间接免疫荧光操作步骤:
1.固定细胞。
(固定液配方:甲醛和丙酮比例1:1)将配好的固定液
加入细胞中,室温作用10min,
2.PBS洗2遍,每次洗5min。
3.封闭。
封闭液为含1%BSA的PBST。
37度静置作用1h。
4.PBS洗2遍,每次洗5min。
5.一抗作用。
一抗稀释液为含1%BSA的PBST。
37度静止作用1h。
6.PBST洗4遍,每次洗5min。
7.二抗作用。
二抗稀释液为含1%BSA的PBST。
37度静止作用1h。
8.PBST洗4遍,每次洗5min。
9.细胞核染色。
DAPI染色,室温作用10min。
10.PBST洗2遍,每次洗5min。
11.滴加缓冲甘油(含50%甘油的水溶液)
(学习的目的是增长知识,提高能力,相信一分耕耘一分收获,努力就一定可以获得应有的回报)
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