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间接免疫荧光操作步骤

间接免疫荧光操作步骤:
1.固定细胞。

(固定液配方:甲醛和丙酮比例1:1)将配好的固定液
加入细胞中,室温作用10min,
2.PBS洗2遍,每次洗5min。

3.封闭。

封闭液为含1%BSA的PBST。

37度静置作用1h。

4.PBS洗2遍,每次洗5min。

5.一抗作用。

一抗稀释液为含1%BSA的PBST。

37度静止作用1h。

6.PBST洗4遍,每次洗5min。

7.二抗作用。

二抗稀释液为含1%BSA的PBST。

37度静止作用1h。

8.PBST洗4遍,每次洗5min。

9.细胞核染色。

DAPI染色,室温作用10min。

10.PBST洗2遍,每次洗5min。

11.滴加缓冲甘油(含50%甘油的水溶液)
(学习的目的是增长知识,提高能力,相信一分耕耘一分收获,努力就一定可以获得应有的回报)
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