生儿同种免疫血小板减 少症(FMAIT/NAIT) 胎儿血小板 ↓ 怀孕或生产时进入母体循环 ↓ 胎儿血小板刺激母体产生抗体 ↓ 母亲IgG抗体通过胎盘进入胎儿体内使胎 儿血小板致敏 ↓ 血小板破坏增加 ↓ 发生FAIT
血小板相关疾病- 新生儿同种免疫血小板减 少症(FMAIT/NAIT)
第一胎即可发病； 病死率约13%； 治疗：输入相合的血小板以提高患儿的血小板数， 如找不到相合的血小板，可以输注经洗涤和辐射的 母亲血小板，也可给患儿做放血治疗； 治疗前交叉配血：以母亲血清与供者血小板进行交 叉配合试验； 预防：母亲在孕期可进行血浆置换
被动免疫血小板减少症及移植相关的同种免 疫血小板减少症
ABH不相容血液后,一部分输入的血小板迅速被破坏,而另外的血小板其 生命力不受影响.
血小板抗原 白细胞抗原：抗原，主要是HLA-A
和HLA-B位点的抗原（少量表达的HLA-C抗原）。 HLA-Ⅰ类分子为血小板的固有蛋白，少量从血浆中 吸附。血小板HLA抗原的免疫原性比白细胞弱。
指示红细胞 （人IgG致敏红细胞） 血小板谱细胞 （三人份O型混合血小板） 50μl/孔 50g,5min离心 洗涤3次 患者血清/血浆 50μl/孔 水浴30min 洗涤5次 阳性 抗人IgG 各50μl/孔 200g,5min离心
反应板 （已包被血小板单抗）
血小板单层 阴性 200g,5min离心
阳性反应
阴性反应
简易致敏红细胞血小板血清学试验 SEPSA
直接测定法
血小板表面结合血小板抗体的测定
间接测定法
血清内抗血小板抗体的测定
交叉配血试验
选择配合的血小板供体
质量控制
阴阳性对照
ELISA法(酶联免疫试验)
单克隆抗体免疫固定血小板抗原方法（MAIPA）：该法先制备羊抗鼠IgG包被 的多孔板，另外，将鼠抗人血小板糖蛋白单克隆抗体和带有抗体的血小板共 同孵育，再将孵育后的复合物加入多孔板，孵育，洗涤，最后加入酶联羊抗 人抗体和酶反应底物后显色，定量测定血小板抗体。
血小板相关疾病-输血后紫癜 HPA-1a是引起该病的主要抗原。我国绝大部分人为HPA-1a抗 原阳性。 实验室检查：血小板计数降低、骨髓巨核细胞增生活跃、血 清学检查血小板抗体存在但效价和病情无关。 本病输血小板无效，甚至有加重病情的危险，肾上腺皮质激 素不能缩短病程，但是，有可能改善出血症状。 主要治疗措施为血浆置换或换血，换血浆优于换全血。在输 血后血小板显著减少和发生严重出血症状时，应立刻做血浆 置换，一次交换65%～85%的血浆量，平均在1～5天后出血症 状减退，血小板数目上升。 尽可能避免或减少输注血小板及含血小板的血液制品。
血小板抗原抗体
广州医科大学附属第五医院 输血科
目录
血小板抗原 血小板抗体 抗体检测及交叉配血 血小板相关疾病
血小板抗原
血小板抗原泛指存在于血小板膜的能够刺激机体产生抗体, 并能与之结合的血小板膜蛋白质和糖分子.
血小板相关抗原:
红细胞血型抗原：ABO、Lewis和P系统抗原等，无RH抗原
白细胞抗原：HLA抗原 血小板特异性抗原（human platelet antigen，HPA）
血小板相关疾病
临床上由于血小板血型抗原引起的血小板减少 症主要有5种：
1. 血小板输注无效（PTR） 2. 输血后紫癜（PTP） 3. 新生儿同种免疫血小板减少症（FMAIT/NAIT） 4. 被动免疫血小板减少症（PAT） 5. 移植相关的同种免疫血小板减少症（TAT)
血小板相关疾病
血小板抗原
同种异体抗原 HLA-I,HPA,ABH 同种抗原 GPⅡb/Ⅲa,CD36 自身抗原 GPⅡb/Ⅲa,GPⅠb/Ⅸ 药物依赖性抗原 肝素、奎宁等 非特异性抗原
血小板免疫性疾病
血小板输注无效症 新生儿血小板减少症
临床病症
淤点 淤斑 流产 （颅内）出血 死亡
输血后紫癜
特发性血小板减少性紫癜（Idiopathic thrombocytopenia purpura, I T P）ITP [发病机制] 一、抗血小板抗体 约75%ITP患者可测到血小板相关自身抗体（PAIg），后 者多为IgG、IgA也可是IgM。抗体通过Fab片段与血小板膜 糖蛋白（GpⅡb/Ⅲa等）结合。带有抗体的血小板接触到单 核-巨噬细胞表面的FC受体，易被吞噬破坏。另外，抗血小 板 抗 体 对 巨 核 细 胞 分 化 也 有 抑 制 作 用 。 二、 血小板生成时间缩短 ITP血小板生存可缩短至2~3天或更短，ITP患者血小板 易在脾脏被扣留。脾脏可产生抗血小板抗体，脾内的巨噬细 胞参与破坏血小板过程，切脾对相当部分的患者有效。
血小板抗原
血型抗原：ABO、Lewis和P系统抗原等，无RH抗原 来源：血小板表面的A、B抗原来源主要有两个：大部分是血小板本身所
固有（从巨核细胞分化而来）；小部分是从血浆吸附而来。如体外将O
型血小板和A或B型血清温育，血小板就会带上A或B抗原。 不同个体间血小板膜ABH抗原量存在差异;