基因定型
➢ 限制性片段长度多态性分析（RFLP） ➢ 序列特异性寡核苷酸聚合酶链反应(PCR-SSO) ➢ 序列特异性引物聚合酶链反应(PCR-SSP)
血小板抗原定型
1aa 2aa 3ab 4aa 5aa 6aa 7aa 8aa 9aa 10aa 11aa 12aa 13aa 14aa 15ab 16aa 17aa
用途： （1）健康人群HPA基因分型，建立已知HPA基因型的血小板献血员库。 （2）检测受者HPA基因型，以便从血小板献血员库中寻找与其HPA基因型相
匹配的血小板供者。 （3）检测患者HPA基因型，辅助临床胎儿/新生儿免疫性血小板减少症、输
血后紫癜及血小板输注无效症等疾病的病因诊断。 （4）对特定区域或种族人群HPA基因分型，可为人类遗传学研究提供相关
巨核祖细胞
血小板
胞质块脱落
幼巨核细胞 巨核细胞
血小板形态
静息状态
活化状态
血小板抗原
➢血小板“非特异性”抗原
HLA-Ⅰ类抗原 ABH抗原
➢血小板“特异性”抗原
HPA抗原
HPA抗原
主要存在于血小板膜的GP分子上，也少量存 在于血管内皮细胞、结缔组织细胞和平滑肌细 胞。 1990年国际输血协会血小板免疫学工作组提 出了HPA命名，以发现的时间顺序排列：HPA-1 、HPA-2、HPA-3等系统。
极少数为ABO抗体 少数为抗GPIa/IIa抗体
多数位于GPⅡb/Ⅲa GPIb/IX/V，少数位于 GPIV/V 和 GPIa/IIa
同上 抗原位于GPⅡb/Ⅲa和
GPIb/IX 抗原表位是PF4
举例——NAIT
母体同种异体抗 体通过胎盘
母体同种异体免疫 胎儿血小板减少
胎盘屏障
Y
YY Y
NAIT
新生儿同种异体免疫 性血小板减少症
血小板输注无效症
血小板输血后紫癜
被动同种异体免疫 性血小板减少症 移植相关同种异体 免疫性血小板减少症
HLA / HPA 抗 体
HPA1a(78%), HPA5b(19%) HPA-2,3,4(3%),HPA-15,HPA-9bw, Anti-CD36 HLA-I抗体50~80% ,HPA17~25%(日本人为HPA-2b),
HPA抗原
已确定了33个HPA，其中12 个抗原为双等位基因表 达（HPA-1,-2,-3,-4，-5和-15）。其中高频率抗原命 名a，低频率抗原命名b。其余21个抗原为低频率抗原， 尚未发现对偶抗原，命名为bw。
单核苷酸多态性（SNP）:33个HPA中均已搞清楚基因 背景，其中32个HPA的多态性型是由一个氨基酸置换所 致，而这又是由编码血小板膜糖蛋白（GP）基因的一 个核苷酸的不同所致。
NAIT
NAIT
血小板体检测常用方法
指标
方法 功能性
试验
酶标法
荧光法
固相凝集法
应用 抗体检测 √
血小板抗原抗体检测 及临床应用
长春博德生物技术有限责任公司 郭超
目 录 / contents
01 血小板抗原 02 血小板抗体与疾病 03 血小板抗体检测的意义和临床应用
血小板简介
血小板：D:2-5um V:红细胞*1/5
功能：促进止血和加速凝血 正常范围：100-300×109/L
来源：
骨髓干细胞 多功能祖细胞
资料和证据。
血小板抗体的产生方式
输血小板、红细胞（尤其 是没有滤白的红细胞） 怀孕
移植（骨髓、器官）
药物、自身免疫
以上途径产生的血小板同种抗体与血小板上 的相应抗原结合，导致血小板被内皮网状系统清除。
抗体 分类 同种 抗体
同种异 体抗体
自身 抗体
药物依 赖性抗
体
血小板抗体与部分相关疾病
疾病
格兰茨曼血小板功能 不全病
胎母同种异体免疫血小板减少症（fetomaternal alloimmune thrombocytopenia，FMAIT）致病机理与新生儿溶血病（HDN） 相似，前者是由胎儿父母血小板抗原不合引起的血小板减少症， 后者为红细胞抗原不合引起的溶血性疾病。 由于胎儿遗传自父亲的血小板抗原刺激母体产生IgG型的抗血 小板抗体，该抗体能通过胎盘进入胎儿体内并与具有相应抗原 的血小板结合，此致敏血小板在胎儿的血液循环中被清除而使 得胎儿血小板减少，出现瘀点和瘀斑，其严重者会导致神经系 统损伤（占已报道病例的20%）、10%出现颅内出血(死亡率近 100%）。 因多数病例在出生后才得以诊断，故此病也称作新生儿同种 异体免疫血小板减少症。 初次妊娠妇女即可发生FMAIT，其发病率大约为1/800-1500 。
HPA-15, anti-CD36 HPA-1a,HPA-1b,HPA-2b,HPA-3a,HPA-3b,HPA-15,
anti-CD36 HPA-1a,HPA-5b
HPA-1a,HPA-3,HPA-5b
自发性血小板减少症
继发于母体自发性 血小板减少症
奎宁/奎尼丁抗体 所致疾病
肝素抗体所致疾病
其它抗体 抗GPⅡb/Ⅲa抗体
HPA-14bw不具有单核苷酸多态性。其核苷酸置换发 生在 AAG1929-31。
HPA抗原
HPA抗原
血小板抗原定型
血清学定型
➢ 即用已知特异性抗体检测血小板血型抗原 ➢ 缺点：特异性抗体来源困难
---人血清中血小板抗体通常为多特异性 ---单克隆抗体匮乏，目前国际上仅有HPA-1a单抗，
无其它HPA单抗。
NAIT临床表现
FMAIT患儿病情变化较大，具有自限性，常在出生后 2-3周恢复。 轻度血小板减少患儿有时没有任何临床症状。病情较重患儿
临床表现为皮肤、体内外黏膜出血，出现紫癜、瘀点或瘀斑。
严重患儿可能发生颅内出血（intracranial haemorrhage， ICH），占10%。
与FMAIT相关的ICH 80%发生在子宫内，其中14%发生在妊娠20 周前，28%发生在妊娠30周前。
NAIT早期诊断与筛查
母体血清抗HPA抗体检测，然而母体抗体水平到 预产期时逐渐下降，约有30%的病例抗体阴性。
父母双亲的HPA基因检测，在高加索地区采取对 其HPA-1和HPA-5基因检测，而在亚洲地区应考虑进 行HPA-4和HPA-5基因检测。
父母双亲交叉配型实验，将母体血清与父亲血小 板进行交叉配型实验，即使不能确切知道不相合的 抗原，但这种方法也能发现母体是否存在血小板同 种异体免疫反应。